Чистый CO ₂ коэффициентов ассимиляции в воздухе были измерены с прикрепленными листьями в теплице в условиях насыщенного света с использованием инфракрасного газоанализатора (Li ‐ 6400; Li ‐ Cor, Inc.). Температуру листа поддерживали на уровне 28 ° C с CO ₂ при 360 ppm. ¹⁴ Эксперименты по маркировке C были проведены с 5-недельными растениями. Растения помещали в герметичную камеру, и ¹⁴ CO ₂ выделялось в результате реакции Ba ¹⁴ CO ₃ с молочной кислотой. Мечение растений проводили в течение 4 ч. После импульса растения или отдельные листья замораживали в жидком азоте, измельчали ​​в смеси этанол / хлороформ / вода и аликвоты использовали для обнаружения ВЭЖХ.Собирали фракции, содержащие сахар и сахарные спирты, и определяли удельную радиоактивность (Beckman LS7000; Beckman Instruments Inc., Ирвин, Калифорния). Некоторые растения выдерживали на нормальном воздухе в течение 24 ч после маркировки и обрабатывали, как указано.

Результаты

Фенотип растения

Рост линии OB на раннем этапе развития был медленнее, чем у линии дикого типа. Однако после 11 недель роста биомасса растений OB была немного выше, чем у линии SR1, как у нестрессированных растений, так и у растений, подвергнутых стрессу 150 мМ NaCl в течение 4.5 недель. Длина стеблей достоверно различалась — на 16 ± 5% (табл. 1). Скорость фотосинтеза исходных листьев (данные не показаны) были одинаковыми для обоих вариантов, увеличение вегетативного роста, по-видимому, было связано с подавлением созревания регенеративных органов (таблица 2). Различия, которые развивались у более старых растений, не были связаны с разной средой, потому что OB и SR1 выращивались бок о бок в одних и тех же гидропонных резервуарах, которые постоянно контролировались, и количество питательных веществ (в 0.25 × раствор Хогланда) корректировали каждый второй день. Концентрация калия поддерживалась на уровне 1 мМ, чтобы уменьшить количество K ⁺ , которое могло бы использоваться в качестве внешнего осмозащитного средства, а затем уменьшить осмотический эффект полиолов в линии OB (как наблюдалось, когда K ⁺ был доступны в более высоких количествах; данные не показаны). Никаких различий в росте корней между двумя линиями не наблюдалось.

После 11 недель роста отличий появлялось все больше.На стадии цветения два или три верхних листа под соцветием OB-растений были скручены и имели меньшую площадь по сравнению с листьями дикого типа того же возраста развития (рис. 1). Цветочные бутоны OB характеризовались короткими цветоножками и чашелистиками, но количество открытых цветков было примерно одинаковым у OB и SR1. Цветочные почки образовывались в одно и то же время у обеих линий, и зрелые цветы развивались неотличимо у обеих линий, но большинство бутонов, цветков и семенных коробочек были прерваны у линий OB (рис.2). К 11-недельному возрасту количество семенных коробочек у растений OB составляло примерно четверть от количества семенных коробочек у растений SR1, хотя новые цветочные зачатки постоянно появлялись в OB (Таблица 2). Побег, особенно в верхней части, был удлиненным у растений OB с более длинными междоузлиями, но с тем же числом листьев. За исключением этих верхних листьев, которые развились одновременно с соцветием, все остальные листья были неотличимы от листьев SR1. После 4,5 недель роста в 150 мМ NaCl растения OB также показали небольшое увеличение роста по сравнению с растениями SR1 с той же разницей между линиями, что и в контрольных условиях.

Рис. 1.

Листья табака OB и SR1 из областей, близких к соцветиям. Самые молодые листья трансгенной линии OB скручены и меньше, чем листья сопоставимого возраста развития у растений SR1.

Рис. 1.

Листья табака OB и SR1 из областей, близких к соцветиям. Самые молодые листья трансгенной линии OB скручены и меньше, чем листья сопоставимого возраста развития у растений SR1.

Рис.2.

Верхняя часть стеблей растений SR1 и OB. Соцветие растений линии OB (справа) характеризуется меньшим количеством бутонов, которые остаются более мелкими и медленнее развиваются. Многие бутоны уже распустились. Различия в размере листьев между SR1 и OB-растениями очевидны. У растений OB удлиненные междоузлия.

Рис. 2.

Верхняя часть стеблей растений SR1 и OB. Соцветие растений линии OB (справа) характеризуется меньшим количеством бутонов, которые остаются более мелкими и медленнее развиваются.Многие бутоны уже распустились. Различия в размере листьев между SR1 и OB-растениями очевидны. У растений OB удлиненные междоузлия.

Параметры роста растений SR1 и OB

Параметры роста растений SR1 и OB

Репродуктивные структуры растений SR1 и OB

Репродуктивные структуры растений SR1 и OB

Концентрации полиола

Опадение цветков обычно указывает на нарушение притока питательных веществ в развивающиеся раковины регенеративных органов (Dybing et al ., 1986; Daie, 1996). Распределение углеводов и основных катионов в различных органах было проанализировано, чтобы установить доступность ассимилятов и оценить поток питательных веществ в различных органах. На рис. 3 показано количество сахаров и сахарных спиртов для растений OB и SR1.В обеих линиях разные органы характеризовались примерно одинаковым количеством сахаров, но myo, -инозитол, как правило, были ниже у OB-растений. Ранее было показано, что количество myo -инозитола значительно снизилось и коррелировало с производством сорбита для трансгенного табака с инженерным высоким накоплением сорбита (Шевелева и др. ., 1998). В случае растений OB, myo -инозитол является предшественником d-ононита, таким образом, пул myo -инозитола должен быть частично истощен, как отмечалось ранее (Шевелева et al ., 1997). Наибольшие количества обоих полиолов наблюдались в меристематических листьях. Концентрации маннита в растениях, выращенных без солевого стресса, были в 5–10 раз выше в меристемах, чем в более старых исходных листьях, а концентрации d-ононита были примерно в три раза выше. Концентрации полиолов в развивающихся и зрелых цветках были выше, чем в исходных листьях (рис. 3). Как и ожидалось, количество myo, -инозитола и d-ононита увеличивалось во время стресса в исходных листьях, аналогично увеличению, о котором сообщалось ранее. (Шевелева и др. ., 1997), но в меристемах и листьях, наиболее близких к меристемам, концентрации d-ононита не увеличивались так сильно, как в исходных листьях в стрессовых условиях.

Рис. 3.

Распределение сахаров и сахарных спиртов в SR1 и линии OB в разных органах. Растения выращивали в 0,25 мМ растворе Хогланда без (контроль) или 150 мМ NaCl (стресс). Самые молодые полностью развитые листья (листья с 5 по 7 от меристемы) были взяты в качестве исходных листьев, в то время как листья с 1 по 3 от меристемы были использованы как незрелые листья.Верхний стебель включал верхушку на 5 см ниже соцветий. Почки снимали до того, как стали видны лепестки. Образцы были взяты от трех растений в каждом эксперименте на рис. 3 и 4.

Рис. 3.

Распределение сахаров и сахарных спиртов в SR1 и линии OB в разных органах. Растения выращивали в 0,25 мМ растворе Хогланда без (контроль) или 150 мМ NaCl (стресс). Самые молодые полностью развитые листья (листья с 5 по 7 от меристемы) были взяты в качестве исходных листьев, в то время как листья с 1 по 3 от меристемы были использованы как незрелые листья.Верхний стебель включал верхушку на 5 см ниже соцветий. Почки снимали до того, как стали видны лепестки. Образцы были взяты с трех растений в каждом эксперименте на рис. 3 и 4.

Ионные отношения

На рис. 4 показано распределение катионов для линий SR1 и OB. Статистически для всех тканей не было обнаружено различий в K ⁺ между двумя линиями. Однако в верхнем стебле и самых молодых листьях вблизи меристемы в OB были измерены несколько более низкие концентрации K ⁺ по сравнению с SR1.Что касается Ca ²⁺ , не было различий в исходных листьях, тонких листьях и цветочных бутонах, но верхние стебли растений линии OB накапливали больше Ca ²⁺ . Концентрации магния, показанные только для меристематических листьев, были ниже в линии OB, чем в листьях дикого типа сопоставимого возраста. Наиболее интересное различие между SR1 и OB наблюдалось при накоплении Na ⁺ в условиях солевого стресса. Во всех проанализированных тканях линия OB накапливала значительно меньше Na ⁺ .Все катионы вместе взятые, меристемы и цветки у OB-растений имели значительно более низкую концентрацию катионов в нормальных и стрессовых условиях по сравнению с SR1.

Рис. 4.

Катионы в органах растений SR1 и OB через 12 недель. Аликвоты, взятые для катионного анализа, были из тех же экстрактов, что и на рис. 3.

Рис. 4.

Катионы в органах растений SR1 и OB через 12 недель. Аликвоты, взятые для катионного анализа, были из тех же экстрактов, что и на рис.3.

Измерения ксилемы

Концентрации сахаров, полиолов и трех катионов определяли в ксилемном соке, взятом из верхней части стебля, где наблюдалось скручивание листьев (рис. 5). Был обнаружен только след сахарозы. OB-растения содержали меньше глюкозы, фруктозы, myo -inositol, K ⁺ и Ca ²⁺ по сравнению с растениями SR1. Глицерин был обнаружен в низких концентрациях одинаково в обеих линиях. Солевой стресс растений не привел к значительным изменениям этих ионов и метаболитов.Низкие концентрации натрия были обнаружены у стрессированных растений, которые были незначительно выше у растений OB, чем у SR1. d-ононитол присутствовал в ксилеме в низких концентрациях, но маннитол присутствовал в значительном количестве. В соке флоэмы, собранном в ЭДТА с растений, поддерживаемых при квантах 100 мкмоль ^-2 с ^-1 маннит был в 15 раз более распространен по сравнению с d-ононитом у всех растений. Измерения флоэмы не показаны, поскольку эти данные были получены с помощью метода EDTA, который, возможно, исказил количество транспортируемых углеводов (King and Zeevaart, 1974; Chino et al ., 1991). Однако отношение маннита к d-онониту неуклонно увеличивалось по направлению к верхушке растения, что было интерпретировано как означающее, что маннитол легче транспортируется, чем d-ононитол, и что он накапливается в самых молодых тканях и в цветках.

Рис. 5.

Углеводородный и ионный анализ в ксилемном соке. (A) Сахар и сахарные спирты в ксилемном соке растений SR1 и OB. (B) Количество основных катионов в ксилемном соке растений SR1 и OB. Ксилемный сок брали с верхних 10 см стеблей, прилегающих к цветкам 12-недельных растений.Глюкоза, глюкоза; фрук, фруктоза; ино, мио -инозитол; оно, д-ононитол, человек, маннитол; гли, глицерин. Ксилемный сок собирали с 2 или 3 растений в пяти экспериментах.

Рис. 5.

Углеводородный и ионный анализ в ксилемном соке. (A) Сахар и сахарные спирты в ксилемном соке растений SR1 и OB. (B) Количество основных катионов в ксилемном соке растений SR1 и OB. Ксилемный сок брали с верхних 10 см стеблей, прилегающих к цветкам 12-недельных растений. Глюкоза, глюкоза; фрук, фруктоза; ино, мио -инозитол; оно, д-ононитол, человек, маннитол; гли, глицерин.Ксилемный сок собирали с 2 или 3 растений в пяти экспериментах.

Обсуждение

Накопление новых продуктов в линии OB привело к фенотипу нормального вегетативного роста с последующим изменением длины междоузлий, уменьшением площади молодых листьев, скручиванием листьев и расхождением цветочных почек. Этот фенотип также коррелирует с наибольшим количеством маннита и d-ононита в пораженных тканях растений и, вероятно, связан с характеристиками экспрессии промотора 35S, используемого в обеих генных конструкциях.Каждый полиол в линии OB накапливался примерно в том же количестве, что и в линиях, производящих отдельные полиолы (Shen et al ., 1997, a , b ; Sheveleva et al ., 1997). Однако в листьях, наиболее близких к меристемам и цветкам, маннитол накапливался в том же количестве, что и в линии, продуцирующей только маннит (Shen et al ., 1997 a , b ), но в линии OB комбинированное увеличение маннита и д-ононита вызывало наблюдаемые эффекты роста.Линии-предшественники не проявляли этого фенотипа, но были неотличимы от SR1. Прогресс в развитии не изменился, потому что, когда обе линии выращивались в одних и тех же гидропонных резервуарах, они начинали цветение в одно и то же время. Кроме того, обе линии характеризовались одинаковым начальным количеством цветочных зачатков, только некоторые из которых превратились в семенные коробочки во всех линиях трансгенных растений. В конце концов, растения OB произвели в 4 раза меньше семенных коробочек, чем растения дикого типа.

Нарушение развития верхних листьев и регенеративных органов трансгенных растений, по-видимому, связано с доступностью питательных веществ для верхней части растений.Предполагается, что существует связь между фенотипом и нарушениями во взаимоотношениях «поглотитель-источник», поскольку наиболее сильно пострадали органы со слабой начальной способностью поглотителя (цветочные почки). Оплодотворенные цветы и развивающиеся семена стали сильнее тонуть, а выжившие семенные коробочки возобновили нормальное развитие, хотя маннит и д-ононит продолжали присутствовать в больших количествах в этих условиях. Сообщалось об увеличении силы погружения по мере созревания семенных органов (Ho et al , 1989).Сила опускания как измеримый термин вызывает споры, потому что активность и размер поглотителей зависят от фотосинтеза, конкуренции между поглотителями и транспортными путями (Geiger and Shieh, 1993; Stitt, 1993) и спроса со стороны остальной части растения. Возможно, эти трансгенные растения, накапливающие полиол, можно использовать для измерения параметров силы поглощения. Обратите внимание, что изменение уровней регуляторов роста могло вызвать наблюдаемый дисбаланс в транспорте углеводов, но эти параметры не измерялись.

Осмотический дисбаланс, скорее всего, вызванный полиолами, мог повлиять в основном на транспортные отношения, а не на развитие органов. Если более низкие концентрации сахара означают снижение потока питательных веществ в развивающиеся семена, возможно, присутствие двух полиолов не влияет на восприятие сахара и передачу сигнала как такового . Предполагается, что линия OB страдала от частичного дефицита углеводов как источников энергии для метаболизма на ранних стадиях цветения и заполнения семян.Согласно измерениям сока флоэмы в стеблях, маннит составлял 10–15% от потока сахарозы. Хотя нельзя быть уверенным в том, что сок флоэмы, собранный с помощью метода ЭДТА, (King and Zeevaart, 1974) правильно сообщили о содержании углеводов, маннит во флоэме увеличивался больше, чем d-ононит и сахароза в верхней части стебля и в цветках. Большое количество маннита не направляется в катаболизм, хотя табак и сельдерей содержат гены, которые кодируют катаболический фермент маннитолдегидрогеназу (Williamson et al .1995; Everard et al ., 1997). В сельдерее фермент восстанавливает фосфорилированный маннит, который превращается в фрук-6-P, который направляется в цикл Кребса (Everard et al ., 1997). Маннитол — это транслоцированный полиол в сельдерее (Keller, 1991). Этот фермент, по-видимому, отсутствует в тканях цветка или экспрессируется в очень небольшом количестве. Сообщалось о связи между экспрессией этого гена и атакой патогена (Williamson et al ., 1995).

Листья, расположенные вблизи меристемы, цветки и сок ксилемы из верхней части стебля характеризовались более низким содержанием редуцирующих сахаров, сахарозы и ионов.Этот результат убедительно подтверждает интерпретацию автора о нарушениях во взаимоотношениях между поглотителем и источником, ответственных за фенотип. Такое поведение не наблюдалось с растениями, экспрессирующими только мио, -инозитол, O, -метилтрансфераза, ведущие к продукции d-ононита (Шевелева, и др., ., 1997), хотя количество d-ононита у этих растений было выше, чем у растений. растения линии ОБ.

Высокие концентрации маннита и d-ононита могли вызвать нарушения в стебле и цветках OB-растений, что указывает на то, что может существовать верхний предел концентрации дополнительных осмотически активных метаболитов, который может быть достигнут в трансгенных растениях.Неясно, что это за верхний предел, но есть несколько точек данных. На заводах, продуцирующих маннит (примерно 4 мкмоль г ^-1 fw; Tarczynski et al ., 1992), углерод, отведенный на маннит, составлял менее 1% от общего количества связанного углерода. У продуцентов д-ононитола линии I5A (Шевелева и др. ., 1997) после солевого стресса примерно 2% всего углерода было обнаружено в д-ононите. Краткосрочные эксперименты по маркировке ¹⁴ C растений OB (данные не включены) позволяют оценить, что менее 2–3% из ¹⁴ C-углерода депонировалось на полиолах в исходных листьях растений OB.Ожидается, что этот процент будет выше в меристематических листьях из-за характеристик промотора CaMV35S. После импульсного мечения целых растений в течение 4 часов с помощью ¹⁴ CO ₂ удельная радиоактивность восстанавливающих сахаров и сахарозы была примерно в 15 раз выше, чем у маннита и d-ононита. Однако после 24-часовой погони ожидаемое снижение удельной активности сахарозы, глюкозы и фруктозы (в 15-20 раз) контрастировало с незначительным снижением удельной активности d-ононитола. (20%) и маннит (25%), подчеркивая медленное обращение или постепенное превращение редуцирующих сахаров и сахарозы в полиолы.

Концентрацию маннита и d-ононита можно сравнить с накоплением сорбита в другой линии, экспрессирующей яблочную сорбитол-6-фосфатдегидрогеназу (Шевелева и др. ., 1998). В более чем 100 независимо созданных линиях сорбитол накапливался в больших количествах, до 130 мкмоль г ^-1 fw. При концентрации сорбита, превышающей приблизительно 15 мкмоль г ^-1 fw, у этих растений развивались некротические поражения и наблюдалась задержка роста. Количество углерода, отложенного в сорбите в этих растениях, могло превышать 20% фиксированного углерода, но даже при более низких концентрациях рост сильно пострадал.По всей вероятности, в этом случае на восприятие сахара повлияло большое количество постороннего полиола (Шевелева и др. ., 1998). Дополнительную поддержку дает другой эксперимент (данные не показаны). Когда OB-растения выращивали с использованием полноценного раствора Хогланда вместо 0,25, концентрация питательных веществ, аберрантное развитие регенеративных органов и верхних листьев было в значительной степени устранено. Этот результат снова убедительно указывает на недостаточное поступление питательных веществ как на главную причину наблюдаемого фенотипа.

Генетические манипуляции взаимодействиями источник-приемник изучались на ряде трансгенных линий. Достигнуто нарушение либо симпластической (нарушение плазмодесмы), либо апопластической (чрезмерная экспрессия инвертазы) стадий нагрузки (Lucas and Madore, 1988; von Schaewen et al ., 1990; Dickinson et al ., 1991; Heineke ). et al ., 1992; Bush, 1993; van Bel et al ., 1994; Sonnewald et al ., 1994). В этих экспериментах растения обычно демонстрировали задержку роста, накопление редуцирующих сахаров, сахарозы и крахмала в исходных листьях и развитие некрозов.Описанный здесь фенотип табачной линии OB отличается. Эффект накопления полиолов наблюдается только тогда, когда развивается много слабых поглотителей (например, цветочных почек), в то время как вегетативный рост этих растений немного усиливается. Фенотип может указывать на пределы стратегии избыточной экспрессии полиола, защищающей от стресса, в которой заинтересованы авторы. Как указывалось ранее (Sheveleva et al ., 1997), кажется, что стратегия накопления, индуцируемая стрессом, является предпочтительной, и что в равной степени необходимо учитывать органоспецифичность накопления.Из настоящего исследования и из более ранней работы с трансгенным табаком, накапливающим высокий сорбитол (Шевелева и др. ., 1998), можно сделать вывод, что существует предел количества полиолов, которые могут быть превращены в метаболически инертные, но осмотически активные, вещества. Однако существуют альтернативные возможности, с помощью которых защитные полиолы, которые синтезируются в исходных тканях и транспортируются во флоэме, могут снова мобилизоваться в поглощающих тканях.

Мы хотим поблагодарить г-жу Венди Чмара за помощь с анализами ВЭЖХ, Абризу Зегер за помощь в проведении тепличных экспериментов и Пэта Адамса за комментарии к рукописи.Работа была поддержана грантом Министерства энергетики, Отдела энергетических биологических наук (DE ‐ FG03–98ER20179.001) и, частично, Сельскохозяйственной экспериментальной станцией Аризоны и NEDO, Япония.

Список литературы

Адамс П., Томас Дж. К., Вернон Д. М., Бонерт Х. Дж., Дженсен Р. Г..

1992

Физиология растений и клетки

33

1215

Втулка DR.

1993

Ежегодный обзор физиологии растений и молекулярной биологии растений

44

513

Чино М., Хахаши Х, Накамура С., Осима Т., Тернер Х, Сабнис Д., Борковец В., Бейкер Д., Гирусс Г., Боннемейн Дж. Л., Дельрот С.

1991

Последние достижения в области транспорта флоэмы и компартментации ассимилятов

64

Дайе Дж.

1996

Распределение фотоассимилятов в растениях и сельскохозяйственных культурах

407

Dickinson CD, Altabella B, Chrispeels MJ.

1991

Физиология растений

95

420

Dybing CD, Ghasi H, Paech C.

1986

Физиология растений

81

1069

Everard JD, Cantini C, Grumet R, Plummer J, Loescher WH.

1997

Физиология растений

113

1427

Geiger DR, Shieh W ‐ J.

1993

Завод, клетки и окружающая среда

16

1017

Heineke D, Sonnewald U, Bussis G, Gunter K, Leidreiter K, Wilke I, Raschke K, Wilmitzer L, Heldt H.

1992

Физиология растений

100

301

Ho LC, Grange RI, Show AF.

1989

Transport of photoassimilates

306

Келлер Ф.

1991

Новый фитолог

117

423

King RW, Zeevaart JAD.

1974

Физиология растений

53

96

Лукас WJ, Мадоре Массачусетс.

1988

Биохимия растений

14

35

Новотный MJ, Reizer J, Esch F, Saier MH Jr.

1984

159

986

Шен Б., Дженсен Р.Г., Бонерт Х.Дж.

1997

Физиология растений

113

1177

Шен Б., Дженсен Р.Г., Бонерт Х.Дж.

1997

Физиология растений

115

527

Шевелева Е.В., Чмара В., Бонерт Х.Дж., Йенсен Р.Г.

1997

Физиология растений

115

1211

Шевелева Е.В., Маркес С., Чмара В., Зегер А., Йенсен Р.Г., Бонерт Х.Дж.

1998

Физиология растений

117

831

Smirnoff N, Cumbes QJ.

1989

Фитохимия

28

1057

Sonnewald U, Lerchl J, Zrenner R, Frommer W.

1994

Завод, клетки и окружающая среда

17

649

Ститт М.

1993

Завод, клетки и окружающая среда

16

1041

Tarczynski MC, Jensen RG, Bohnert HJ.

1992

Proceedings of the National Academy of Sciences, USA

89

2600

Van Bel AJE, Ammerlaan A, van Dijk AA.

1994

Планта

192

31

Von Schaewen A, Stitt M, Schmidt R, Sonnewald U, Willmitzer L.

1990

EMBO Journal

9

3033

Vernon DM, Tarczynski MC, Jensen RG, Bohnert HJ.

1993

Заводской журнал

4

199

Williamson JD, Stoop JM, Massel MO, Conkling MA, Pharr DM.

1995

Proceedings of the National Academy of Sciences, USA

92

7148

© Издательство Оксфордского университета

Московская милиция задержала и напала на журналистов, освещавших акции протеста

Вашингтон, Д.C., 8 августа 2019 г. — Российские власти должны позволить журналистам свободно и безопасно освещать акции протеста, заявил сегодня Комитет защиты журналистов после задержания нескольких журналистов и применения силы полицией против СМИ во время демонстраций в Москве в июле. 27 и 3 августа.

По сообщениям СМИ, 27 июля и 3 августа десятки тысяч человек вышли на улицы Москвы, чтобы выразить протест против решения городской избирательной комиссии запретить независимым кандидатам участвовать в муниципальных выборах, намеченных на сентябрь.Согласно местным сообщениям, на каждой из двух демонстраций полиция задерживала более 1000 человек.

Во время обоих протестов полиция игнорировала аккредитацию журналистов для прессы, угрожая им и препятствуя их работе, повреждая их оборудование и насильственно задерживая их, согласно этим сообщениям и Союзу журналистов России — неправительственному профсоюзу, который составил краткое изложение событий. нарушений на своей странице в Facebook.

«Московская полиция должна обеспечивать безопасность прессы, освещающей протесты, а не препятствовать или задерживать журналистов просто за то, что они выполняют свою работу», — сказал директор программы CPJ Карлос Мартинес де ла Серна в Нью-Йорке.«Эта агрессия в отношении независимой российской прессы — явная попытка запугать журналистов и подвергнуть цензуре освещение событий».

Действия полиции против журналистов включали следующие инциденты 27 июля и 3 августа, задокументированные союзом журналистов, а также местными неправительственными организациями (НПО) и независимыми СМИ:

• Полиция толкнула и ударила журналистку РосБизнесКонсалтинг (РБК) Елену Шевелеву 27 июля, сообщает независимый новостной портал Mediazona .
• 27 июля милиционеры ударили фотокорреспонденту Викторию Одиссонову по лицу и повредили фотоаппарат, сообщила «Новая газета ».
• Журналисты независимых СМИ, задержанные 27 июля без предъявления обвинения: Сергей Дик, Deutsche Welle ; Сергей Хазов-Кассия, Радио Свобода; Роман Голованов, Комсомольская правда ; Максим Кондратьев, Автозак Лайв; Павла Яблонского, Село ; Владимир Дергачев, РБК; Семена Красоткина, Частный корреспондент ; Евгений Рожков, Наш Север ; и Мария Светкова, Reuters, согласно сообщениям профсоюза.
• Трое журналистов — Баларам Усов и Наталья Тишкевич из DOXA и Илья Азар из Новой газеты — которые были задержаны на непродолжительное время 27 июля, им предъявлены потенциальные обвинения по пункту 5 статьи 20.2 административного кодекса страны, который касается нарушения установленного порядка проведение публичного собрания, согласно отчетам профсоюза.
• Журналисты, задержанные 3 августа: Елена Вавина из Ведомостей ; Владимир Роменский из TV Rain; Александра Семенова и Алексей Степанов из МБХ Медиа ; Алексей Мащенко из Два стула ; и Никита Павлюк-Павлюченко из Сноба.ru, по сообщениям профсоюза.

Кроме того, 27 июля полиция провела обыск в офисе независимой телекомпании TV Rain и допросила главного редактора Сашу Перепелову в связи с прямой трансляцией протеста телеканалом Rain и The Moscow Times .

В ГУВД Москвы не ответили на электронное письмо КЗЖ с просьбой прокомментировать ситуацию.

Защита и безопасность журналистов

Предупреждения отправляют партнерские организации в соответствии с их собственными процессами и стандартами проверки.Каждая участвующая партнерская организация несет ответственность за публикуемую ею информацию.

Дата отправки предупреждения на платформу.

Посягательства на физическую безопасность и неприкосновенность журналистов

убийств; похищения; угрозы и акты насилия против физической неприкосновенности журналистов, членов их семей и других представителей СМИ; нападения на источники журналистов из-за их сотрудничества с журналистами или СМИ.

Задержание и заключение журналистов

Произвольные, необоснованные или политически мотивированные аресты, задержания и тюремное заключение журналистов и других представителей СМИ.

Преследование и запугивание журналистов

Преследование журналистов и других средств массовой информации или субъектов; насилие или вмешательство, вызывающее повреждение или уничтожение журналистского оборудования или другого имущества; карательное или мстительное осуществление следственных налоговых или административных полномочий; произвольный отказ в доступе для журналистского освещения; угрозы частной жизни журналистов, угрозы статусу занятости, психологическое насилие, издевательства, домогательства в Интернете и кибер-издевательства;

Судебное запугивание: оппортунистическое, произвольное или досадное использование законодательства, включая законы о диффамации, борьбе с терроризмом, национальной безопасности, хулиганстве или экстремизме; выдача фиктивных или сфабрикованных обвинений;

Политическое запугивание, включая разжигание ненависти и использование общественными деятелями оскорбительных или унизительных выражений в отношении журналистов или средств массовой информации;

Другие формы запугивания и преследования.

Безнаказанность

Неспособность оперативно, независимо и эффективно расследовать преступления и правонарушения против журналистов и других средств массовой информации или субъектов и привлекать их к уголовной ответственности.

Другие действия, оказывающие сдерживающее воздействие на свободу СМИ

Действия, оказывающие сдерживающее воздействие на свободу СМИ, включая ограничительное законодательство, посягающее на свободу СМИ;

Цензура, вмешательство в редакционную свободу;

Угрозы конфиденциальности источников информации журналистов;

Необоснованная или неизбирательная блокировка веб-сайтов или платформ социальных сетей, взлом, наблюдение или перехват коммуникационных данных журналистов без надлежащей процедуры разрешения и т. Д.

Платформа была создана в тесном сотрудничестве с пятью крупными журналистскими организациями и организациями по свободе выражения мнений *, подписавшими Меморандум о взаимопонимании с Советом Европы. Они несут ответственность за предоставление проверенной информации о серьезных проблемах в отношении свободы СМИ и безопасности журналистов.

* Европейская федерация журналистов, Международная федерация журналистов, Ассоциация европейских журналистов, Статья 19, Репортеры без границ, Комитет защиты журналистов, Индекс цензуры, Международный институт прессы, Международный институт безопасности новостей, Фонд Рори Пека, Европейское вещание Союз, Международный ПЕН-клуб

Информация об источниках угроз подлежит уточнению.

Уровень 1

Охватывает наиболее серьезные и разрушительные нарушения свободы СМИ, включая, помимо прочего, убийство, убийство или прямую угрозу жизни журналистов или других представителей СМИ или членов их семей из-за их журналистской работы; физические нападения или любые действия, причиняющие тяжкие телесные повреждения журналистам или другим представителям средств массовой информации, или применение насилия для угрозы их физической безопасности; безнаказанность за любые подобные нарушения; длительное произвольное задержание или тюремное заключение журналистов из-за их профессиональной деятельности или статуса журналиста; произвольное закрытие медиапредприятия; и любые другие действия, представляющие серьезную угрозу или оказывающие серьезное влияние на свободу СМИ, как в сети, так и вне ее.

Уровень 2

Охватывает все другие серьезные угрозы свободе СМИ, включая, помимо прочего, физические нападения с причинением реальных телесных повреждений, акты запугивания и преследования; использование общественными деятелями угрожающих или грубых оскорблений в адрес представителей СМИ; необоснованное изъятие или повреждение имущества или оборудования; законы и постановления, необоснованно ограничивающие свободу СМИ или доступ к информации; действия, которые ставят под угрозу конфиденциальность источников или независимость государственных вещательных компаний; злоупотребление или непропорциональное использование законодательства; неправомерное использование государственных или иных полномочий для направления медиа-контента или наказания СМИ или журналистов; вмешательство в свободу СМИ через владение, контроль и регулирование; и другие действия, представляющие серьезную угрозу свободе СМИ как офлайн, так и онлайн.

В этом разделе представлен неполный перечень инструментов Совета Европы и прецедентного права ЕСПЧ. Эта информация не является юридической оценкой предупреждения и не должна рассматриваться или использоваться как таковая.

Рассчитывается как разница между количеством журналистов, о которых сообщается, находящимися под стражей на дату подачи предупреждений, и количеством журналистов, освобожденных с тех пор.

Рассчитывается как разница между общим количеством случаев безнаказанности, зарегистрированных на Платформе, и количеством разрешенных случаев безнаказанности.

ответов государств рассчитываются как сумма ответов государств, зарегистрированных на Платформе, вместе с количеством разрешенных дел.

ответов государств рассчитываются как сумма общего количества ответов государств, зарегистрированных на Платформе, вместе с общим количеством разрешенных дел.

Ответы включают ответы государств, записанные на Платформе, вместе с решенными делами.

Текст ici

Имексон индуцирует окислительную реакцию эндоплазматического ретикулума на стресс в клетках рака поджелудочной железы