МОСКОВСКИЙ ТЕАТР «ET-CETERA» П/Р А. КАЛЯГИНА — Записи спектаклей, творческих вечеров, архивные записи и другой видеоконтент на официальном YouTube-канале.

МОСКОВСКИЙ ДРАМАТИЧЕСКИЙ ТЕАТР ИМ. А.С. ПУШКИНА — Архивные записи спектаклей на YouTube-канале театра.

МОСКОВСКИЙ  ТЕАТР ИМ. ВЛ. МАЯКОВСКОГО — Прямые трансляции спектаклей. Расписание на сайте театра.

МАЛЫЙ ТЕАТР РОССИИ – Записи спектаклей, творческих вечеров, концертов, архивные записи на официальном YouTube-канале.

БОЛЬШОЙ ТЕАТР РОССИИ – Записи спектаклей на официальном YouTube-канале. Доступны после регистрации.

ТЕАТР ИМ. ЕВГ. ВАХТАНГОВА  — Прямые трансляции кино-театральных версий спектаклей на сайте ONLINETЕАТР.

МАРИИНСКИЙ ТЕАТР – Прямые трансляции спектаклей на сайте Mariinsky.TV, а также записи спектаклей и другой видеоконтент в онлайн-кинотеатре Okko и на YouTube-канале.

АЛЕКСАНДРИНСКИЙ ТЕАТР — Прямые трансляции в приложении «Триколор Кино и ТВ» (доступно в App Store и Google Play).

МОСКОВСКИЙ ТЕАТР «СОВРЕМЕННИК» — Антивирусный онлайн-проект «Доктор Чехов». Каждый день в 19:00 в Instagram актеры театра читают Чехова.

МОСКОВСКИЙ ТЕАТР «НОВАЯ ОПЕРА» —  Прямые трансляции концертов и видеозаписи

МОСКОВСКИЙ ТЕАТР САТИРЫ — Подборка видеозаписей спектаклей прошлых лет и текущего репертуара на сайте театра, а также прямые трансляции на сайте ONLINETЕАТР. 

МОСКОВСКИЙ ГУБЕРНСКИЙ ТЕАТР — #БЕСКОНТАКТНЫЙТЕАТР: видеоверсии некоторых спектаклей. Показы согласно репертуару — в тот же день и в тот же час, когда они должны были состояться. Записи публикуются на официальном сайте театра и на YouTube-канале.

МХТ ИМ. А.П. ЧЕХОВА— Спецрубрика «Наш ответ карантину» в Instagram. Актеры театра  делятся подробностями своей жизни вне стен любимого театра.

МИНИСТЕРСТВО КУЛЬТУРЫ И ДУХОВНОГО РАЗВИТИЯ РЕСПУБЛИКИ САХА (Якутия) — Подборка видеозаписей лучших спектаклей якутских театров на

— «Капитанская дочка» (12+), А.С. Пушкин. Государственный Академический Русский драматический театр им. А.С. Пушкина (г. Якутск). Режиссер Андрей Борисов.

— «Король Лир» (16+), У.Шекспир. Саха Академический театр им. П.А. Ойунского (г.Якутск). Режиссер Андрей Борисов.

— «Гулливер» (10+), Дж.Свифт. Театр кукол (г.Нерюнгри). Режиссер-постановщик Александр Иванов.

— «Воительница-Джырыбына» (12+) по мотивам олонхо Прокопия Ядрихинского-Бэдьээлэ. Театр «Олонхо» (г.Якутск). Режиссер-постановщик: Матрена Корнилова.

— «Камень» (12+), Мариус фон Майенбург. Мирнинский театр (г.Мирный). Режиссер Ярослав Рахманин.

— «Князь Игорь» (6+), опера в двух частях, А. Бородин. Государственный театр оперы и балета РС(Я) им. Д.К.Сивцева-Суоруна Омоллоона (г.Якутск). Режиссер Андрей Борисов.

— «Спартак» (12+), балет, музыка А. Хачатуряна, хореография Ю. Григоровича. Государственный театр оперы и балета РС(Я) им. Д.К.Сивцева-Суоруна Омоллоона (г.Якутск).

— «Марба» (12+), Нюрбинский театр (г.Нюрба). Режиссер Юрий Макаров.

— «Покуда жива любовь» (16+), Уильям Шекспир. Театр юного зрителя (г.Якутск). Режиссер-постановщик Александр Титигиров.

— Гала-концерт Республиканского театрального фестиваля «Желанный берег – 2019» (0+).

Помимо спектаклей на канале «Министерство Культуры Якутии» доступны видеосюжеты телеканалов о работе учреждений культуры, интервью, мастер-классы.

ЛИПЕЦКИЙ ТЕАТР ДРАМЫ ИМ. Л.Н. ТОЛСТОГО — Серия интернет-проектов «ВАКЦИНА ТЕАТРА» ВКонтакте. Записи онлайн-спектаклей транслируются с четверга по воскресенье с 19:00 (хранятся до 12:00 следующего дня).  Также в соцсетях проходит флеш-моб для зрителей по хэштегам #ВАКЦИНАТЕАТРА и #ТЕАТРТОЛСТОГО. Участвуют все желающие. 

ВЛАДИМИРСКИЙ ОБЛАСТНОЙ ТЕАТР ДРАМЫ — Сезон онлайн-трансляций спектаклей ВКонтакте

Расписание для просмотра:

24 марта 18:00 — А. Чеботарев, С. Жучков, С.Хромов «Андрей Боголюбский». Сказание о князе-строителе.

27 марта 18:00 — Международный день театра — А.Чехов «Три сестры». Мерихлюндии в 2-х частях.

29 марта 18:00 — Ив Жамиак «Господин, который платит». Комедия чувств в 2-х действиях.

1 апреля 18:00 — Н. Мазур «Кабаре. No сomments».

3 апреля 18:00 — И. Нетаньяху «Миры в столкновении». Драма обычных гениев в двух действиях.

5 апреля 18:00 — Е.Гришковец 

7 апреля 18:00 — Ю. О`Нил «Любовь под вязами». Американский готический диптих.

9 апреля 18:00 — У.Шекспир «Виндорзские насмешницы». Уютный трагифарс с одним антрактом.

11 апреля 18:00 — А. Фадеев «Молодая гвардия». Героическая трагедия.

МУРМАНСКИЙ ОБЛАСТНОЙ ДРАМАТИЧЕСКИЙ ТЕАТР — Подборка видеозаписей архива спектаклей ВКонтакте.  Первым был размещён спектакль «Игроки» по пьесе Н.В.Гоголя. Режиссёр-постановщик Л.Исмайлова (С-Петербург).

МОЛОДЕЖНЫЙ ДРАМАТИЧЕСКИЙ ТЕАТР (г.Тольятти) — Подборка видео спектаклей на сайте театра. Первыми были размещены спектакли “Самоубийца” (Н. Эрдман) и “Свадьба” (А. Чехов).

ОРСКИЙ ТЕАТР ИМ. А.С. ПУШКИНА — Архивные видеозаписи спектаклей. Ссылки на спектакли будут публиковаться ежедневно с 23 по 29 марта согласно репертуару. Видео будут доступны для просмотра на сайте театра и в соцсетях.

НИЖЕГОРОДСКИЙ ТЕАТР ДРАМЫ ИМ.М.ГОРЬКОГО — Подборка видеозаписей спектактей на портале Культура.рф.

БОЛЬШОЙ ТЕАТР КУКОЛ (С-Петербург) — Новые онлайн-форматы: Вконтакте — видеозаписи пяти спектаклей Руслана Кудашова: «Башлачев. Человек поющий», «Мы», «Вий», «Екклесиаст» и «Покаяние и прощение». А также спектакли Яны Туминой: «Оловянный солдатик» и «100 оттенков синег».  
На сайте Культура.РФ все видеозаписи, в том числе и спектакля «Мой дедушка был вишней». На портале

МОСКОВСКИЙ ОБЛАСТНОЙ ТЕАТР ЮНОГО ЗРИТЕЛЯ — Серия авантюр и экспериментов-онлайн на YouTube-канале и в соцсетях театра. Онлайн трансляции спектаклей (первым размещен спектакль «Каникулы Бонифация»). Театральный флешмоб — стихочелендж #ИГРАЕМВОНЛАЙН с участием Нонны Гришаевой. Живые онлайн беседы с актёрами. 

ЛИПЕЦКИЙ ТЕАТР КУКОЛ — Акция «Хорошее настроение=хорошее здоровье» на  mail.ru .  Первой размещена видеозапись спектакля «Медвежонок Рим-Тим-Ти» 0+

БРЯНСКИЙ ОБЛАСТНОЙ ТЕАТР КУКОЛ – Старт официального канала в YouTube: размещение видеозаписи спектакля  «Сказка о попе и работнике его Балде» 6+, год постановки – 2016 г.

КРАСНОЯРСКИЙ ТЕАТР КУКОЛ – Видео версия спектакля «Егоркина былина» на медиа-портале Культура24.ru Спектакль вошел в лонг-лист фестиваля «Золотая маска» и в программу краевого фестиваля «Театральная весна 2020».

МОЛОДЕЖНЫЙ ДРАМАТИЧЕСКИЙ ТЕАТР (г.Тольятти)  –  Видео записи спектаклей в новом разделе сайта.

ТЕАТР ЮНОГО ЗРИТЕЛЯ «ДИЛИЖАНС» (г.Тольятти) – Видео записи спектаклей на стене ВКонтакте по расписанию:  

27 марта  (пт.) 19:00  — В. Гюго, Дж.Верди «Король забавляется (Rigoletto)» (реж. В.Мартынов) 2017 г. 16+

28 марта  (сб.) 11:00 — В. Мартынов «Опасное путешествие Пакета по свалке» 2018 г. 6+
28 марта (сб.)  17:00

— М. Хейфец «Спасти камер-юнкера Пушкина» (реж. А. Серенко) 2019 г. 12+

29 марта (вс.)  11:00 — Е. Зубарева «Вверх Кармашками» 2018 г. 0+

29 марта (вс.)  17:00 — К. Симидзу «Гримерная» (реж. В.Мартынов) 2010 г. 12+

ЯРОСЛАВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ТЕАТР КУКОЛ  — Видео записи спектаклей в официальном YouTube-канале. В открытом доступе:

 — Рождественская история по мотивам сказочной повести Джанни Родари «Путешествие Голубой Стрелы». Режиссер-постановщик — Лауреат Национальной премии «Золотая маска», Лауреат театральной премии «Золотой софит» П.Васильев. Художник — Лауреат Национальной премии «Золотая маска», Лауреат театральной премии «Золотой софит» А.Торик . Премьера — 25 декабря 2014.

 — Музыкальная сказка для маленьких «Ладушки-ладушки» — спектакль-игра, в основе которого лежат две известные русские народные сказки, «Репка» и «Маша и медведь». Режиссер-постановщик Заслуженная артистка РФ Елена Иванова. Художник – Галина Солонина. Премьера 1 октября 2016 , 3+

ТВЕРСКОЙ ТЕАТР ЮНОГО ЗРИТЕЛЯ — до 29 марта онлайн трансляции спектаклей в официальном YouTube-канале  Ссылки на видео трансляции размещаются день в день, час в час ВКонтакте  Расписание трансляций на сайте театра.

Журнал Театр. • Парк «Зарядье» запустил онлайн-читки пьес конкурса «Кульминация»

 До 27 января на странице парка ВКонтакте  и его ютуб- канале ежедневно будут проходить читки пьес современных драматургов, которые входили в шорт-листы конкурса современной драматургии «Кульминация».

В этом году Союз театральных деятелей России, Фонд развития современного искусства и парк «Зарядье» при поддержке Фонда президентских грантов проводят пятый, юбилейный, конкурс «Кульминация».

В читках принимают участие актеры и режиссеры «Мастерской Брусникина».

«Пьесы года» разных лет по версии объединенного жюри «Кульминации» вы увидите в формате читок – лаконичном и минималистичном жанре постановки, – отмечают организаторы. –   Без декораций, без реквизита, костюмов и спецэффектов. Только артисты и текст».

Программа:

18 января в 20:00 – Роман Козырчиков «Тихий свет»

19 января в 20:00 – Юлия Поспелова «Леха»

20 января в 20:00 – Игорь Носовский «Остаться нельзя уехать»

21 января в 20:00 – Иван Антонов «Как я простил прапорщика Кувшинова»

22 января в 20:00 – Алексей Макейчик «Путаница»

23 января в 20:00 – Александра Фомина «Как Петюнина против всех была»

24 января в 21:00 – Викентий Брызь «Рашэн лалабай»

25 января в 20:00 – Елена Ерпылева «Жалкие»

26 января в 20:00 – Алексей Житковский «Горка»

27 января в 20:00 – Полина Бородина «Исход»

Напомним, что «Кульминация» — проект, созданный в 2016 году для поддержки и развития современной драматургии. Объединяет все действующие конкурсы драматургии России, выступая в роли конкурса конкурсов. Задачей проекта является формирование и представление широкой общественности и экспертам широкого среза российской драматургии.

По итогам проекта пьесы-участники конкурса получают широкое освещение в профессиональной среде, публикуются в ежегодном сборнике и рассылаются во все регионы страны.

Учреждён Фондом развития современного искусства, Союзом театральных деятелей Российской Федерации, Медиахолдингом «Эксперт» и с 2017 года — при поддержке Фонда Президентских грантов

Украина ввела санкции против российского интернета – Бизнес – Коммерсантъ

Во вторник президент Украины Петр Порошенко подписал указ, который вводит санкции сроком на три года в отношении российских компаний интернет- и медиаотрасли. Среди них — «Яндекс» и Mail.ru Group, соцсети «ВКонтакте» и «Одноклассники», «Лаборатория Касперского» и «Доктор Веб». Кроме того, санкции введены против РБК, «ТВ Центра», ВГТРК, «НТВ Плюс» и «Звезды». Указ в том числе запрещает доступ украинским пользователям к ресурсам и сервисам российских компаний. В МИД РФ “Ъ” заявили, что речь идет о «цензуре по политическим мотивам». Подписанный господином Порошенко документ предусматривает введение санкций в отношении 468 российских и украинских компаний и 1228 физических лиц.

Власти Украины ввели трехлетние санкции против российских компаний, в том числе Mail.ru Group, «Яндекса», «ВКонтакте», «Одноклассники», «Лаборатория Касперского» и «Доктор Веб». В списке также содержатся телекомпании «Первый канал», «ТВ Центр», РБК, ВГТРК, «НТВ-Плюс», «Звезда», ТНТ, РЕН ТВ, ОТР. Соответствующий указ, датированный 15 мая, опубликован на сайте президента Украины Петра Порошенко. Он вводит в действие решение Совета национальной безопасности и обороны от 28 апреля «О применении персональных специальных экономических и других ограничительных мер (санкций)».

Среди прочего документ вводит временную блокировку активов, ограничение торговых операций, запрещает вывод капиталов за пределы Украины и осуществлять госзакупки.

Этим указом украинские власти запрещают интернет-провайдерам предоставлять доступ пользователям к ресурсам и сервисам российских интернет-компаний.

Напомним, в конце апреля на официальном сайте президента Украины была опубликована петиция о том, что власти должны наложить санкции на «Яндекс». «Вышеупомянутая компания осуществляет экспансию на Украине, финансируется российским капиталом и представляет угрозу национальной безопасности»,— говорилось в тексте петиции.

«Мы же совершенно не хотим походить на обезьяну, которая кривляется перед зеркалом, и повторять эти обезьяньи ужимки. Поэтому на идиотичные решения мы точно не будем ничем отвечать. А будем наблюдать за тем, каким образом население Украины будут осваивать компьютерную грамотность, скачивать VPN-сервисы и анонимайзеры, обходить блокировки, не дискредитируя подобным образом недальновидные решения украинского руководства»,— заявил “Ъ” заместитель министра связи и массовых коммуникаций России Алексей Волин. Председатель комитета Госдумы по информационной политике, информационным технологиям и связи Леонид Левин считает, что «указ Порошенко в первую очередь наносит вред жителям Украины».

«Бизнес группы компаний «Яндекса», конечно, очень большой, и санкции не окажут на него негативного влияния. Но мы считаем Украину важной частью нашей работы и сожалеем, что санкции сводят на нет все многолетние усилия нашей команды. Главный пострадавший от санкций — это украинский пользователь»,— заявили в «Яндексе».

Mail.ru Group сообщила о «драматическом росте трафика самых популярных на территории Украины социальных сетей «ВКонтакте» и «Одноклассники», а также почтового сервиса Mail.Ru, в первой половине сегодняшнего дня». «»Одноклассники» — это в первую очередь развлекательная социальная сеть. Вместе мы найдем способ оставаться на связи, и 9,5 млн украинских пользователей ОК, наши партнеры и рекламодатели смогут пользоваться сервисами социальной сети так, как они привыкли»,— прокомментировали “Ъ” в «Одноклассниках».

«Это странный и малопонятный акт скорее не информационной, а экономической агрессии»,— заявил “Ъ” интернет-омбудсмен Дмитрий Мариничев. Господин Мариничев полагает, что исполнение указа о блокировке российских сайтов потребует от «украинских провайдеров значительных финансовых вливаний», далеко не все компании смогут «справиться с исполнением указа президента Украины», так как «не закупают такого класса оборудования».

«Запрет этот также сродни любым товарным войнам, и бьет как по бизнесу российских компаний, сервисы которых не будут представлены на Украине и они недополучат прибыль, так и по украинским пользователям, которые не смогут ими пользоваться, а компании — не смогут размещать рекламу»

— считает Дмитрий Мариничев. По его мнению, от запрета выигрывают лишь «зарубежные сервисы типа Google, для которых освобождается часть украинского рынка».

В новый санкционный список также вошли все банки, работающие в Крыму — крупнейшие из которых РНКБ, банк «Россия», Генбанк и ряд других, в том числе, те, кто уже лишился лицензии (например, Тальменка-банк). Санкции предусматривают два принципиальных ограничения — блокировка активов и временное приостановление права лиц распоряжаться принадлежащим им имуществом, а также приостановление исполнения финансовых и экономических обязательств (запрет предоставлять кредиты, займы, финансовые гарантии, а также финансирование через покупку ценных бумаг и запрет на покупку ценных бумаг). Те же ограничения накладываются на Газпромбанк, Россельхозбанк, СМП-банк, которые в Крыму не работают, но в отношении которых действуют санкции США. При этом у Газпромбанка есть ряд активов на Украине, а у СМП-банка и Россельхозбанка там бизнеса нет. Отдельно в списке выделен российский БМ-банк с формулировкой «предотвращение вывода капитала за территорию Украины». Появление в списке этого банка связано с ранее проведенным переименованием (в 2016 году), так как, по сути, это «банк плохих активов» экс-владельца Андрея Бородина.

Кроме того, в санкционном списке указаны все ключевые российские системы денежных переводов с формулировкой «запрет на согласование порядка деятельности на Украине» и «отмена регистрации договоров резидентов Украины в международной системе». Также в списке санкций указан Сбербанк-лизинг, однако в списке нет ни госбанков, ни их украинских «дочек». Санкции против этих банков были введены отдельным указом, который был принят 23 марта. Этот документ фактически полностью запретил этим банкам взаимодействие с материнскими структурами, в том числе предоставление и вывод капитала.

В целом данные санкции не имеют значения для большинства перечисленных в указе банков, так как они не имеют активов на Украине.

Негативное воздействие могут испытать Газпромбанк и Сбербанк-лизинг, их комментарии на момент публикации получить не удалось.

Под санкции также подпали компании «Алмаз-Антей», «Аэрофлот», «Вертолеты России», «Газпром авиа», Red Wings, Специальный летный отряд «Россия», «Трансаэро», «Рособоронэкспорт», КАМАЗ. Ограничительные меры коснулись компаний, представительства которых расположены на территории Крыма и Севастополя. Для них ограничиваются торговые операции на Украине, полностью прекращаются перевозки на территории страны, приостанавливаются экономические и финансовые обязательства.

Кроме того, в новый санкционный список вошли 1228 физлиц, которые посещали Крым, в том числе чиновники и высший состав вооруженных сил России. На год санкции введены в отношении министра обороны России Сергея Шойгу, главы Службы внешней разведки (СВР) Сергея Нарышкина, начальника Генштаба России Валерия Герасимова, министра сельского хозяйства Александра Ткачева, главы Чечни Рамзана Кадырова, помощника президента России Сергея Глазьева. В список также попали бывший уполномоченный по правам ребенка в России Павел Астахов, бывший президент РАН Владимир Фортов, гендиректор «Первого канала» Константин Эрнст, главный редактор телеканала Russia Today Маргарита Симоньян, журналисты Дмитрий Киселев и Алексей Пиманов. Бессрочно санкции введены в отношении директора Федеральной службы безопасности (ФСБ) Александра Бортникова, председателя Следственного комитета России (СКР) Александра Бастрыкина, заместителя генпрокурора России Виктора Гриня.

Официальный представитель МИД РФ Мария Захарова на вопрос “Ъ”, как она расценивает новые украинские санкции, ответила: «Как проявление цензуры по политическим мотивам».

«Киевский режим использует всевозможные силовые методы воздействия на своих граждан: от запрещения музыки и литературы до военной агрессии против своего народа»,— завила госпожа Захарова. «Европа и США безмолвствуют»,— добавила она.

Пресс-секретарь президента России Дмитрий Песков в эфире “Ъ FM”: «Это очередное проявление недружественной и недальновидной политики Киева в отношении Российской Федерации. Очередной шаг в цепи многих, которые нарушают права людей на Украине на получение информации, которые вредят интересам населения. Проявление подобной враждебности лишний раз подчеркивает, кто может стоять за пробуксовкой минских договоренностей». Читайте подробнее

Украинский премьер Владимир Гройсман заявил, что санкции могут быть отменены, «когда Россия откажется от своих планов». «Когда я слышу дискуссии о дальнейших действиях по санкционной политике, у меня есть только один ответ. Мы сегодня должны противостоять российской пропаганде. Поэтому санкции были введены за неуважение к международному праву и за нарушение границ суверенной страны»,— сказал украинский премьер. Он добавил: «Пересмотр санкций станет возможен, когда Россия заберет свои войска, свои вооружения (с востока Украины — “Ъ”)».

В Блоке Петра Порошенко “Ъ” заявили, что «это решение президента было вполне ожидаемым, оно должно предотвратить утечку из Украины финансовых средств, а также препятствовать российской пропаганде». В то же время источник “Ъ” отметил, что

эти запреты «легко выполнить в отношении банков и трудно в отношении медиа, так как люди привыкли смотреть российские каналы в интернете».

Пожелавший остаться неназванным собеседник “Ъ”, представляющий одного из ведущих интернет-провайдеров Украины, в свою очередь, добавил: «Есть масса способов обойти эти запреты — как их обходят в России, где ранее попал под запрет ряд украинских сайтов».

Вместе с тем, не все на Украине восприняли указ однозначно позитивно. Ведущий украинский медиа-юрист Татьяна Котюжинская отмечает, что указ нарушает права граждан на получение информации. По ее словам, «граждане имеют права смотреть все что угодно и делать свои выводы о ситуации в России и уровне российской пропаганды, который говорит сам за себя».

Роман Рожков, Елена Черненко, Юлия Локшина, Ксения Дементьева, Юлия Алексеева; Янина Соколовская, Киев

Управление образования администрации города Невинномысска — Органы администрации

ОБЩЕОБРАЗОВАТЕЛЬНЫЕ  ОРГАНИЗАЦИИ
№п/п	Наименование общеобразовательной организации (полное по уставу)	Почтовый адрес	Фамилия, имя, отчество руководителя	Контактные телефоны директора		E-mail	Сайт учреждения
				рабочий (с кодом)	сотовый
1	Муниципальное бюджетное  общеобразовательное учреждение средняя общеобразовательная школа № 1	357100 г. Невинномысск, ул. Гагарина,  62 «а»	Божко Наталья Викторовна	(86554)35881	8-962-001-72-83	sosh2. [email protected]	http://nevinka-school1.ru
2	Муниципальное  бюджетное общеобразовательное учреждение средняя общеобразовательная школа № 2	357101 г. Невинномысск, ул. Шевченко, 2	Маланин Максим Александрович,	(86554)59360	8-962-011-82-59	[email protected]	http://sh3.nevinsk.ru
3	Муниципальное  бюджетное общеобразовательное учреждение средняя общеобразовательная школа № 3	357100 г. Невинномысск, ул. Ленина,107	Еврокатова Елена Евгеньевна	(86554)34156	8-928-378-79-04	[email protected]	http://sh4.nevinsk.ru
4	Муниципальное  бюджетное общеобразовательное учреждение средняя общеобразовательная  школа № 5 имени Героя Советского Союза,Маршала Советского Союза Куликова В.Г.	357100 г. Невинномысск, ул. Кооперативная, 98	Попова Елена Николаевна,	(86554)35962	8-928-340-31-51	nevschool5@yandex. ru	http://school5-nev.ru
5	Муниципальное  бюджетное общеобразовательное учреждение лицей № 6	357108 г. Невинномысск, Б.Мира, 9	Агаркова Марина Васильевна	(86554)71724	8-928-009-59-05	[email protected]	http://sh6.nevinsk.ru
6	Муниципальное бюджетное  общеобразовательное учреждение средняя общеобразовательная школа № 7	357113 г. Невинномысск,  ул. Школьная, 52	Гусейн Ирина Леонидовна	(86554)75200	8-928-634-89-80	[email protected]	http://sh7.nevinsk.ru
7	Муниципальное  бюджетное общеобразовательное учреждение средняя общеобразовательная школа № 8 имени Героя Советского Союза Т.Н. Подгорного	357112 г. Невинномысск, ул.30 лет Победы,6	Рыжкина Татьяна Александровна	(86554)777773	8-928-635-39-52	[email protected]	http://sh8.nevinsk.ru
8	Муниципальное  бюджетное общеобразовательное учреждение гимназия № 9	357112г. Невинномысск, ул. Чайковского, 2«а»	Сверкунова  Ольга Александровна	(86554)71227	8-928-303-58-75	[email protected]	http://sh9.nevinsk.ru
9	Муниципальное  бюджетное общеобразовательное учреждение для детей и подростков, имеющих высокие интеллектуальные способности, гимназия № 10 ЛИК	357108 г. Невинномысск, ул. Менделеева, 16	Калкаев Александр  Андреевич	(86554)71531	8-928-635-19-64	[email protected]	http://lik10.ru
10	Муниципальное  бюджетное общеобразовательное учреждение средняя общеобразовательная школа № 11	357108 г. Невинномысск, ул. Менделеева,5 «а»	Рябова Галина Ивановна,	(86554)71817	8-928-014-78-10	[email protected]	http://sh21.nevinsk.ru
11	Муниципальное  бюджетное общеобразовательное учреждение средняя общеобразовательная школа № 12	357118 г. Невинномысск, ул. Северная, 9 «а»	Белякова Ирина  Владимировна	(86554)71396	8-928-358-44-73	[email protected]	http://sh22.nevinsk.ru
12	Муниципальное  бюджетное общеобразовательное учреждение средняя общеобразовательная школа №  14	357114 г. Невинномысск, ул. Луначарского, 28	Кубрин Евгений Валентинович	(86554)73823	8-961-484-71-64	[email protected]	http://sh24.nevinsk.ru
13	Муниципальное  бюджетное общеобразовательное учреждение средняя общеобразовательная школа № 15	357118 г. Невинномысск, ул. Северная, 14	Мухоед Светлана Петровна	(86554)58125	8-903-409-35-03	[email protected]	http://sh25.nevinsk.ru
14	Муниципальное  бюджетное общеобразовательное учреждение средняя общеобразовательная школа № 16	357106 г. Невинномысск, ул. Апанасенко, 82	Александрова Татьяна Георгиевна	(86554)75293	8-928-630-75-01	nevinka_school16@mail. ru	http://sh26.nevinsk.ru
15	Муниципальное  бюджетноеобщеобразовательное учреждение средняя общеобразовательная школа № 18 с углубленным изучением отдельных предметов	357100 г. Невинномысск, ул. Гагарина, 53 «б»	Макаренко Оксана Александровна	(86554)36759	8-928-325-49-18	[email protected]	http://sh28.nevinsk.ru
16	Муниципальное  бюджетное общеобразовательное учреждение средняя общеобразовательная школа №20	357115 г. Невинномысск, ул. Калинина, 159	Ткачева Елена Анатольевна	(86554)56998	8-938-654-21-16	[email protected]	http://sh30.nevinsk.ru
17	Муниципальное бюджетное общеобразовательное учреждение Лицей № 1 города Невинномысска	357108, город Невинномысск, улица Менделеева, 28, Б	Винтизенко Анна Михайловна	(86554)71126	8-962-410-96-97	[email protected]	http://mboy-liceum-1.org.ru
ДОШКОЛЬНЫЕ ОРГАНИЗАЦИИ
№п/п	Наименование образовательной организации (полное по уставу)	Полный адрес образовательной организации	Фамилия, имя, отчество руководителя	Контактные телефоны директора		E-mail	Сайт учреждения
				рабочий (с кодом)	сотовый
1	Муниципальное бюджетное дошкольное образовательное учреждение «Центр развития ребенка – детский сад № 1 «Малыш» города Невинномысска	357100, г. Невинномысск, ул. Апанасенко, 88 А	Гавриленко Марина Викторовна	(86554)75705	8-928-315-21-43	[email protected]	http://ds1.nevinsk.ru
2	Муниципальное бюджетное дошкольное образовательное учреждение «Детский сад общеразвивающего вида № 2 «Теремок» с приоритетным осуществлением физического направления развития воспитанников города Невинномысска	357115, г. Невинномысск,ул. Калинина, 184 А	Валиулина Кристина Александровна	(86554)31611	8-928-638-53-24	[email protected]	http://невсад2.рф
3	Муниципальное бюджетное дошкольное образовательное учреждение «Центр развития ребенка  — детский сад № 3  «Улыбка» города Невинномысска	357112, г.Невинномысск, ул. Водопроводная, 358 «а»	Ничволодова Лариса Ивановна	(86554) 6-98-87	8-928-315-77-47	[email protected]	http://ds3.nevinsk.ru
4	Муниципальное бюджетное дошкольное образовательное учреждение «Детский сад № 4 «Пчелка»	357111, г. Невинномысск,ул. Урожайная, 24	Крупина Марина Вячеславовна	(86554)62974	8-928-817-48-72	[email protected]	http://ds4.nevinsk.ru
5	Муниципальное бюджетное дошкольное образовательное учреждение «Детский сад № 9 «Одуванчик» города Невинномысска	357108, г. Невинномысск,ул. Гагарина, 12-а	Лысова Лидия Георгиевна	(86554)72815	8-962-004-01-43	[email protected]	http://ds9.nevinsk.ru
6	Муниципальное бюджетное дошкольное образовательное учреждение «Детский сад комбинированного вида № 10 «Золотой ключик» города Невинномысска	357108, г. Невинномысск,ул. Менделеева, 14 А	Голяндина Наталья Александровна	(86554) 74529	8-918-873-79-48	[email protected]	http://ds10.nevinsk.ru
7	Муниципальное бюджетное дошкольное образовательное учреждение «Детский сад № 12 «Аленький цветочек»	357112, г. Невинномысск,ул. Тургенева, 4	Копейко Алла Иосифовна	(86554)78784	8-928-633-10-71	[email protected]	http://ds12-nev.ru
8	Муниципальное бюджетное дошкольное образовательное учреждение «Детский сад общеразвивающего вида № 14 «Ромашка» с приоритетным осуществлением физического направления развития воспитанников» города Невинномысска	357101, г. Невинномысск,ул. Шевченко, 4	Воскобойникова Наталья Николаевна	(86554)64638	8-928-014-87-80	[email protected]	http://ds14.nevinsk.ru
9	Муниципальное бюджетное дошкольное образовательное учреждение «Детский сад общеразвивающего вида № 15 «Солнышко» с приоритетным осуществлением познавательно-речевого направления развития воспитанников» города Невинномысска	357101, г.Невинномысск,ул. Шевченко,4-а	Защепкина Елена Васильевна	(86554)64639	8-961-484-17-81	[email protected]	http://ds15.nevinsk.ru
10	Муниципальное бюджетное дошкольное образовательное учреждение «Детский сад общеразвивающего вида № 16 «Ручеек» с приоритетным осуществлением физического направления развития воспитанников» города Невинномысска	357101, г. Невинномысск, ул. Маяковского, 3-а	Бородина Валерия Викторовна	(86554)64641	8-928-324-72-52	[email protected]	http://ds16.nevinsk.ru
11	Муниципальное бюджетное дошкольное образовательное учреждение «Детский сад общеразвивающего вида № 18 «Красная Шапочка» с приоритетным осуществлением познавательно-речевого направления развития воспитанников» города Невинномысска	357108, г. Невинномысск,ул. Бульвар Мира, 13	Левченко Светлана Николаевна	(86554)45238	8-928-010-90-74	[email protected]	http://ds18.nevinsk.ru
12	Муниципальное бюджетное дошкольное образовательное учреждение «Детский сад общеразвивающего вида № 19 «Тополек» с приоритетным осуществлением художественно-эстетического направления развития воспитанников» города Невинномысска	357100, г. Невинномысск,ул. Гагарина, 8	Басакова Елена Анатольевна	(86554)45536	8-928-324-01-66	[email protected]	http://ds19.nevinsk.ru
13	Муниципальное бюджетное дошкольное образовательное учреждение «Центр развития ребенка – детский сад № 22 «Гамма» города Невинномысска	357100, г. Невинномысск, ул. Менделеева, 22-а	Гореславец Ирина Сергеевна	(86554)71710	8-928-814-59-60	[email protected]	http://gamma22.ru
14	Муниципальное бюджетное дошкольное образовательное учреждение «Детский сад общеразвивающего вида № 23 «Огонек» с приоритетным осуществлением физического направления развития воспитанников» города Невинномысска	357108, г. Невинномысск, ул. Менделеева , 3А	Мальцева Алена Михайловна	(86554)71835	8-928-316-3236	[email protected]	http://ds23.nevinsk.ru
15	Муниципальное бюджетное дошкольное образовательное учреждение «Детский сад общеразвивающего вида № 24 «Радуга» с приоритетным осуществлением художественно-эстетического направления развития воспитанников» города Невинномысска	357108, г. Невинномысск,ул. Северная, 17-а	Костина Светлана Вячеславовна	(86554)74799	8-918-868-31-68	[email protected]	http://ds24raduga.ru
16	Муниципальное бюджетное дошкольное образовательное учреждение «Детский сад общеразвивающего вида № 25 «Теремок» с приоритетным осуществлением физического направления развития воспитанников» города Невинномысска	357118, г. Невинномысск,ул. Северная, 11-а	Арзуманова Диана Юрьевна	(86554)71618	8-928-817-88-38	[email protected]	http://ds25.nevinsk.ru
17	Муниципальное бюджетное дошкольное образовательное учреждение «Детский сад общеразвивающего вида № 26 «Белочка» с приоритетным осуществлением художественно-эстетического направления развития воспитанников» города Невинномысска	357108, г. Невинномысск,ул. Бульвар Мира, 22 Б	Шатило Светлана Николаевна	(86554)72103	8-928-300-42-70	[email protected]	http://ds26.nevinsk.ru
18	Муниципальное бюджетное дошкольное образовательное учреждение «Детский сад общеразвивающего вида № 27 «Ласточка» с приоритетным осуществлением познавательно-речевого  направления развития воспитанников» города Невинномысска	357112, г.Невинномысск,ул. 30 лет Победы, 24-а	Савина Юлия Валерьевна	(86554)96629	8-918-867-62-61	[email protected]	http://ds27.nevinsk.ru
19	Муниципальное бюджетное дошкольное образовательное учреждение «Детский сад № 29 «Медвежонок»	357112, г. Невинномысск,ул. 30 лет Победы, 26	Шарлаева Валентина Владимировна	(86554)78210	8-962-404-99-55	[email protected]	http://medvezhonok29.ru
20	Муниципальное бюджетное дошкольное образовательное учреждение «Детский сад комбинированного вида № 30 «Солнышко» города Невинномысска	357108, г. Невинномысск,ул. Менделеева, 3 «б»	Голенко Оксана Владимировна	(86554)71308	8-928-375-77-95	[email protected]	http://ds30.nevinsk.ru
21	Муниципальное бюджетное дошкольное образовательное учреждение «Детский сад общеразвивающего вида № 40 «Светлячок» с приоритетным осуществлением социально-личностного направления развития воспитанников» города Невинномысска	357114, г. Невинномысск,ул. Бульвар Мира, 32 Б	Киреева Инна Николаевна	(86554)67288	8-928-008-04-23	[email protected]	http://ds40.nevinsk.ru
22	Муниципальное бюджетное дошкольное образовательное учреждение «Детский сад комбинированного вида № 41 «Скворушка» города Невинномысска	357100, г. Невинномысск,ул. Гагарина, 57-б	Игнатова Надежда Леонидовна	(86554)37839	8-928-817-44-16	[email protected]	http://ds41.nevinsk.ru
23	Муниципальное бюджетное дошкольное образовательное учреждение «Детский сад комбинированного вида № 42 «Материнская школа» города Невинномысска	357114, г. Невинномысск,ул. Партизанская, 13-а	Ярова Ирина Владимировна	(86554)67300	8-919-738-47-10	[email protected]	http://ds42.nevinsk.ru
24	Муниципальное бюджетное дошкольное образовательное учреждение «Детский сад общеразвивающего вида № 43 «Аленушка» с приоритетным осуществлением познавательно-речевого направления развития воспитанников»  города Невинномысска	357106, г. Невинномысск,ул. Приборостроительная, 4-а	Кузьменко Наталья Георгиевна	(86554) 59024	8-928-637-38-43	[email protected]	http://ds43.nevinsk.ru
25	Муниципальное бюджетное дошкольное образовательное учреждение «Центр развития ребенка – детский сад № 45 «Гармония» города Невинномысска	357100, г. Невинномысск,ул. Степная, 2 В	Алипенко Наталья Викторовна	(86554)55250	8-928-376-32-40	[email protected]	http://ds45.nevinsk.ru
26	Муниципальное бюджетное дошкольное образовательное учреждение «Детский сад комбинированного вида № 46» города Невинномысска	357118, г. Невинномысск,ул. Северная, 16-а	Зубенко Елена Матвеевна	(86554)58196	8-928-631-22-23	[email protected]	http://ds46.nevinsk.ru
27	Муниципальное бюджетное дошкольное образовательное учреждение «Центр развития ребенка – детский сад № 47 «Родничок» города Невинномысска	357100, г. Невинномысск,ул. Гагарина, 64 – А	Комарова Людмила Владимировна	(86554)34681	8-928-982-43-69	[email protected]	http://ds47.nevinsk.ru
28	Муниципальное бюджетное дошкольное образовательное учреждение «Детский сад присмотра и оздоровления № 48 «Незабудка» города Невинномысска	357100, г. Невинномысск,ул. Степная, 4 Б	Руденко Марина Викторовна	(86554)34085	8-988-756-05-25	[email protected]	http://ds48-nezabudka.ru
29	Муниципальное бюджетное дошкольное образовательное учреждение «Центр развития ребенка – детский сад № 49 «Аленький цветочек» города  Невинномысска	357100, г. Невинномысск,ул. Революционная, 10-а	Козырева Ирина Александровна	(86554)33448	8-928-225-63-55	[email protected]	http://ds49.nevinsk.ru
30	Муниципальное бюджетное дошкольное образовательное учреждение «Центр развития ребенка – детский сад № 50 «Светофорик» города  Невинномысска	357100, г. Невинномысск,ул. Гагарина, 53 а	Алексеенко Ирина Николаевна	(86554)36611	8-928-632-32-31	[email protected]	http://ds50.nevinsk.ru
31	Муниципальное бюджетное дошкольное образовательное учреждение «Детский сад общеразвивающего вида № 51 «Радость» с приоритетным осуществлением социально-личностного направления развития воспитанников»  города Невинномысска	357112, г. Невинномысск,ул. Баумана, 2а	Диденко Татьяна Леоновна	(86554)79725	8-918-741-22-42	[email protected]	https://51radost.ru
32	Муниципальное бюджетное дошкольное образовательное учреждение «Детский сад общеразвивающего вида № 154 «Почемучка» с приоритетным осуществлением физического направления развития воспитанников»  города Невинномысска	357115, г. Невинномысск,ул. Кооперативная, 172	Скрипникова Марина Григорьевна	(86554)69659	8-918-876-17-04	[email protected]	http://ds154.nevinsk.ru
УЧРЕЖДЕНИЯ ДОПОЛНИТЕЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ
№п/п	Наименование образовательной организации (полное по уставу)	Полный адрес образовательной организации	Фамилия, имя, отчество руководителя	Контактные телефоны директора		E-mail	Сайт учреждения
				рабочий (с кодом)	сотовый
2	Муниципальное бюджетное учреждение дополнительного образования «Дворец детского творчества» города Невинномысска	357100, г. Невинномысск, ул. Гагарина, 114	Пегова Александра Викторовна	(86554)9-54-82	8-918-862-31-51	[email protected]	http://cdt.nevinsk.ru
3	Муниципальное бюджетное учреждение дополнительного образования детско-юношеская спортивная школа «Шерстяник»	357101, г. Невинномысск, ул. Маяковского, 9	Вилков Евгений Евгеньевич	(86554)42-3-62	8-928-328-55-33	[email protected]	https://sherstyanik.stv.sportsng.ru/
4	Муниципальное бюджетное образовательное учреждение дополнительного образования детей «Детско-юношеская спортивная школа № 1	357108, г. Невинномысск, ул. Менделеева, 26 «а»	Букреев Глеб Вячеславович	(86554)7-19-30	8-928-955-09-55	[email protected]	http://dush2.nevinsk.ru
5	Муниципальное бюджетное образовательное учреждение дополнительного образования детей детско-юношеская спортивная школа «Рекорд»	357112, г. Невинномысск, пер. Клубный, 4 «а»	Казначеев Геннадий Иванович	(86554)7-81-94	8-928-264-32-70	[email protected]	http://olimpiec.nevinsk.ru
6	Муниципальное бюджетное образовательное учреждение дополнительного образования детский оздоровительно-образовательный (профильный) центр МБУ ДО ДООЦ «Гренада»	Кочубеевский район, х. Новозеленчукский	Кимберг Сергей Владимирович	—	8-928-631-38-31	[email protected]	http://лагерь-гренада.рф
7	Муниципальное бюджетное образовательное учреждение дополнительного образования «Центр детского научного и инженерно-технического творчества» города Невинномысска	357100, г. Невинномысск, ул. Белово, 4	Румянцев Аркадий Николаевич	(88654)7-04-56	8-963-383-9229	[email protected]	http://cdnitt.nevinsk.ru
ИНЫЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНЫЕ ОРГАНИЗАЦИИ
1	Государственное казенное дошкольное образовательное учреждение «Детский сад № 31 «Сказка»	357108, город Невинномысск, улица Гагарина, дом 23-А	Новикова Ирина Александровна	(86554) 7-05-31		[email protected]	http://ds31skazka.ru/
2	Государственное казенное дошкольное образовательное учреждение «Детский сад № 34 «Золотой петушок»	357108, город Невинномысск, улица Павлова, 14	Горшкова Надежда Ивановна	(86554) 7-02-96		[email protected]	http://ds34.nevinsk.ru/
3	Частное дошкольное образовательное учреждение «Центр развития ребенка – Православный детский сад «Вера, Надежда, Любовь»»	357100, город Невинномысск, улица Матросова, 167	Шлимакова Юлия Валерьевна	(86554) 6-45-08		[email protected]	http://pravoslavsad.ru/
4	Частное общеобразовательное учреждение «Православная классическая гимназия во имя святых равноапостольных Кирилла и Мефодия»	357117, город Невинномысск, улица Социалистическая, дом 180	Моздор Иван Алексеевич	(86554) 7-69-39		[email protected]	http://nev-kirill-mefody.ru/
5	Государственное бюджетное образовательное учреждение «Центр психолого-медико-социального сопровождения» города Невинномысска	357100, город Невинномысск, улица Менделеева, дом 31	Горяинова Наталья Георгиевна	(86554) 7-82-20	8-909-758-12-10	[email protected]	http://nevcdik.ru/
6	Автономная некоммерческая организация дополнительного образования «Детский технопарк «Кванториум» в городе Невинномысске»	357108, город Невинномысск, улица Белово, 4	Чилхачоян Татьяна Валерьевна		8-918-770-41-79	[email protected]

Свердловской областной онкологический диспансер ГАУЗ СООД

24/04/20 Дмитрий Валерьевич:

“Проходил курс радиотерапии с 30.03.2020 по 21.04.2020. Для меня это своего рода испытания в связи с моими хроническими заболеваниями, но, думаю, что всё будет хорошо. А сказать хотелось бы всем врачам и медсестрам, в частности: врач- радиотерапевт Павлова Жанна Владимировна и медсестра Шестакова Лариса Николаевна, спасибо! И пожелать вам терпения и душевного спокойствия”.

15/04/20 Ольга Воронова:

“Хочется выразить огромную благодарность от меня и моей семьи не только врачу от Бога  и прекрасному человеку с золотым сердцем, но и замечательному руководителю заведующему онкологическим отделением №7 врачу-онкологу высшей квалификационной категории Белых Дмитрию Валерьевичу. Спасибо Вам за Ваш профессионализм и доброе сердце. Спасибо за удивительную работу которую Вы проводите каждый день! За прекрасную команду, которая под Вашим руководством помогает таким как я не просто выжить, а сохранить здоровье и снова поверить в свои силы! Это огромное счастье, что такие компетентные, умелые и талантливые, неравнодушные люди работают именно там, где они больше всего нужны.
Крепкого здоровья Вам. Спасибо, что Вы есть! С глубоким уважением к Вам и всему Вашему чудесному коллективу Воронова Ольга и моя семья”.

13/04/20 Е.А.:

“Выражаю благодарность заведующему абдоминальным отделением — врачу онкологу Голоднову Вадиму Алексеевичу за успешно проведённую операцию 30 марта 2020 года. И возвращение к полноценной жизни. Спасибо от меня и всей моей семьи за профессионализм, поддержку чуткое и внимательное отношение.
Это огромное счастье, что такие компетентные, умелые и талантливые, неравнодушные люди работают именно там, где они больше всего нужны.

Отдельное спасибо медицинскому персоналу абдоминального отделения (онкологическое №3). Ваши терпение, отзывчивость, чуткость, понимание, забота, доброжелательное и внимательное отношение, лечат лучше медицинских процедур.
Благодарю Вас от всей души и желаю Вам дальнейших профессиональных успехов и достойного вознаграждения за Ваш труд!!!”

07/04/20 Артем:

“Добрый день! Хочу выразить благодарность Уксусникову Владимиру Алексеевичу. В наших больницах редко встречаются такие врачи, которые так увлечены своей работой и действительно заинтересованы в выздоровлении пациентов. Владимир Алексеевич один из этих не многих людей, и это не только моё мнение. Спасибо за лечение”.

24/03/20 Елена Ивановна:

“Выражаю огромную благодарность врачу поликлиники Басаргиной Ирине Викторовне и ее медсестре Екатерине Олеговне! Ходим к ней с папой (Михаил Иванович 83 года) всегда ведёт себя тактично! Папе всегда все объясняет понятно. Не все врачи находят общий язык с моим папой)))”.

24/03/20 Наталья Александровна:

“Иван Владимирович, спасибо Вашему коллективу за помощь нашей семье в трудной ситуации!

Моей маме, Буториной Вере Никифоровне, 91 год, диагноз был поставлен в сентябре 2019 года. Всё это время нас не оставляли наедине с нашей бедой: приезжали по первой просьбе, предоставили концентратор (благодаря которому дышать было легче), помогали нужным словом. Очень чуткое и уважительное отношение давало сил нашей бабушке. Спасибо вам огромное и дай Бог всего самого лучшего!

Приятно удивляет то, что у таких молодых врачей, такое большое сердце! Вы делаете доброе дело, которое невозможно переоценить. Еще раз спасибо вам каждому:

Вотиновой Елене Викторовне,

Суханову Сергею Александровичу,

Квашнину Роману Андреевичу,

Козлову Ярославу Олеговичу,

Наталь Викторовне!”

20/03/20 Мария Григорьевна:

“Выражаю большую благодарность Мишиной Анне Валерьевне – врачу-онкологу за добросовестность, четкость,  внимательность в работе, терпение и своевременную помощь. Желаю этой хрупкой и красивой женщине только счастья, здоровья и благополучия”.

04/03/20 Владимир:

“Хочу сказать огромное спасибо Максиму Владленовичу Герасимову, его золотым рукам, а так же гигантское спасибо анестезиологу-реаниматологу Язову Олегу Александровичу за его профессионализм. И конечно же спасибо Александру Сергеевичу Шершеверу за такое профессиональное отношение. Желаю вам всем долгих долгих лет жизни и огромного здоровья!!!

Отдельная благодарность всему НХО!!! Спасибо вам!!!”

02/03/20 Екатерина:

“От имени моей бабушки хотим поблагодарить всех сотрудников дневного стационара для проведения лучевой терапии на ул.Комсомольской, 11. Замечательный коллектив, все очень вежливые, внимательные, доброжелательное отношение ко всем пациентам, начиная от сотрудников охраны, медрегистратор Наталья Валерьевна, процедурная медсестра, Оксана Юрьевна, врачи Евгений Валерьевич и Наталья Николаевна. Всем спасибо!!!”

18/02/20 Ирина:

“Благодарю за прекрасно проведенную процедуру ФГС врача-эндоскописта Погодина Александра Сергеевича. Пройденные мной ранее аналогичные процедуры вызывали только страх перед очередной предстоящей “экзекуцией”. Сейчас есть уверенность, что данная процедура может быть безболезненной – все зависит от врача. Спасибо Вам, Александр Сергеевич”.

18/02/20 Елена Александровна:

“Выражаю искреннюю благодарность Жарикову Александру Александровичу за профессионализм, ответственность, доброту, отзывчивость. От всей души желаю лично ему, его близким здоровья, удачи, успехов в его очень сложной профессии”.

18/02/20 Елена Александровна:

“Выражаю искреннюю благодарность Асташкиной Ларисе Анатольевне за ее профессионализм, ответственность, доброту и отзывчивость. Желаю ей здоровья, удачи, успехов в ее нелегкой профессии”.

17/02/20 Василий Владимирович:

“Хочу сказать огромное спасибо Бажукову Павлу Григорьевичу, врачу-онкологу поликлиники (304 каб) за его профессионализм, неравнодушное отношение к  больным, его стремление, не затягивая времени, отправить на лечение. Хочется пожелать Павлу Григорьевичу здоровья, всех благ, и долгих лет жизни. Спасибо!

29/01/20 Ольга Юрьевна:

“Хочу поблагодарить лечащего врача Халамиренко Наталью Анатольевну и медицинскую сестру Валерию Владиславовну, бессменно принимающих меня с моими непростыми проблемами в кабинете 206, за их профессионализм, неравнодушие, терпение. Они всегда принимают с улыбкой, внимательно выслушивают и осматривают, дают направления. Сидя в очереди в кабинет слышу добрые отзывы об их работе от людей разных поколений. Не просто жить с таким диагнозом, но так приятно приходя в больницу получить заряд надежды и уверенности, и эти добрые Врач и Медсестра умеют поддержать и подарить частичку своей души. Спасибо от всей души!”

20/01/20 Елена Малиновская:

“Выражаю благодарность хирургу-онкологу Галкину Алексею Михайловичу и медицинской сестре Кубасовой Юлии онкологического отделения № 7, которые спасли мне жизнь в буквальном смысле этого слова!!! Когда у меня началось кровотечение Кубасова Юлия не растерялась и не суетилась. Все действия Юлии были грамотными, уверенными и четкими. Она понимала, что делает и какими должны быть дальнейшие действия, также Юля успевала делать несколько дел одновременно. При всей её сосредоточенности, она успевала ещё подбадривать и успокаивать меня! А когда узнала, что пришел мой лечащий врач Алексей Михайлович и он сам будет меня оперировать, то я уже точно знала, что в надежных руках и всё будет хорошо! Спасибо вам огромное от меня лично и от всей моей семьи за ваш высочайший профессионализм, за ваше доброе и отзывчивое сердце!

Также хотела выразить отдельную благодарность медицинским сестрам Кубасовой Юлии, Соколовой Наталье и Финк Светлане за проведение манипуляций. Они умудрялись не просто попасть в мои тончайшие вены кисти и запястья, но при этом абсолютно безболезненно и без синяков! Ни одна из вен не была ими испорчена, что редко бывает. За что им огромное спасибо!!

Успехов вам! Крепкого здоровья и счастья вам и всем вашим близким!!”

11/01/20 Алексей Арсеньевич:

“Огромная благодарность Александрову Максиму Альбертовичу – торакальному хирургу, за успешно проведенную операцию 19 декабря 2019 года. Максим Альбертович – замечательный Доктор и очень хороший Человек! Он настоящий профессионал, выполняет современные высокотехнологичные операции. Максим Альбертович, Большое Спасибо Вам за внимательное и неравнодушное отношение к пациентам”.

08/01/20 Лялина Н.Г.:

“Выражаем огромную благодарность сотрудникам 2-го онкологического отделения (Филиал №2 в г.Каменск-Уральский) за чуткое и внимательное отношение к пациентам. Особенно хотелось бы поблагодарить Савельеву Ольгу Сергеевну, Юлбаеву Гульназ Юриновну, Землянухину Валентину Викторовну, за прекрасное отношение к нашей маме . Вы мастера своего дела !!! Спасибо вам за вашу заботу , помощь и за все то добро что вы сделали для нас. С уважением, семья Лялиных”.

11/12/19 Наталья Львовна:

“Хочу выразить огромную благодарность нейрохирургу Горных Кириллу Александровичу! Вы тот самый врач, который поставил меня на ноги! Была проведена операция по удалению межпозвоночной грыжи. Я никогда не перестану Вас благодарить и всегда буду Вас помнить! Вы не только прекрасный нейрохирург, Вы доброжелательный и замечательный человек. Я хочу Вам сказать спасибо за Ваши “золотые” руки и Ваш профессионализм. Вы вернули меня к полноценной жизни!

Огромное спасибо Всем мед. сёстрам нейрохирургического отделения за доброе отношение к пациентам, терпение и отзывчивость!

С уважением, Стрельченко Н. Л.”

09/12/19 Дедюхин Николай Николаевич:

“Не первый год я наблюдаюсь у врача онколога Гильмутдинова Тимура Рифкатовича. Благодарю за чуткое отношение к больным. Поздравляю с Новым годом. Желаю счастья, здоровья, успехов всегда и во всём!

С Уважением, Дедюхин Николай Николаевич. г.Новоуральск”

05/12/19 Елена:

“Большое спасибо работникам дневного стационара и его врачам-онкологам за заботу, профессионализм и жизнь!”

03/12/19 Данилова Татьяна:

“Выражаю благодарность коллективу онкоцентра и лично доктору поликлиники, онкоурологу Гильмутдинову Тимуру Рифкатовичу и медицинской сестре кабинета Русских Ирине Валерьевне за достойное обследование и лечение моего папы”.

07/11/19 Фотиади Анна Терентьевна:

“От всего сердца благодарю замечательных хирургов-онкологов Голоднова Вадима Алексеевича и Лобанова Илью Николаевича за их высокий профессиализм, колоссальный труд и умение работать с разными возрастными категориями пациентов. Преклоняюсь перед вами. Здоровья вам и всегда удачных операций”.

06/11/19 Фотиади Анна Терентьевна:

“Поздравляем с Профессиональным Праздником – Днем Рентгенолога: врача Кутявина Дениса Владимировича и лаборанта Свиридову Татьяну Михайловну (Каменск-Уральский). И выражаем огромную благодарность. Спасибо за их профессионализм  и чуткое отношение к пациентам. Семья Мальцевых”.

18/10/19 Шубакова Елена:

“Огромная благодарность всему персоналу нейрохирургического отделения, Герасимову Максиму Владиленовичу и Шершевер Александру Сергеевичу. Уже почти год как я живу без невыносимых болей от невралгии тройничного нерва. После проведенной операции по декомпрессии корешка лицевого нерва даже уже стала забывать, что не могла обходится без лекарств и постоянного беспокойства, что опять начнутся стреляющие боли. Всем огромное СПАСИБО за вашу работу. Каждый день благодарю ВАС за то, что подарили мне здоровую жизнь, когда можно просто радоваться всему без оглядки, улыбаться, разговаривать, что было раньше недоступно. Здоровья всем и удачи в вашем нелегком труде.

16/10/19 Евгения:

“Хочется выразить огромную благодарность Сухневу Артуру Геннадьевичу за его “золотые руки” и высокий профессионализм! Прооперировал мою маму, очень пожилую женщину (79 лет), и теперь у нее все хорошо.

Благодарю Вас от всего сердца, Артур Геннадьевич, преклоняюсь перед Вашим трудом, и хотя я не очень дисциплинированная прихожанка, теперь всегда буду ставить за Вас свечу в церкви”.

11/10/19 Макарова Мария Григорьевна:

“Добрый день! Выражаю огромную благодарность, признательность и уважение:

1. Гетманчуку Александру Павловичу – заместителю главного врача по амбулаторно-поликлинической работе, за доброе, чуткое и внимательное отношение к пациентам; способность настроить на позитив и выздоровление; а также за его очаровательную улыбку!
2. Махотину Николаю Владимировичу – заведующему малоинвазивной хирургии, за проделанную работу, компетентность, профессионализм, внимательность и терпение.
3. Спасибо всем медсёстрам малоинвазивной хирургии, за четкость и слаженность в работе, понимание и доброе отношение.

Желаю им оставаться такими же человечными и терпеливыми, не смотря на  капризных трудных пациентов и невероятно тяжелую ответственную работу. И еще раз огромное спасибо за Ваш героический самоотверженный труд! Всем здоровья, удачи и счастья!“.

11/10/19 Реброва Галина Александровна (г.Пермь):

“Мы  хотим  сказать огромное  спасибо  всему  персоналу  больницы, глав. врачу, заведующей радиологического  отделения,  старшей  медсестре, всем  медсестрам,  сотрудникам  регистратуры.  Спасибо  что  Вы  есть,  что Вы работаете в  таком  заведении. Очень  важно, столкнувшись с таким  нехорошим  заболеванием, попасть  в  руки  чутких, внимательных, заботливых и любящих  свою работу  врачей. Спасибо  за Ваш профессионализм  и за  Ваши добрые  сердца.  Дай  Вам Бог здоровья на  долгие  годы и побольше  бы  таких людей в  наше здравоохранение. Благодаря  Вам  появляется  надежда  и желание  жить и бороться”.

11/09/19 Мурзина В.А:

“Хочу выразить огромную благодарность глав. врачу СООД Елишеву Владимиру Геннадьевичу, за оперативное и адекватное решение моего обращения. Очень радует, что Владимир Геннадьевич не равнодушен к чужим проблемам, именно это качество, должно быть у каждого врача. Хочется пожелать вам здоровья, профессиональной стабильности, и долгих лет жизни”.

26/08/19 Cлавинская Нина Лукьяновна:

“Знаете, есть хорошие врачи, а есть – особенные. Их посылает нам Судьба, вплетая в человека нити ответственности, честности, самоотдачи, доброты. У Особенных Врачей большая душа и золотые руки. Алексей Михайлович Галкин – Особенный Врач. Каждый день Алексей Михайлович, как врач – онколог, спасает множество жизней. И это касается не только пациентов, но и их родственников. Согласитесь, болезнь близкого человека – трагедия для всей семьи. А выздоровление – новый день рождения.
Я хочу сказать огромное спасибо Алексею Михайловичу за возможность обнимать детей, играть с внуками, чувствовать ветер, одним словом, Жить! Алексей Михайлович  –  профессионал и хороший человек. Борясь за жизнь в операционной, он и в палате словом помогает пациентам найти силы справляется со сложностями.

С уважением и благодарность, Славинская Нина Лукьяновна и ее семья”.

23/08/19 Юлия:

“Выражаю ОГРОМНУЮ БЛАГОДАРНОСТЬ нейрохирургу Дубских Алексею Олеговичу! Я счастлива, что судьба привела меня именно к Вам и Вы поставили меня на ноги (пришла с межпозвоночной грыжей, сильнейшими болями и тростью в руках, а на третий день после операции, ушла домой на своих ногах)! Вы – гениальны в своей работе!
Я помню как ездила, выбирала больницу и нейрохирурга, но всегда после общения оставались внутри какие-то сомнения…, но когда я впервые попала к Вам на прием, мне почему то, стало спокойно на душе и я с легкостью приняла решение оперироваться у Вас!
А маленький след в районе поясницы вызывает восторг – 2 см!!! Вы – ювелир!!!
Миллион раз спасибо Вам, Алексей Олегович! Я буду помнить о вас всегда)))

Отдельное ОГРОМНОЕ СПАСИБО всему мед. персоналу: за Вашу отзывчивость, участие, помощь во всем! Вы все – золотые! Здоровья Вам, терпения, Вы нужны нам!

15/08/19 Маргарита:

“Хочется выразить огромную благодарность всему коллективу 1-ого онкологического отделения. Я находилась на лечении в этом отделении в июле-августе 2019 года. Работа всех сотрудников (младшего мед.персонала, пищеблока, мед сестёр и врачей) направлена на то, чтобы пациенты чувствовали их помощь, внимание и заботу. Сердечно благодарю лечащего доктора  Сергея Владимировича Бойко – молодого, но очень квалифицированного и перспективного врача. А оптимизм и доброжелательность врача-анестезиолога О.Д. Ириха помогли мне хорошо настроиться на операцию. Я уверена, что такая работа отделения – это заслуга его заведующего Анатолия Васильевича Будлянского – великолепного диагноста, хирурга и организатора. Всем сотрудникам желаю дальнейших успехов в их непростом, но так необходимом пациентам труде”.

06/08/19 Ирина:

“Хочу сказать слова благодарности всему мед.персоналу 1 общего онкологического отделения, за ваш нелёгкий труд и трепетное отношение к пациентам. Отдельно хочу поблагодарить своего лечащего врача- онколога Бойко Владимира Сергеевича!!! Спасибо Вам за успешно проведенную операцию и за красивый результат! Желаю Вам профессионального роста, всего самого наилучшего!”

01/08/19 Любовь Сергеевна:

“Огромное спасибо за понимание и очень хорошее отношение к пациентам БАРСУКОВОЙ ЕЛЕНЕ СЕРГЕЕВНЕ, побольше бы таких людей”

22/07/19 Наталия:

“Компетентные, умелые и талантливые, неравнодушные люди работают именно там, где они больше всего нужны. Хочется выразить огромную благодарность всем сотрудникам паллиативного отделения в п.Верх-Нейвинский за профессионализм, поддержку, чуткое и внимательное отношение”

27/06/19 Ирина:

“Выражаю сердечную благодарность Дубских Алексею Олеговичу. В январе 2019 года успешно прооперировал мою маму, Валентину Семеновну В. Несмотря на сложность и длительность операции, в настоящий момент мама чувствует себя хорошо. Здоровья, терпения и всего хорошего доктору, всему медицинскому персоналу. Отдельная благодарность санитаркам отделения за отзывчивость, терпение и сердечность”

24/06/19 Милена:

“24 июня 2019 года была на консультации у Береснева Михаила Владимировича – молодой и грамотный врач. Очень понравился прием: быстро, все понятно, хорошее отношение к пациенту. И медсестра тоже доброжелательная. Спасибо!”

18/06/19 Наталия Б:

“Выражаем огромную благодарность медицинскому персоналу отделения паллиативной помощи Собачеву И.В., Квашнину Р.А., Вотиновой Е.В., Сивиковой А.В. Спасибо вам за вашу заботу, помощь и, в целом, за все, что вы для нас делаете”.

31/05/19 Ольга Валентиновна:

“Добрый день. Хочу сказать огромное СПАСИБО врачам отделения общей онкологии: Будлянскому А.В., Ожорбаеву М.Т., Бойко В.С. Это Врачи от Бога !!! Спасибо Вам за профессионализм, интеллигентность и такт. Большое спасибо медперсоналу отделения. Девочки, Ваши золотые ручки, забота о пациентах и уход – бесценны!!!”.

26/05/19 Александр:

“При прохождение реабилитации в СООД в урологическом отделении мне довелось лично познакомиться со всем медицинским персоналом, самым внимательным и добрым была Гринь Ирина Ивановна, которая  с легкостью ставила инъекции, в том числе и капельницы. С ней можно было поговорить и она с легкостью отвечала на все вопросы и давала рекомендации. Хотелось бы выразить огромную благодарность всему медицинскому персоналу урологического отделения, в том числе Ирине Ивановне”.

26/05/19 Cергей:

“Проходили практику в онкологическом диспансере (урологическое отделение). В ходе работы, мы познакомились с процедурной медсестрой  Ириной Ивановной Гринь. Ее профессиональные и педагогические качества заслуживают уважения и восхищения. Мы получили от нее огромный опыт качественной работы с пациентами и практические навыки в проведении внутримышечных, внутривенных капельных, струйных инъекций, а также сбора систем и определения группы крови. Я горд и счастлив, что имел честь у нее учиться! Спасибо Ирина Ивановна! Побольше бы таких мастеров своего дела”.

18/04/19 Без имени:

“Спасибо всему медицинскому персоналу урологического отделения и особенно хирургу Ильину К. и лечащему врачу Ковальчук Д. А. за профессионализм. Крепкого здоровья вам. Ваш пациент из 919 палаты”.

17/04/19 Без имени:

“Добрый день! Хочу написать отзыв о радиологах Басаргиной И. В. и Изюров Л. Н. Огромное спасибо этим врачам – уберегли от операции. Лечат не болезнь, а больного. Отношение неформальное и очень человеческое. Кто лечился на Комсомольской, 11 меня поймут”.

12/04/19 Без имени:

“Вчера готовилась к поездке в диспансер. На ресепшене дядечка вежливо объяснил, как пройти в регистратуру. В гардеробе другой дядечка улыбался и здоровался. Бахилы, кстати, бесплатно лежат в большом количестве. В регистратуре было два человека к терминалу. Не успела я достать талончик из него, как объявили, куда мне идти, а ведь даже оглядеться не успела, где то четвертое окно. Улыбчивая девушка всё быстро оформила, сказала, что ждать долго не придётся. Так и вышло, зашла на приём раньше своего времени. Доктор и медсестра очень внимательные и вежливые. Записали на дальнейшую консультацию. А судя по настроению больных, им тоже здесь нравится: на улице мужчина в халате, с трубками из-под него (видимо, недавно после операции) шутил с приятелем. *** Обещаю писать дальше”.

05/04/19 Анна Никобенко:

«У сестры-двойняшки в 38 лет обнаружили рак груди. Благо, попали на Соболева к профессионалу – онкологу Бойко Владимиру Сергеевичу! Было очень трудно принять диагноз, особенно, если учесть, что у сестры ребёнок-инвалид. Надо жить долго и в добром здравии. Владимир Сергеевич нашёл свой подход к нашей ситуации: настроил на лучшее, успокоил, а главное-очень качественно сделал операцию. Большая ему человеческая благодарность, и пожелания дальнейших успехов в его миссии!»

24/03/19 Марина Геннадьевна:

“Все это было давно. В июле 2014 г. поставили диагноз – рак яичников. Не лучшая стадия. Не ожидала, что смогу это пережить. Смогла. Помогли  Подольская Наталья Ивановна и лучший хирург – Гречишников Александр Петрович. Спасли. Каждое утро молюсь за них. Живу. Радуюсь. Здоровья Вам всем и терпения”.

Аттестация педагогов

Игры о главном. Итоги XXI Открытого российского фестиваля анимационного кино в Суздале

Главным мотивом XXI Открытого российского фестиваля анимационного кино, что традиционно проходит в Суздале весной, стала игра. Она была везде. Так, фойе Турцентра, где по своему обыкновению обосновались мастера анимации и их гости, украшала огромная шахматная доска с фигурами, у которых появились лица известных мультипликаторов: Норштейна, Назарова, Хржановского, Демина, Алдашина, Максимова. Эмблема фестиваля, меняющаяся каждый год, но сохраняющая главных героев – девочку и гуся, тоже напоминала об игре. В этот раз образ был двойной: девочка и заводной гусь, или гусь, играющий кукольной девочкой-марионеткой. Но основная интрига разворачивалась, конечно же, на экране, где за призы фестиваля боролись около сотни мультипликационных лент.

Мультфильмы на гастроляхИтак, фестиваль начался. И случилось это не на церемонии открытия: еще раньше на 150 площадках по всей стране – в Ялте и Оренбурге, Волгограде и Нижнем Новгороде, в Екатеринбурге, Курске, Пскове – стартовала большая программа «Открытая премьера», куда вошли и конкурсные, и внеконкурсные фильмы. Одними из первых городов, принимавших «Открытую премьеру», стали Александров и Лакинск Владимирской области. Туда приехали детские писатели Наталия Семенова, Алина Соколова, Елена Нестерина и Елена Усачева. Они рассказывали о том, как делаются мультфильмы, какие книжки ложатся в основу киноисторий, а еще играли с ребятами, много смеялись и дарили подарки. Главными подарками здесь были книги и мультфильмы, новенькие, никем еще не виденные.18 часов 45 минут 23 секундыВ прошлом году конкурс Суздальфеста прошел без полнометражных фильмов – единственной вышедшей ленте было просто не с кем соревноваться. Этот сезон подарил нам 8 новых работ, из которых 6 попали в конкурс, забрав львиную долю просмотрового времени. Победила «Снежная Королева. Перезаморозка», самый коммерчески успешный проект последних лет. Еще было много сериалов. В прошлом году запустилось 27 новых проектов – фантастическое количество! 16 попали в суздальский конкурс. Были среди них и откровенные подражания американским образцам, и добрая честная работа с прицелом на зрителя и прибыль. А вот авторской анимации, тех самых коротких мультфильмов, ради которых, собственно, фестиваль когда-то и создавался, этот год преподнес немного. Тем не менее, если верить подсчетам самых дотошных зрителей, непрерывный просмотр конкурсной программы занял 18 часов 45 минут 23 секунды! Из них на долю короткометражных работ выпало 11 часов. А ведь были еще жаркие обсуждения картин с их создателями, обширная деловая программа – мастер-классы, лекции и круглые столы, посвященные острым проблемам современной анимации и профессиональному образованию в отрасли, вечерние концерты. В жюри пригласили знаменитого барда Сергея Никитина. Конечно же, он приехал в Суздаль с гитарой. Среди гостей праздника был и Юлий Ким. Увидеть двух мэтров на одной сцене большая удача.Нелегкое чтивоАнимация в сознании людей прочно связана с детством. Но в этом и кроется то ли главная интрига, то ли главное условие игры, то ли главное еще что-нибудь, потому как на деле это кино изначально задумывается не только и не столько для детей. Анимация – это мироощущение взрослого создателя, художественно переосмысляющего действительность. Конкурс Суздальфеста и его победители раз за разом напоминают: нет, мультипликация – это не легкое чтиво, не развлечение в минуты детского досуга, но высокое искусство. Вспомнить хотя бы «Молоко» Игоря Коваля, «Мы не можем жить без космоса» Константина Бронзита, «Заснеженного всадника» Алексея Туркуса, «Подарок» Михаила Дворянкина. Все это серьезные авторские высказывания, где в центре стоит человек, его сложные эмоции и философские противоречия.Уже много лет суздальскую программу формируют с учетом возрастных ограничений. Фильмы с грифом «0+» и «6+» показывают утром и днем, «12+» и «18+» – вечером. Самые сильные мастера, как правило, сходятся в категории «для тех, кому за». В зрительный зал на эти сеансы трудно попасть: всем хочется посмотреть новые работы лидеров на большом экране.Именно «в вечер аншлагов» свою очередную историю о любви (на этот раз о любви к жизни) представил Иван Максимов. «Скамейка №0458» – это просто парк, просто скамейки, на которых кто хочет, тот и сидит, проводя свободное время на свое усмотрение. Игорь Мельников и Наталья Мирзоян в фильме «Люк» предупредили о том, сколь опасно может быть излишнее любопытство: обнаружив в квартире неизвестный люк, не спешите его открывать, а то мало ли что… Фильм получил диплом жюри в категории «Лучший короткометражный фильм» с формулировкой «за открытие соседних миров».Возможно, не стоит так уж вглядываться и вдумываться в фильм – победитель фестиваля – «До любви» Игоря Ковалева. Главное в этой картине – настроение, стиль, драматургия. Это история о жажде любви, о ее поиске, о том, что мир не всегда готов принять твое счастье. Интересно, что в тот момент, когда в Суздале вручали Гран-при и в зале гремели овации, на Интернациональном фестивале анимационного кино в Утрехте (Голландия) «До любви» также присудили главную награду.Больше всего призов собрала лента «Питон и Сторож» Антона Дьякова, рассказ о похождениях двух странных и непохожих друг на друга героев – сторожа зоопарка и питона. Сам режиссер рассказал, что на создание мультфильма его подтолкнула заметка в газете, где рассказывалось, что из зоопарка сбежал питон, предварительно загипнотизировав сторожа. Этот фильм получил Специальный приз жюри с формулировкой «за юмор и авантюризм», приз Гильдии киноведов и кинокритиков, стал лучшим фильмом в профессиональном рейтинге. Это значит, что Антон Дьяков на ближайший год заработал титул президента фестиваля. В очередной раз выходя на сцену, режиссер с улыбкой заметил, что чувствует себя грабителем, отобравшим у других все призы.Но это, конечно, не так, потому что были и другие награды. Картины Марины Карповой – «Медвежьи истории», «Шиш», «Коровка» – полны любви и внимания к миру детства. В этом году ее «Мама-цапля», лирическая сказка о беззаботной птице, в силу обстоятельств «усыновившей» сначала утенка, потом щенка и медвежонка, признана лучшим короткометражным фильмом. Лучшим фильмом для детей названа «Морошка» Полины Минченок – сказка о девочке, пожалевшей страшного волка. Интересно, что и «Морошка», и «Мама-цапля», и «Питон и Сторож», и многие другие фильмы, получившие призы жюри, сняты на «Союзмультфильме», что, без сомнения, говорит о долгожданном возрождении прославленной студии.Главная гордость фестиваля последних лет – студенческие работы и фильмы-дебюты. Именно они долгое время играли первую скрипку, иногда оказываясь сильнее и интереснее работ мастеров. Студенческих картин стало поменьше, да и на дебюты теперь смотрят прохладнее. А все потому, что ярких прорывов, которых все ждут с таким нетерпением, уже многие годы не случается. После удачных дебютов многие режиссеры уходят в коммерческую анимацию – снимают сериалы и полнометражные ленты, чем и объясняется успех этих категорий, а на авторские проекты не остается ни времени, ни сил, ни желания.Победителем в номинации «Лучший студенческий фильм» объявлен «Два друга» Натальи Чернышевой – история о том, как порой трагически непросто нам понять друг друга. В категории «Лучший дебютный фильм» награда у «Кораблик прошлых лет» Георгия Богуславского. Лидером среди сериалов признан проект «Ми-ми-мишки», серия «Лучшее место в мире».Чистое искусствоМартовское солнце гнало аниматоров на улицы древнего Суздаля, который в этот раз занесло снегом и прихватило морозцем. Юрий Норштейн по своей всем известной привычке отправлялся в марафонские забеги на лыжах, возвращаясь в зрительный зал разрумянившимся и счастливым. Андрей Хржановский предпочитал ледяной действительности теплый бассейн. Юлий Ким с Сергеем Никитиным совершали долгие пешие прогулки. А поэт и исполнитель Любаша, большая умница и трудоголик, исколесила всю Владимирскую область, встречаясь с детьми.Игра набирает силу, ведь за окном не простой год, а Год кино. Ее величество анимация продолжает миловать своим вниманием и казнить равнодушием. Сегодняшние победы говорят о том, что наша мультипликация (коммерческое кино мы в игру не берем) уже давно перешла в разряд чистого искусства, где нет таких категорий, как «нравится – не нравится», а есть интуитивное понимание, что такое хорошо и что такое плохо. Когда руководителя студии «Союзмультфильм» режиссера Михаила Алдашина попросили прокомментировать работу обладателя Гран-при, он развел руками и ответил кратко: «Это просто хорошее кино». Вот и весь разговор.Суздаль, Владимирская область

Корреляция in situ механочувствительных ответов адгезина UspA1 Moraxella catarrhalis с фибронектином и связыванием рецептора CEACAM1

Abstract

Поверхности бактериальных клеток обычно украшены слоем, образованным из нескольких копий белков адгезина, чьи связывающие взаимодействия инициируют процессы колонизации и инфекции. В этом исследовании мы исследуем физическую деформируемость белка адгезина UspA1 из Moraxella catarrhalis , возбудителя инфекций среднего уха у людей.UspA1 связывает ряд внеклеточных белков, включая фибронектин, и молекулу 1 адгезии клеток, связанную с эпителиально-клеточным рецептором карциноэмбрионального антигена (CEACAM1). Электронная микроскопия показывает, что нелигандированный UspA1 плотно упакован на поверхности Moraxella и простирается примерно на 800 Å от поверхности. Используя модифицированный атомно-силовой микроскоп, мы показали, что адгезионные свойства и толщина слоя UspA1 на поверхности клетки изменяются при добавлении фибронектина или CEACAM1.Затем этот анализ in situ соотносится с молекулярной структурой UspA1. Чтобы предоставить общую модель для UspA1, мы определили кристаллические структуры для двух N-концевых фрагментов, которые затем объединены с предыдущей структурой сайта связывания CEACAM1. Мы показали, что комплекс UspA1-фибронектин образуется между областью головки UspA1 и 13-м доменом фибронектина типа III и, используя рассеяние рентгеновских лучей, что комплекс включает угловую ассоциацию между этими двумя белками. В сочетании с предыдущим исследованием, которое показало, что комплекс CEACAM1-UspA1 отчетливо изгибается в растворе, мы коррелируем эти наблюдения на изолированных фрагментах UspA1 с его ответом in situ на поверхности клетки.Таким образом, это исследование представляет собой редкую прямую демонстрацию изменения конформации белка на поверхности клетки.

Ключевые слова: атомно-силовая микроскопия , бактериальные адгезины, малоугловое рассеяние рентгеновских лучей, рентгеновская кристаллография

Бактерии и все другие клетки в первую очередь воспринимают окружающую среду и реагируют на нее через белки, выходящие с их поверхности. Для патогенных бактерий такие взаимодействия образуют начальные события в инфекционных процессах. Несмотря на обширные исследования связывающей активности белков клеточной поверхности, очень мало известно о том, как эти молекулярные ассоциации могут трансформироваться в физические или конформационные изменения, в частности, in situ непосредственно на поверхности клетки.Считается, что физические изменения, сопровождающие связывание рецепторов, вносят важный вклад в биологическую функцию, но редко измеряются напрямую.

Moraxella catarrhalis ( Mx ) — специфическая для человека бактерия, связанная с респираторными заболеваниями и инфекциями среднего уха (средний отит) (1). Исследования начальных молекулярных этапов, с помощью которых Mx воспринимают окружающую среду и взаимодействуют с ней, что приводит к инфекции, сосредоточены на поверхностных бактериальных белках адгезина, которые обеспечивают очевидные точки посредничества как для колонизации, так и для инфекции, а также могут помочь в уклонении от иммунного распознавания (2). Mx представляют собой отличную систему для изучения свойств адгезинов in situ, поскольку электронные микрофотографии ( A ) показывают, что на их поверхности преобладают множественные копии одного и большого адгезина: повсеместно распространенного поверхностного белка A1 (UspA1) . Размер UspA1 варьируется между различными штаммами Mx , причем каждый мономер обычно содержит от 850 до 950 аминокислот. Эти мономеры образуют удлиненные тримерные структуры, простирающиеся на расстояние до 800 Å от поверхности клетки, где они образуют характерное и плотно упакованное молекулярное покрытие (3).Исследования гомологии последовательностей (3, 4) показывают, что UspA1 принадлежит к семейству бактериальных адгезинов, называемых либо олигомерными адгезинами со спиральной спиралью (Oca), либо тримерными адгезинами-аутотранспортерами (TAA). Эти адгезины, как полагают, имеют общую модульную структуру, состоящую из вариабельной амино-концевой головной группы β-пропеллера, протяженной области стебля coiled-coil и мембранного β-цилиндрического якорного домена на карбокси-конце (рассмотрено в ссылке 5). Этот последний домен образует мембранную пору, из которой, как полагают, оставшиеся домены-пассажиры перемещаются через внешнюю мембрану (см.6). Текущее понимание TAA основано на ряде молекулярных (кристаллографических) структур, которые были определены для изолированных сегментов некоторых из этих белков (см. Ссылки 5 и 6; также см. Ссылки 4, 7 и 8). Поскольку эти белки образуют большие и протяженные структуры, нет полных структур TAA, но исследования с помощью электронной микроскопии показывают, что эти адгезины часто образуют полностью протяженные структуры «леденцов» на поверхности клетки (3, 7) (). Сходная общая модульная структура белков TAA предполагает общего эволюционного предшественника, но также ясно, что имела место значительная диверсификация.

Поверхность клеток Moraxella, организация доменов и структура области головы UspA1. ( A ) Электронная микрофотография, показывающая протяженные молекулы UspA1 на поверхности Mx . (Масштаб: 50 нм.) ( B ) Схема, показывающая полноразмерный UspA1, состоящий из пяти областей, каждая из которых окрашена отдельно и помечена. Также показаны конструкции, для которых определены кристаллические структуры. ТМ, трансмембранный. ( C — E ) Изображения на ленте кристаллических структур ( C ) UspA1 ^(165–366) , ( D ) UspA1 ^(42–345) и ( E ) составная модель УспА1 ^(42–366) .В C и D каждая цепочка окрашена отдельно; E окрашен доменом согласно B .

Сообщалось о множественных партнерах связывания для большинства этих бактериальных адгезинов. В случае UspA1, связывание как с фибронектином (Fn), так и с ламинином, компонентами внеклеточного матрикса, было зарегистрировано для конструкций, которые включают головной домен вместе со значительными участками стебля (9, 10). Кроме того, сообщалось, что UspA1 с высокой аффинностью связывается с рецептором молекулы 1 адгезии клеток, связанной с карциноэмбриональным антигеном человека (CEACAM1) (CD66a), на эпителиальных клетках (11), который в норме формирует гомофильные межклеточные взаимодействия и для которых сайт связывания на UspA1 располагается внутри стебля (7) в области, пространственно удаленной от домена головы.Рабочая модель, возникающая из этого пространственного разделения диапазона сайтов связывания, заключается в том, что головной домен может опосредовать начальные, слабые встречи с внеклеточными компонентами, что приводит к выявлению более специфических сайтов связывания в другом месте, которые способствуют более плотному связыванию, необходимому для запуска инфекционных процессов (7). . В переполненных и плотно упакованных слоях UspA1 на поверхности клетки Mx () можно ожидать, что доступ ко всему диапазону сайтов связывания будет ограничен и, вероятно, потребует существенных физических искажений слоя адгезина и составляющих его молекул. .

В этом исследовании мы стремились изучить физические свойства слоя UspA1 на поверхности Mx , как они изменяются в ответ на связывание Fn или CEACAM1, а затем сопоставить эти эффекты in situ с молекулярными деталями модульной структуры. структура адгезина и его комплексы с этими белками.

Результаты и обсуждение

Механические свойства UspA1 на бактериальной поверхности.

Электронные микрофотографии ранее продемонстрировали, что UspA1 образует доминирующий компонент и плотно упакован на поверхности ячейки Mx (3, 7) (), где он образует слой толщиной примерно 80 нм, что является значительным по сравнению с средний размер бактерии ( ок. 800 нм). Поэтому мы предположили, что адгезионные и механические реакции на кантилевер при нажатии на одну бактерию будут отражать реакцию UspA1 на этот датчик силы. Эти отклики были протестированы в силовом микроскопе с вертикально установленным микрокантилевером Si ₃ N ₄ , микроскопом боковых молекулярных сил (LMFM), как описано в Материалы и методы . Измерения LMFM выполняются путем наблюдения за демпфированием тепловых колебаний вертикального кантилевера, когда он вступает в первоначальный контакт с поверхностью бактерии.Когда кантилевер входит в контакт с поверхностью бактерии, жесткость комбинированной системы увеличивается, и это используется для определения точки контакта без приложения к бактерии какой-либо значительной силы. Относительные изменения в этой начальной точке контакта, которые не должны зависеть от сжатия ячейки, используются для измерения эффективной толщины слоя адгезина.

У ряда тестированных бактериальных клеток сила адгезии наблюдалась при контакте с кантилевером LMFM (; также см. Фильмы S1 – S4).Обычно эта сила составляла менее 300 пН. Поскольку кантилеверы Si ₃ N ₄ являются гидрофильными и отрицательно заряжены в условиях буфера (12), адгезия, вероятно, происходит из-за эффекта заряда на поверхности Mx . По изменению тепловых флуктуаций кантилевера Si ₃ N ₄ при контакте с поверхностью Mx можно было рассчитать кажущуюся жесткость (13) адгезинового слоя, которая оказалась меньше 10 пН / нм.Кроме того, мы отметили, что кажущаяся жесткость меньше, когда кантилевер нажимает на слой адгезина, чем когда он растягивается. В отдельных случаях разрыв адгезии между кантилевером и бактерией был единичным событием с силой менее 100 пН, что позволяет предположить, что наблюдаемые события были вызваны единственной молекулой адгезина. Эти силы коррелируют с другими измерениями клеточного адгезина (14) и существенно меньше сил, необходимых для деформации клетки (15).

Анализ методом атомно-силовой микроскопии бактерий Mx . ( A ) Синусоидальное движение вбок передается столику для образца, чтобы осторожно подтолкнуть единственную адсорбированную бактерию (синяя сфера; бледно-голубой внешний слой представляет собой поверхностный адгезин) против кантилевера. Изменение положения предметного столика (Δ x ₁ ), необходимое для достижения контакта, измеряется при добавлении либо лиганда (CEACAM1 или Fn), либо буферного / контрольного белка. На графиках справа показаны репрезентативные данные, измеренные для изменения положения точки контакта до (красным) и после (зеленым) добавления ( B ) контроля, ( C ) CEACAM1 и ( D ). ) FNIII _12,13,14 .Красная и зеленая линии представляют собой среднее значение красной и зеленой точек соответственно.

Затем мы приступили к исследованию того, как эти свойства слоя UspA1 могут изменяться в ответ на присутствие известных связывающих белков UspA1, в частности CEACAM1 и фибронектина. Во-первых, в контрольных экспериментах было замечено, что добавление буфера или контрольного белка, рекомбинантной формы лактатдегидрогеназы Plasmodium falciparum , в экспериментальную камеру не вызывало каких-либо наблюдаемых изменений в положении точки контакта или в адгезии. сила.Однако в клетках MX2 штамма Mx добавление усеченного фрагмента Fn (FnIII _12–14 ), который связывается с областью головы UspA1 (см. Ниже), привело к увеличению расстояния, на которое бактерии должны были перемещаться. чтобы установить контакт с кантилевером на 7 ± 5 нм (стандартное отклонение среднего, SDM) и полную потерю силы сцепления в 90% контактов. Эти результаты показывают, что Fn-специфическое связывание с UspA1 может быть обнаружено LMFM. Простейшим объяснением изменения положения точки контакта относительно до добавления Fn является уменьшение общего размера (диаметра) бактерий MX2 при связывании Fn.Поскольку адгезивные свойства также изменились, мы пришли к выводу, что уменьшение, вероятно, коррелирует с конформационным изменением в слое UspA1, потенциально UspA1 от его расширенной формы до более компактной или «изогнутой» формы.

Затем эти анализы были расширены за счет добавления CEACAM1, который связывает UspA1 с высокой аффинностью. В течение 5 с после добавления CEACAM1 к клеткам штамма MX2, в которых UspA1 включает сайт связывания CEACAM1 в области стебля (7, 11), среднее уменьшение общего размера MX2 составляет 16 ± 5 (SDM) нм. бактерия не наблюдалась.Также было отмечено значительное снижение силы сцепления (70% контактов не давали сцепления). Однако, когда такое же количество CEACAM1 было добавлено к штамму O35E Mx , в котором UspA1 лишен сайта связывания CEACAM1 (7), не было зарегистрировано никакого изменения размера бактерии, и сила адгезии не пострадала (см. Фильм S4. ). Эти результаты действуют как дополнительный контроль и снова указывают на то, что LMFM обнаруживает CEACAM1-специфическое связывание с UspA1.

Наконец, мы измерили эффект от первого добавления FnIII _12–14 , а затем CEACAM1 (и наоборот) к MX2.В каждом случае начальное уменьшение размера наблюдалось при добавлении первого белка (как указано выше), за которым следовало дальнейшее сокращение клетки примерно на 10 нм при добавлении CEACAM1 после Fn (но не наоборот), давая максимальное сокращение, эквивалентное сокращению, полученному только с CEACAM1. Эти результаты показывают, что механизм наблюдаемого сокращения в каждом случае является независимым, что согласуется с тем, что Fn- и CEACAM1-связывающие области на UspA1 находятся в дистальных участках, но что искажение CEACAM1 является доминирующим.

В целом, данные LMFM показывают, что физические свойства слоя UspA1 на поверхности клетки Mx изменяются в ответ на связывание специфических белков. В частности, эти данные in situ согласуются с коррелированным изгибом, ранее отмеченным для изолированного фрагмента стебля UspA1 при связывании CEACAM1 (7). Данные также показывают, что внеклеточный белок фибронектин вызывает аналогичные изменения. Поскольку прямые структурные данные по UspA1 были ограничены сайтом CEACAM1 в области стебля, поэтому мы решили исследовать взаимодействие UspA1-фибронектин более подробно, сначала расширив структурный анализ UspA1 на указанный сайт связывания Fn, область головы.

Структура Главного региона УспА1.

Из-за высоких молекулярных масс и экстремального удлинения молекул как UspA1, так и Fn, детальный молекулярный анализ их взаимодействий сначала потребовал генерации усеченных форм каждого белка (Fig. S1). Были получены кристаллы ряда конструкций UspA1, но только два из них, UspA1 ^(42–345) и UspA1 ^(165–366) , оказались подходящими для определения структуры. Две полученные структуры, каждая длиной около 110 Å и диаметром до 40 Å ( C — E ), могут быть легко объединены для образования композитной структуры ( C ) для остатков UspA1 42–366, которые имеет длину около 160 Å.

SAXS-анализ комплекса UspA1 ^(42–366) -FnIII _12–15 . ( A ) Молекулярная оболочка (оранжевая), определенная ab initio моделированием шариков, с пятью независимыми реконструкциями твердого тела, показанными как ленты C ^α , причем каждая реконструкция отображается другим цветом. ( B ) Репрезентативная реконструкция твердого тела комплекса UspA1 – Fn с UspA1 ^(165–366) , окрашенным, как в C , и FnIII _12–15 в виде C ^α карикатура, окрашенная по областям и помечены.Остатки, связывающие гепарин, показаны сферами. ( C ) Общая модель для UspA1 ^(154–869) (окрашена как в C ) и деформации, связанные с последовательным связыванием Fn (окрашены как в B ) и CEACAM-1 (серым цветом). Остальная часть молекулы Fn обозначена грубым желтым эллипсоидом (не в масштабе). Показанные расстояния и погрешности взяты из анализа LMFM и представляют собой уменьшение общей длины UspA1 в результате связывания каждого лиганда.Угол изгиба при связывании CEACAM1, необходимый для достижения этого изменения, был рассчитан из линейных размеров объединенных кристаллических структур и оценивается примерно в 45 ± 15 °, что находится в пределах диапазона движения, наблюдаемого в предыдущем моделировании молекулярной динамики (7 ).

Головной домен UspA1 (остатки 42–275) в целом похож на другие структуры головных доменов TAA (рис. S2) и включает тримерный левосторонний параллельный β-валик, который образован 14 повторяющимися сегментами из 14–16 остатков. которые образуют лестницу из катушек β-прядей.Этот головной домен отличается от YadA (16) вариабельностью его повторов (9 × 15, затем 3 × 14, затем 2 × 16 остатков на повтор).

Горловая область UspA1 (остатки 276–334) обладает сложной компоновкой переплетений, которая отличается от наблюдаемой в YadA, но сходна с шейной областью BpaA (Fig. S2). Большие внешние петли образуют концентрацию положительного заряда в этой области, которая может указывать на функциональную активность связывания лиганда, и с которой сульфат-ионы случайно связываются в одной из кристаллических структур.Затем структура имеет начало ножки (остатки 334–372), которое простирается примерно на 60 Å (UspA1 ^(42–366) ) в виде канонической левосторонней спиральной спирали.

Комплекс фибронектин-UspA1.

Определив структуру области головки UspA1, мы затем исследовали, как в этой области размещается сайт связывания фибронектина. Следуя более ранним сообщениям о том, что внеклеточный Fn связывается с N-концевой частью UspA1 (9, 10), мы первоначально провели исследования связывания с укороченными формами обоих белков (рис.S1), чтобы лучше определить комплекс Fn – UspA1.

В исследованиях связывания использовали иммуноблоттинг (дот-блоттинг), ELISA и поверхностный плазмонный резонанс, и они полностью описаны в SI Text и на фиг. S3 и S4. Консенсус этих анализов заключался в том, что FnIII ₁₃ играет ключевую роль в связывании с областью UspA1, содержащейся в конструкции UspA1 ^(42–366) , и обеспечивает приблизительно 90% энергии связывания и FnIII ₁₂ ∼ 10%. (при 25 ° C) на основании констант диссоциации, приведенных в Таблице S1.

Эта центральная роль FnIII ₁₃ в связывании была затем подтверждена анализами конкуренции с гепарином, которые показали, что с увеличением концентрации гепарина связывание UspA1 с Fn снижается. Сайт связывания гепарина на Fn ранее был подробно охарактеризован и сосредоточен на Arg-6, Arg-7 и Arg-23 на FnIII ₁₃ (17, 18). Гепарин не связывается в значительной степени с самим UspA1, что согласуется с предыдущим наблюдением (19).

Данные связывания показали, что комплекс с умеренным сродством ( K _d ∼ 5 мкМ) образуется между UspA1 ^(42–366) и фрагментом FnIII _12–15 .В отсутствие кристаллов этого комплекса были собраны данные рассеяния рентгеновских лучей в растворе с низким разрешением (рис. S5), на основании которых была рассчитана молекулярная оболочка, к которой затем были подобраны кристаллические структуры обоих компонентов (). Отличительная форма головного домена UspA1 очевидна в очертаниях комплекса. Наблюдаемые данные плохо соответствовали альтернативным моделям, таким как димеры любого компонента (рис. S5). Из-за сходства доменов FnIII существует потенциальная неоднозначность полярности ориентации фрагмента FnIII _12–15 , но ориентация, показанная на рисунке, предпочтительна, поскольку она максимизирует контакты между FnIII ₁₃ и UspA1 в в соответствии с данными привязки.Контакты UspA1 находятся преимущественно в основании домена головки β-валика, места, где обнаруживаются удлиненные петли витка 1 β-валиков и петли из области шейки.

Примечательной особенностью этой модели комплекса с низким разрешением является отчетливая угловая связь (приблизительно 40 °) между длинными осями каждого компонента. Поскольку в интактном белке Fn имеется значительная масса белка по обе стороны от домена FnIII ₁₃ , трудно предположить, что этот угловой контакт с UspA1 может быть создан без искажения тесного набора протяженных структур адгезина.

Общая модель структуры, связывания и функций UspA1.

На бактериальной поверхности каждый мономер UspA1 содержит 821 аминокислоту, для которых теперь доступны кристаллические структуры для сегментов 42–366 (это исследование) и 527–665 (7). Важно отметить, что эти два сегмента покрывают два основных сайта связывания на UspA1. Хотя кристаллические структуры составляют лишь около 60% от общей структуры, остальные части структуры легко поддаются моделированию гомологии: большая часть оставшейся последовательности имеет сильную склонность к спиральной спирали (11), а трансмембранная область очень высока. консервативны и, как ожидается, сохранят структуру, аналогичную адгезину Hia (20).Таким образом, была построена общая композитная модель для UspA1 ( C ).

Эта общая модель для UspA1 имеет структурное сходство с ранее предложенной для YadA (21), хотя она варьируется в деталях, размерах и, что важно, может быть объединена с функциональными данными, которые указывают на чувствительность к связыванию лиганда. Исходя из модели, в своей полностью вытянутой конформации UspA1 простирается на 760 Å в длину от мембраны, что коррелирует с более ранними оценками, полученными с помощью электронной микроскопии (3).Эти же исследования с помощью электронной микроскопии и другие (7) показывают, что нелигандированный UspA1 часто является одновременно полностью вытянутым и плотно упакованным на бактериальной поверхности, так что области стебля и головы соседних молекул UspA1 лежат параллельно и в непосредственной близости. Такое расположение, по-видимому, (частично) препятствует доступу к сайту связывания Fn в основании головного домена и, более полно, к сайту связывания CEACAM1, который находится на расстоянии около 400 Å от кончика молекулы. Такая плотная упаковка может обеспечить некоторую физическую степень защиты этих консервативных областей от иммунного распознавания (2, 7).

Mx , нацеленный на эпителиальные клетки, будет встречаться со все более высокими локальными концентрациями фибронектина по мере приближения к эпителию, потому что Fn является основным компонентом внеклеточного матрикса, а также прикрепляется к апикальной поверхности эпителия (22, 23). Поскольку сайт связывания Fn находится в основании головного домена, доступ для большой молекулы, такой как Fn (димер 440 кДа), возможен только в случае нарушения плотной параллельной упаковки UspA1. Изгиб головки UspA1 ( C ), возможно, инициированный физическим контактом, делает этот сайт доступным для внеклеточных белков.Угловая ассоциация, наблюдаемая между UspA1 и Fn, может отражать степень изгиба, необходимого для полного раскрытия сайта связывания на поверхности. Небольшое уменьшение общего диаметра Mx при добавлении Fn, измеренное в этом исследовании, согласуется с искажением слоя UspA1, которое легче всего достигается за счет изгиба расширенной структуры UspA1. Анализы связывания показывают, что эти начальные взаимодействия имеют умеренное сродство ( примерно 5 мкМ), что отражает широкие возможности для поливалентных взаимодействий, обеспечиваемые большим количеством UspA1, экспонированного на поверхности бактериальных клеток.

Это нарушение также коррелирует с предыдущими экспериментальными данными, предполагающими, что связывание высокоаффинного человеческого рецептора CEACAM1, которое происходит в нижней половине области ножки и ближе к мембране, связано с характерным изгибом ножки UspA1 (7 ). В этом предыдущем исследовании было обнаружено, что изолированный комплекс стебля CEACAM1∶UspA1 проявляет выраженную кривизну в растворе, при этом моделирование молекулярной динамики указывает на то, что образование комплекса дестабилизирует протяженную стержнеобразную конформацию области стебля.Неясно, предшествует ли это искажение, сопровождает ли оно связывание CEACAM1 или является его результатом, хотя согласованные действия кажутся наиболее вероятными. Эксперименты, проведенные с LMFM в настоящем исследовании, косвенно свидетельствуют о том, что такое изгибание также происходит на поверхности клеток Mx . Эти исследования показывают корреляцию между добавлением CEACAM1 и уменьшением адгезии и уменьшением общего диаметра Mx , что означает, что расширенная структура UspA1 (которая определяет толщину слоя адгезина) физически искажается связыванием CEACAM1.Измеренное уменьшение общего диаметра на 16 ± 5 (SDM) нм () аналогично ожидаемому изменению, вызванному ( C ) изгибом UspA1 на величины, ранее предложенные (7) в исследованиях моделирования. Широкая корреляция между этими измерениями поддерживает простейшее объяснение того, что расширенный — и, следовательно, сжимаемый — слой молекул UspA1 становится более компактным при связывании CEACAM1, как можно было бы ожидать, если бы ножки были изогнуты. Эти изменения не наблюдались при добавлении контрольного белка, что означает, что они возникают в результате специфических взаимодействий UspA1 как с Fn, так и с CEACAM1.

Контактная деформация структуры UspA1, пожалуй, неудивительна, учитывая ее крайнее удлинение. Более удивительно то, что изгибание может быть вызвано или, по крайней мере, усилено за счет связывания определенных белков. Эта прямая корреляция подразумевает, что индуцированное искажение может возникать в областях связывания UspA1 или вблизи них ( C ). Предыдущие исследования взаимодействия UspA1: CEACAM1 показали, что присоединение CEACAM1 может нарушать симметрию удлиненного стержня coiled-coil, что приводит к дестабилизации расширенной структуры (7).Отдельная и более низкая степень изгиба, наблюдаемая при связывании Fn, может просто отражать крутильное искажение, являющееся результатом угловой ассоциации этих молекулярных компонентов. Интересно поразмышлять о биологическом значении этих конформационных изменений. Явным следствием искажения UspA1 является уплотнение белкового слоя на бактериальной поверхности, что позволяет ближе подходить к мембранам бактерий и клеток-хозяев, что является требованием для эффективного распространения инфекции. Кроме того, как отмечалось выше, этот примитивный переключатель физической деформации обеспечивает простой способ локализации сайтов связывания Fn и, в частности, CEACAM1, вдали от наиболее удаленных и, следовательно, доступных областей UspA1, что может обеспечить некоторую степень уклонения от иммунного ответа. признание.Хотя данные указывают на то, что искажения, возникающие в результате связывания Fn и CEACAM1, являются независимыми событиями, последовательная модель, в которой связывание Fn инициирует изгибание, чтобы облегчить связывание CEACAM1, является привлекательной.

Наконец, поскольку связывание с белками клеточной поверхности тесно связано с эффективной бактериальной инфекцией, предполагается прямая роль этих механоселективных деформаций в инфекционном процессе. Дальнейшие исследования этих динамических свойств адгезинов и родственных молекул in situ потребуют разработки различных технических подходов.

Материалы и методы

Производство, очистка и определение структуры белка.

Серия усеченных форм Mx UspA1 из штамма MX2 ATCC 25238 и рекомбинантных конструкций человеческого фибронектина (фиг. S1) была экспрессирована в Escherichia coli и очищена, как описано в SI Text . Кристаллы UspA1 ^(42–366) и UspA1 ^(42–345) были получены, как описано в SI Text . Дифракционные данные были собраны в алмазном источнике света (линии пучка IO2 и IO4), а структуры были определены с использованием комбинации молекулярного замещения и экспериментального фазирования из пропитки бромидом, как описано в SI Text .Сбор данных и окончательная статистика уточнения для обеих структур сведены в Таблицу S2. Гомологические модели были построены для областей UspA1, не охваченных доступными кристаллическими структурами, как описано в SI Text .

Исследования связывания.

Взаимодействия фрагментов UspA1 и Fn изучали стандартными методами с использованием плазмонного резонанса, точечного иммуноблоттинга и иммуноферментных анализов, как описано в SI Text .

Анализ малоуглового рентгеновского рассеяния (МУРР).

Данные SAXS комплекса FnIII _12–15 / UspA1 ^(42–366) были собраны в Diamond Light Source (луч I22) и проанализированы, как описано в SI Text .

Боковой молекулярно-силовой микроскоп.

Механические свойства UspA1 на внешней поверхности Mx были протестированы с использованием недавно разработанного LMFM, описанного в ссылке. 13. Жесткость пружины кантилеверов, использованных в этом исследовании, составляла 2,4 пН / нм ± 15%, а поперечное сечение составляло 1 мкм ± 10%.Для определения жесткости UspA1 использовались более мягкие кантилеверы с тем же поперечным сечением, но двойной длины, что дало жесткость 2,7 пН / нм ± 15%.

Одиночные бактерии были обнаружены оптически с использованием освещения с полным внутренним отражением. Синусоидальное движение вбок было придано столику для образца, чтобы осторожно протолкнуть одну бактерию к кантилеверу. Положение бактерии было отрегулировано так, чтобы обеспечить максимальное отклонение кантилевера от 50 до 300 нм.Положение стадии, на которой установился контакт между бактерией и кантилевером, отслеживали при добавлении контрольного белка / буфера, CEACAM1 и FnIII _12–14 . Изменения в этих положениях могут быть напрямую связаны с изменениями размера бактерии.

Координатное нанесение.

Координаты и структурные факторы кристаллических структур UspA1 ^(165–366) и UspA1 ^(42–345) были депонированы в Научно-исследовательский центр структурной биоинформатики банка данных белков (идентификационные коды 3NTN и 3PR7), а также координаты моделей комплекса фибронектин-UspA1 и всей структуры UspA1 доступны у авторов.

Расширение набора инструментов EasyClone-MarkerFree для генома Saccharomyces cerevisiae с новыми сайтами интеграции | FEMS дрожжевое исследование

РЕФЕРАТ

Биотехнологическое производство требует генетически стабильных рекомбинантных штаммов. Для обеспечения стабильности генома рекомбинантная ДНК обычно интегрируется в геном штамма-хозяина. Для геномной интеграции пекарских дрожжей Saccharomyces cerevisiae было разработано множество генетических инструментов.Ранее мы разработали векторный набор инструментов EasyClone-MarkerFree для стабильной интеграции в одиннадцать сайтов на хромосомах X, XI и XII S. cerevisiae . Безмаркерная интеграция была обеспечена системой CRISPR-Cas9. В этом исследовании мы расширили набор восемью дополнительными сайтами межгенной интеграции, расположенными на разных хромосомах. Эффективность интеграции в новые сайты составила более 80%. Уровень экспрессии белка зеленой флуоресценции ( gfp ) для всех восьми сайтов был аналогичным или выше сайта XI-2 из исходного набора инструментов EasyClone-MarkerFree.На рост клеток не повлияла интеграция ни в одно из восьми новых мест. Комплект расширения для восьми векторов доступен от AddGene.

ВВЕДЕНИЕ

Пекарские дрожжи Saccharomyces cerevisiae — это модельный эукариотический организм (Nielsen 2019; Matthews and Vosshall 2020). Это также промышленная рабочая лошадка для производства различных химикатов, начиная от малоценных соединений в больших объемах, таких как этанол (Caspeta и др. , 2014), до дорогостоящих продуктов в небольших объемах, таких как инсулин (Liu и др. .2012). Развитие промышленных штаммов обычно требует нескольких итерационных раундов редактирования генома и метаболической перестройки клетки-хозяина (Nielsen and Keasling, 2016). Следовательно, очень важно иметь генетические инструменты, позволяющие делать делеции, мутации и интеграции. Критическими требованиями к инструментарию интеграции являются: (i) стабильная хромосомная интеграция конструкций ДНК, (ii) высокий уровень экспрессии гетерологичных генов и (iii) отсутствие отрицательного воздействия на приспособленность и рост клеток (Gu et al .2015).

Для удовлетворения этих требований наша группа ранее разработала векторный набор инструментов EasyClone MarkerFree (Jessop-Fabre et al , 2016) для хромосомной интеграции нескольких генов в лабораторные и промышленные штаммы S. cerevisiae (Jensen et al. .2014; Stovicek et al .2015) с использованием стандартизованных плазмид для клонирования. Этот метод обеспечивает стабильную интеграцию и высокую экспрессию фрагментов в 11 отдельных сайтах, расположенных в межгенных областях в хромосомах X, XI и XII.Когда одна и та же кассета экспрессии гена была интегрирована в разные сайты, уровни экспрессии были сходными. Более того, сайты разделены важными генами, что предотвращает потерю интегрированных фрагментов в результате рекомбинации и обеспечивает стабильность штамма (Mikkelsen et al .2012). Маркеры отбора присутствуют только на двух эписомальных плазмидах, одна для экспрессии Cas9, а другая для экспрессии хелперной гРНК. Поскольку в геном не интегрированы маркеры селекции, можно последовательно редактировать несколько геномов без удаления маркеров селекции из генома.Для промышленного производства также важно, чтобы производственный штамм не содержал маркеров устойчивости к антибиотикам (Ramakrishnan et al .2020).

В этом исследовании мы стремились расширить этот инструментарий за счет дополнительных проверенных сайтов интеграции, расположенных на разных хромосомах. Экспансия состоит из восьми векторов гРНК, нацеленных на определенные межгенные сайты, и восьми соответствующих интегративных векторов, которые могут легко интегрироваться в эти сайты путем рекомбинации гомологов.Набор доступен в AddGene (депозит 78698).

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

гРНК, нацеленные на один или несколько локусов интеграции, были сконструированы, как описано ранее (Jessop-Fabre et al , 2016). Координаты хромосом и нуклеотидные последовательности направляющих РНК перечислены в таблице S1 (вспомогательная информация), а несколько векторов гРНК — в таблице S2 (вспомогательная информация). Для конструирования плазмид скелета прибл. Области, расположенные выше и ниже целевого сайта интеграции (исключая последовательность PAM) длиной 400-600 п.н., амплифицировали с помощью ПЦР (таблицы S5 и S6, вспомогательная информация).Фрагменты UP и DOWN затем клонировали по USER с терминаторами T adh2 -T cyc1 (BB4368) и векторным каркасом для размножения в E. coli (BB4367). Векторы, перечисленные в таблице S3 (вспомогательная информация), были проверены секвенированием по Сэнгеру (Eurofins, Германия). Для получения интегративных векторов gfp оптимизированный по кодонам белок gfp из Aequorea victoria (GenBank: AMY56666.1) был клонирован в плазмиды остова в соответствии с рабочим процессом метода EasyClone-MarkerFree (Jessop-0005 et al. .2016) к векторам, перечисленным в таблице S4 (вспомогательная информация).

Saccharomyces cerevisiae штамм CEN.PK113-7D, полученный от Peter Kötter (Entian and Kötter 2007), использовали в качестве основного штамма для проектирования и конструирования инструментария. Для экспрессии белка Cas9 вектор pCfB2312, содержащий репликон CEN / ARS (P tef1 -Cas9-T cyc1 _kanMX), Addgene # 78231, трансформировали в штамм CEN.PK113-7D и отбирали на средах, содержащих 200 мг / кг. L G418. Полученный штамм (ST7574) был использован в качестве родительского для всех следующих сконструированных штаммов.Вся трансформация дрожжей была выполнена методом с ацетатом лития с использованием 1-2 мкг интегративной плазмиды, расщепленной NotI и очищенной в геле, вместе с 500 нг вектора гРНК с использованием ранее описанного протокола (Jessop-Fabre et al . 2016 ). Для проверки правильности интеграции векторов в целевой сайт применяли ПЦР колоний с использованием праймеров, перечисленных в таблице S7 (вспомогательная информация), с ДНК-полимеразой RedTaq® (VWR, Бельгия). Чтобы оценить рост клеток штаммов с интегрированной кассетой gfp в сайты Expanded-Easyclone, 8-10 одиночных колоний культивировали в 500 мкл минеральной среды (Babaei et al .2020) с добавлением 20 г / л глюкозы в 96-луночном планшете. На следующий день клетки разводили 1: 100 в 96-половинном планшете с глубокими лунками, содержащем 300 мкл минеральной среды, и культивировали при встряхивании при 250 об / мин и 30 ° C в Growth Profiler 960 (EnzyScreen, Нидерланды). Культивирование продолжали в течение 40 часов для измерения профиля роста сконструированных штаммов. Для изучения стабильности сконструированных клеток культуру пассировали каждые 24 часа в свежую среду с разведением 1:50. Значения флуоресценции gfp и OD ₆₀₀ измеряли с помощью микропланшетного ридера BioTek Synergy MX при возбуждении при 485 нм и испускании при 530 нм для флуоресценции.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

При выборе новых сайтов интеграции в геноме S. cerevisiae учитывались межгенные (некодирующие) области, отвечающие следующим критериям: (i) длиннее 1500 нуклеотидов в длину, (ii) без автономной репликонной последовательности (ARS). ) и Ty-элементы и (iii) расположены далеко от сантомера и теломер (Mikkelsen et al .2012). Были отобраны восемь потенциальных сайтов интеграции, отвечающих этим критериям, и названы по номеру хромосомы (таблица S1, вспомогательная информация), как II-1, IV-1 и т. Д.Затем были сконструированы последовательности пРНК для нацеливания на эти сайты интеграции в штамме S. cerevisiae CEN.PK113-7D. Этот набор интегративных векторов экспрессии позволяет безмаркерную интеграцию одной или двух кассет экспрессии генов в каждый стандартизованный вектор клонирования (рис. 1). Рабочий процесс в расширенном наборе инструментов разработан так, чтобы быть похожим и совместимым с исходным набором инструментов EasyClone-MarkerFree, описанным Джессопом-Фабром и др. (Jessop-Fabre и др. , 2016). Совместная трансформация плазмид gRNA вместе с NotI-линеаризованными интегративными векторами в дрожжевую клетку, экспрессирующую белок Cas9, приводит к интеграции кассеты в конкретный хромосомный участок.Для скрининга положительных трансформантов можно использовать быструю и надежную ПЦР дрожжевых колоний с использованием праймеров, перечисленных в таблице S7 (вспомогательная информация). Затем дрожжевые клетки с правильной интеграцией могут быть излечены от вектора пРНК, помещая клетки в неселективную среду, не содержащую нурсеотрицина. Если при этом будет сохранен отбор на Cas9-плазмиду с маркером устойчивости к G418, то полученная клетка будет готова к следующему раунду интеграции. В конце штамм высевают на неселективную среду для удаления как гРНК, так и вектора Cas9.

Рисунок 1.

Расширенный набор инструментов EasyClone-MarkerFree.

Рисунок 1.

Расширенный набор инструментов EasyClone-MarkerFree.

Проверка эффективности интеграции и уровня экспрессии генов для новых сайтов была выполнена путем интеграции gfp в каждый сайт. Для этого мы клонировали кассету экспрессии gfp с двумя разными наборами промоторов-терминаторов; P tef1 — gfp -T adh2 и P pgk1 — gfp -T cyc1 , для получения интегративных плазмид (pCfB9365-pCfB9373 и pCfB105, соответственно; информация о поддержке pCfB105) .В то же время мы также сконструировали штаммы с двойной и тройной вставкой интеграционных кассет gfp в разные сайты в одноэтапной трансформации. Чтобы сделать это позже, мы сконструировали несколько векторов gRNA, используя тот же метод, что и раньше (Jessop-Fabre et al . 2016) (Таблица S2, вспомогательная информация). Затем плазмиды интегрировали в штамм CEN.PK113-7D, экспрессирующий Cas9 (ST7574).

Для всех трансформаций мы проверяли, были ли плазмиды интегрированы в правильный сайт, путем случайного выбора десяти колоний и проведения ПЦР колоний.Эффективность трансформации для всех исследованных сайтов с однократной и многократной интеграцией кассеты P tef1 — gfp -T adh2 составляла не менее 8 из 10 колоний или выше, как показано на фиг. 2A. Эти числа сопоставимы с исходными векторами EasyClone-MarkerFree (Jessop-Fabre и др. , 2016). Чтобы проверить эффективность выбранных последовательностей гРНК, мы также включили трансформации отрицательного контроля, проведенные только с 500 нг вектора гРНК и без ДНК для репарации.Для всех сайтов интеграции было получено очень мало колоний для отрицательных контролей.

Рисунок 2.

Характеристика интегративных векторов, расширенных EasyClone. A ) Эффективность трансформации показана как количество клонов с правильно интегрированной ДНК из 10 случайно выбранных клонов. B ) Уровень экспрессии Ptef1- gfp- T adh2 , интегрированный в новые сайты для исходной флуоресцентной популяции и этих клеток после культивирования в течение ок.60 поколений. Экспрессия с сайта EasyClone XI-2 показана для сравнения. Приведенные значения флуоресценции являются средними для 8–10 повторов, при этом столбцы ошибок показывают стандартное отклонение между повторами. Статистический анализ был проведен для значений экспрессии gfp каждого штамма для исходного и 60-го поколений с использованием t-критерия Стьюдента (односторонняя, двухвыборочная неравная дисперсия; * p <0,05, ** p <0,01, * ** p <0,001).

Рисунок 2.

Характеристика интегративных векторов, расширенных EasyClone. A ) Эффективность трансформации показана как количество клонов с правильно интегрированной ДНК из 10 случайно выбранных клонов. B ) Уровень экспрессии Ptef1- gfp- T adh2 , интегрированный в новые сайты для исходной флуоресцентной популяции и этих клеток после культивирования в течение ок. 60 поколений. Экспрессия с сайта EasyClone XI-2 показана для сравнения. Приведенные значения флуоресценции являются средними для 8–10 повторов, при этом столбцы ошибок показывают стандартное отклонение между повторами.Статистический анализ был проведен для значений экспрессии gfp каждого штамма для исходного и 60-го поколений с использованием t-критерия Стьюдента (односторонняя, двухвыборочная неравная дисперсия; * p <0,05, ** p <0,01, * ** p <0,001).

Затем мы культивировали по крайней мере восемь клонов с правильно интегрированной кассетой P tef1 — gfp -T adh2 для каждого одиночного и множественного вектора и измеряли флуоресценцию. Сайты интеграции, выбранные для расширенного набора инструментов, расположены в разных хромосомах, что отличается от исходного набора инструментов EasyClone с сайтами, расположенными на тех же хромосомах, но разделенными важными генетическими элементами.Поэтому, чтобы проверить, стабильны ли новые сайты, мы измерили уровень экспрессии gfp для сконструированных клеток из планшета для трансформации (называемого «исходной популяцией») и сравнили его с уровнем флуоресценции клеток после нескольких пассажей (чтобы достичь 60-го уровня. поколение). Уровни экспрессии gfp , как показано на фиг.2B, для всех исследованных сайтов интеграции были сопоставимы или выше, чем у контрольного сайта EasyClone XI-2, с аддитивным эффектом двойной и тройной интеграции кассеты gfp во флуоресценции клеток (фиг.2Б). Более того, когда мы сравнили уровень экспрессии gfp после нескольких пассажей флуоресцентных клеток с исходной популяцией, мы наблюдали небольшое снижение в четырех сайтах; 14% на участке II-1 ( p <0,01), 15% на участке IX-1 ( p <0,001), 10% на участке XV-1 ( p <0,01) и 9% на участке XVI-1 ( p <0,05). Для клеток с множественными интегрированными gfp в любом из этих сайтов аналогичная тенденция снижения флуоресценции наблюдалась после 60 поколений.Для других сайтов, включая Easyclone XI-2, снижение экспрессии gfp было незначительным ( p > 0,05). Хотя снижение экспрессии gfp в сайтах II-1, IX-1, XV-1 и XVI-1 не было значительным, может быть полезно учитывать это наблюдение при конструировании штаммов для процессов с длительным культивированием.

Чтобы исследовать производительность новых сайтов интеграции с использованием другой комбинации регуляторных элементов, мы сконструировали клетки с интеграционной кассетой gfp с конститутивным промотором P pgk1 и терминатором T cyc1 (P pgk1 — ). gfp -T cyc1 ).Аналогично предыдущим результатам (рис. 2B, для P tef1 — gfp -T adh2 ), уровень экспрессии gfp для P pgk1 — gfp -T cyc1 интеграция со всеми сайты были подобны или выше, чем у EasyClone XI-2 (фиг. 3A). При сравнении уровней экспрессии gfp между сайтами для двух различных промоторных конструкций (рис. S1, подтверждающая информация), сайты II-1, IV-1, VII-1 и VIII-1 давали стабильно более высокий уровень экспрессии, чем Сайт EasyClone XI-2, тогда как сайты XV-1 и XVI-1 приводили к тому же уровню экспрессии, что и сайт EasyClone XI-2.Однако экспрессия gfp в сайтах IX-1 и XIII-1 зависела от промотора. Поскольку уровень экспрессии белка зависит от многих факторов, помимо регуляторных элементов и сайта интеграции, необходимо эмпирически оптимизировать экспрессию. Затем, чтобы убедиться, что интеграция элементов чужеродной ДНК в исследуемые участки генома не влияет на рост клеток, мы также измерили последний и сравнили его с эталонным штаммом без каких-либо интеграций (рис. 3B).За исключением штамма с gfp , интегрированного в сайт VII-1, который имел лаг-фазу на 2 часа дольше, все другие штаммы имели характеристики роста, аналогичные эталонному штамму (ST7574). С точки зрения максимальной удельной скорости роста (µ _max ), показанной на рис. 3C, это значение для всех штаммов было аналогично контрольному штамму ( p > 0,05), за исключением штамма сайта VII-1 ( p <0,01). Поскольку трансформанты, используемые для анализа роста, не были излечены от вектора gRNA (несущего маркер устойчивости к антибиотикам NatMX), наблюдаемый более низкий µ _max при росте для сайта VII-1 может быть получен после нескольких культивирований в неселективной среде.

Рисунок 3.

A ) Уровень экспрессии P pgk1- gfp- T cyc1 , интегрированный в новые сайты для клеток после культивирования в течение ок. 60 поколений. Экспрессия с сайта EasyClone XI-2 показана для сравнения. B ) Профили роста штаммов со встроенной кассетой gfp по сравнению с нетрансформированным штаммом ST7574 в качестве эталона (ссылка). C ) Максимальные удельные скорости роста (µ _max , h ^-1 ) для профилей роста штаммов на панели B.Статистический анализ был выполнен для значений µ _max для каждого штамма и эталона с использованием t-критерия Стьюдента (односторонняя неравномерная дисперсия для двух выборок).

Рисунок 3.

A ) Уровень экспрессии P pgk1- gfp- T cyc1 , интегрированный в новые сайты для клеток после культивирования в течение ок. 60 поколений. Экспрессия с сайта EasyClone XI-2 показана для сравнения. B ) Профили роста штаммов со встроенной кассетой gfp по сравнению с нетрансформированным штаммом ST7574 в качестве эталона (ссылка). C ) Максимальные удельные скорости роста (µ _max , h ^-1 ) для профилей роста штаммов в панели B. Статистический анализ был выполнен для значений µ _max для каждого штамма и эталона с использованием t-критерия Стьюдента. (односторонние, двухвыборочные неравные дисперсии).

В заключение, векторы расширения предлагают такую ​​же эффективность интеграции, уровни экспрессии и не влияют на рост, как исходные векторы из набора инструментов EasyClone-MarkerFree. Мы надеемся, что они станут полезным дополнением к инструментам редактирования генома, доступным для разработки S.cerevisiae .

ВКЛАД АВТОРОВ

IB и EM разработали исследование. AK и DA разработали элементы гРНК и провели предварительные испытания. МБ разработал набор плазмид и штаммов и выполнил эксперименты с профилем роста. LS сконструировал векторы и штаммы и провел анализ экспрессии gfp . МБ проанализировал данные и написал рукопись. Все авторы внесли свой вклад в написание и редактирование рукописи. IB и EM обеспечили финансирование и контролировали проект.

БЛАГОДАРНОСТИ

Этот проект получил финансирование от программы исследований и инноваций Европейского Союза Horizon 2020 в рамках грантового соглашения № 814408 (SHIKIFACTORY100). IB также благодарит за финансовую поддержку Фонда Ново Нордиск (Соглашение о гранте № NNF10CC1016517).

Конфликт интересов

Не объявлено.

ССЫЛКИ

Babaei

M

Borja Zamfir

GM

Chen

X

Метаболическая инженерия Saccharomyces cerevisiae для производства розмариновой кислоты

ACS Synthetic Biology

2020

9

1978

88

Caspeta

L

Chen

Y

Ghiaci

P

Биотопливо. Измененный состав стеролов делает дрожжи термотолерантными

Наука

2014

346

75

8

Entian

K-D

Kötter

P

25 коллекций дрожжевых генетических штаммов и плазмид

Стэнсфилд

I

Старк

MJ

Методы Микробиол

2007

36

629

66

Gu

P

Yang

F

Su

T

Быстрая и надежная стратегия хромосомной интеграции гена (ов) с множеством копий

Научный сотрудник

2015

5

9684

Jensen

NB

Strucko

T

Kildegaard

KR

EasyClone: ​​метод итеративной хромосомной интеграции нескольких генов Saccharomyces cerevisiae

FEMS дрожжи Res

2014

14

238

48

Jessop-Fabre

MM

Jakočiūnas

T

Stovicek

V

EasyClone-MarkerFree: векторный набор инструментов для безмаркерной интеграции генов в Saccharomyces cerevisiae через CRISPR-Cas9

Биотехнология J

2016

11

1110

7

Liu

Z

Tyo

KEJ

Martínez

JL

Различные системы экспрессии для продукции рекомбинантных белков в Saccharomyces cerevisiae

Биотехнология Биоенг

2012

109

1259

68

Мэтьюз

BJ

Vosshall

LB

Как превратить организм в модельный за 10 «простых» шагов

Дж Эксп Биол

2020

223

jeb218198

Mikkelsen

MD

Buron

LD

Salomonsen

B

Микробиологическое производство индолилглюкозинолата посредством разработки мультигенного пути на универсальной платформе экспрессии дрожжей

Metab Eng

2012

14

104

11

Nielsen

J

Keasling

JD

Инженерия клеточного метаболизма

Ячейка

2016

164

1185

97

Нильсен

Дж

Биология дрожжевых систем: модельный организм и фабрика клеток

Биотехнология J

2019

14

1800421

Рамакришнан

K

Праттипати

M

Samuel

P

Транскрипционный контроль экспрессии гена в Pichia pastoris путем манипулирования терминаторами

Приложение Microbiol Biotechnol

2020

104

7841

51

Stovicek

V

Borja

GM

Forster

J

EasyClone 2.0: расширенный набор интегративных векторов для стабильной экспрессии генов в промышленных штаммах Saccharomyces cerevisiae

Дж Ind Microbiol Biotechnol

2015

42

1519

31

© Автор (ы) 2021. Опубликовано Oxford University Press от имени FEMS.

Джоакино Россини, Джакомо Мейербер, Джордж Фридрих Гендель, Генри Перселл, Камиль Сен-Санс, Гектор Берлиоз, Амилькаре Понкьелли, Петр Ильич Чайковский, Карло Рицци, Ольга Бородина — Ольга Бородина — Арии

В сегодняшнем переполненном поле великолепных лирических меццо-сопрано все еще трудно удовлетворить спрос на солидное драматическое меццо-сопрано, которое может отдать должное Верди и драматическому французскому репертуару.К сожалению, не хватает голоса, подобного Кристе Людвиг или Ширли Веррет. Вслед за Еленой Образцовой Россия дает новый урожай топового меццо-сопрано «spinto» во главе с очень востребованной Ольгой Бородиной.
Инструмент Бородиной — удивительно сочный и темный русский голос; впечатляющий по весу и чувственно подчеркнутый быстрым вибрато, придающим ему своего рода тепло в правильной дозировке. Более того, несмотря на размер, ее голос на удивление проворный, если не совсем легкий. И это делает ее бельканто из произведений Россини и Мейербера интересными.Даже в этом случае драматические арии Сен-Санса и Чайковского подходят ей к «Т», хотя их, вероятно, лучше принимать небольшими и отдельными дозами, а не целиком целиком.
На этом альбоме пение великолепно, но большую часть времени единодушно великолепное пение имеет тенденцию позволять слушателю через некоторое время терять интерес. Частично это может быть связано с тем, что звукорежиссеры слишком предпочитают голос оркестру. Оркестр Валлийской национальной оперы под управлением Карло Рицци иногда звучит так, как будто их не слышно.
Альбом открывается финальным рондо Золушки из оперы Россини «Ченерентола». Это спектакль в исполнении милой юной героини, которая, наконец, обретя независимость от сводной семьи, оборачивается и прощает их всех, чтобы закрыть шоу на высокой ноте. Бородина — очень пышная Cenerentola, хотя она значительно облегчила свой голос в этом исполнении, и стоит купить компакт-диск только для того, чтобы услышать такой громкий голос, который так хорошо справляется с грозной виртуозной концовкой кабалетты этой арии.Она справляется с этим, хотя достаточно очевидно, что усилия, необходимые для того, чтобы заставить голос такого размера бежать вверх и вниз по шкале, делают для нее практически невозможным на самом деле выразить большую часть пафоса персонажа, пока она в нем.
Ее попытка исполнить каватину Урбена из акта I Мейербера усиливает впечатление, а попытка исполнить арию Арсаче из акта I из Семирамиды скрепляет сделку. В Cenerentola, по крайней мере, есть что-то от персонажа, изображаемого — не молодой послушник-дворянин, а довольно авторитетная королева.Однако к тому времени, когда она добирается до Арсаче, заметки на странице озвучиваются (едва) вовремя. Пение красивое, но не более того. Звучит как атлет-тяжеловес, бегающий на 100 м. спринт.
Если бельканто не подходит для этого голоса в репертуаре, то барокко должно быть квадратным репертуаром для ее большой округлой вокальной привязки. Здесь Бородина — умная певица, которая знает, что нужно идти на медленные мелодичные номера, а не на зрелищные фейерверк-фестивали. Ее хорошо нагретый темный вулканический поток звука превращает плач Дидоны в медленно движущуюся реку блестящей печали.Прийти к этому треку после того, как она услышала ее попытку быстро воспроизвести номера бельканто, которые не позволили бы должным образом оценить текстуру ее голоса, сверху вниз, — это серьезная смена темпа. Это более трагичная Дидона, чем большинство других, которые я слышал, сочный голос Бородиной как-то компенсирует действительно медлительный темп. Знаменитая песня Серси о любви к чинару спета очень хорошо, но я не могу понять, откуда взялся второй куплет. Однако звукорежиссеры слишком сильно отдавали предпочтение голосу, и это звучало очень похоже на то, как Бородина пела а капелла.
В средних треках три арии Далилы из шедевра Сен-Санса «Самсон и Далила». Сегодня практически невозможно найти лучшего певца Далилы на оперной сцене, но слушать подряд три арии Далилы в треках 6, 7 и 8 не стоит похвалы. Здесь большую часть времени Бородина, кажется, наслаждается своим богатым голосом так же, как и мы, слушатели, и забывает быть персонажем. Вы не слышите, как этот Далила вырастает из женщины, раненой любовью, чтобы вызвать сочувствие Самсона (No.6) мстительному поклоннику, замышляющему заговор против своей жертвы (№ 7), самой роковой женщине оперы, поющей свою песню сирены, к тому времени уже весьма увлеченному Самсону (№ 8). Она просто великолепно поет ноты, голосом настолько опьяняюще богатым и эротичным и с такой хорошей французской дикцией, что в конце концов ее трудно винить. Тем не менее, все же лучше слушать эти треки с небольшим перерывом между ними, хотя в длинном оркестровом вступлении к длинной арии Маргариты из «Проклятия Фауста» с ее великолепным гобоем действительно есть передышка. соло.Голос Бородиной довольно тяжелый для роли, но в нем достаточно света для задумчивого настроения, хотя его вес все еще проявляется как помеха в короткой секции спринта, когда у нее достаточно времени, чтобы просто не отставать от оркестра. К тому времени, как вы дойдете до этой арии, уже будет более 40 минут прекрасного пения с минимальной характеристикой. Оркестр под управлением Карло Рицци тоже не так сильно задействован, за исключением того, что звукорежиссер его не одобряет.
Драматическое возвращение Бородиной на трек No.10, в самом неожиданном персонаже, «La Cieca» Понкьелли, слепая старушка, которая, только что спасенная от буйной толпы, оборачивается, чтобы с благодарностью благословить своего молодого благодетеля. Вступительная окраска вокала очень приветлива, хотя Бородина ни на йоту не похожа на жалкую старую каргу.
Из всего альбома последние две русские арии — это то, что лучше всего отражает Бородину, как вы слышите ее вживую. Прощание Жанны д’Арк с ее любимыми холмами и полями, когда она отправляется на войну, прекрасно выигрывает от темного тембра Бородиной и героической вокальной массы.Сцена Лизы из «Пиковой дамы» имеет соответствующий фаталистический оттенок, если голос звучит слишком импозантно для такого трагического и беспомощного персонажа.
У Ольги Бородиной один из самых офигительно великолепных оперных голосов, с оттенком отстраненности в голосе типа «Я знаю, ты не сможешь устоять, и если я позвоню, ты прибежишь», как сирена, но в Эта запись, качество которой не нарушается никаким драматическим напряжением, и слушать становится скучно после 4-5 треков. Поэтому не рекомендуется слушать этот альбом за один присест.

Анна Нетребко, Йонас Кауфманн, Нина Стемме, Лизетта Оропеса и Хуан Диего Флорес Ведут сезон

Венская государственная опера объявила о начале сезона 2021–2022 годов, в котором будут представлены лучшие исполнители мира и пять новых постановок.

Вот полный список.

Премьеры

Россини « Il Barbiere di Siviglia » представит Хуана Диего Флореса в роли графа Альмавивы, Марианну Кребассу в роли Розины, Давиде Лучано в роли Фигаро, Паоло Бордонья в роли Бартоло и Ильдара Абдразакова в роли Базилио.Микеле Мариотти дирижирует постановкой Герберта Фрича.

Даты выступления : 28 сентября — 14 октября 2021 г.

Моцарт « Дон Жуан » освещает Ханна-Элизабет Мюллер в роли Донны Анны, Кейт Линдси в роли Донны Эльвиры, Филипп Слай в роли Лепорелло и Кайл Кетельсен в главной роли. В актерский состав также входят Эйн Энгер, Станислас де Барбейрак, Патрисия Нольц и Питер Келлнер. Филипп Жордан дирижирует постановкой Барри Коски.

Даты исполнения : дек.5 — 20, 2021

Берга « Wozzeck » Аня Кампе в роли Мари, Кристина Бок в роли Маргрет и Кристиан Герхахер в главной роли. Актерский состав дополнят Шон Паниккар, Йорг Шнайдер, Дмитрий Белосельский, Джош Ловелл, Питер Келлнер, Стефан Астахов и Томас Эбенштейн. Филипп Джордан дирижирует постановкой Саймона Стоуна.

Даты выступления : 21 марта — 3 апреля 2022 г.

Шедевр Вагнера « Тристан и Изольда » получит новый облик в постановке Каликсто Бьейто с Андреасом Шагером и Мартиной Серафин в главных ролях.В опере также снимались Рене Папе в роли Кенига Марке и Екатерина Губанова в роли Брангена, а также Иэн Патерсон, Клеменс Унтеррайнер, Джош Ловелл, Мартин Хэсслер и Даниэль Йенц. Филипп Жордан дирижирует.

Даты выступления : 14 апреля — 1 мая 2021 г.

Монтеверди « L’Orfeo » освещает Георга Нигла, Славку Замечникову, Кейт Линдси, Кристину Бок и Андреа Мастрони. Пабло Эрас-Касадо дирижирует постановкой Тома Морриса.

Даты выступления : 11-18 июня 2022 г.

Возрождение

Кармен Джаннаттасио, Сайоа Эрнандес и Елена Стихина исполняют главную роль в пьесе Пуччини « Tosca .Фабио Сартори, Франческо Мели и Витторио Григоло исполнят Марио Каварадосси, а Эрвин Шротт, Геворг Акопян и Роберто Фронтали выступят в роли Скарпиа. Аксель Кобер, Марко Армилиато и Пьер Джорджо Моранди дирижируют постановкой Маргарет Вальманн.

Даты проведения : 3 сентября 2021 г. — 5 марта 2022 г.

Верди « Фальстаф » демонстрирует Бориса Пинхасовича, Фредерика Антуна, Джоша Ловелла, Элеонору Буратто, Славку Замечникову, Веру-Лотте Беккер, Монику Бохинец, Вирджини Веррес, Маргарет Пламмер и Джеральда Финчли в главной роли.Никола Луизотти и Джампаоло Бизанти дирижируют постановкой Марко Артуро Марелли.

Даты выступления : 4 сентября 2021 — 24 июня 2022

Красавица Йенде сыграет Виолетту Валери в опере Верди « Травиата». »Фредерик Антун исполнит Альфредо Жермона, а Людовик Тезье сыграет Джорджо Жермона. Никола Луизотти дирижирует постановкой Саймона Стоуна.

Даты выступления : 5 — 18 сентября 2021 г.

В фильме Ханса Вернера Хенце « Das Verratene Meer » будут сниматься Вера-Лотте Бёкер, Джош Ловелл, Бо Сковхус, Эрик Ван Хейнинген, Кангмин Джастин Ким, Стефан Астахов и Мартин Хэсслер.Симоне Янг дирижирует постановкой Джосси Вилера и Серхио Морабито.

Даты выступления : 19–27 сентября 2021 г.

Верди « Otello » с Рэйчел Уиллис-Соренсен в роли Дездемоны, Людовиком Тезье в роли Яго, Фредди Де Томмазо в роли Кассио и Грегори Кунде в главной роли. Бертран де Билли дирижирует постановкой Адриана Нобла.

Даты выступления : 22 сентября — 3 октября 2021 г.

В оперном шедевре Моцарта « Le Nozze di Figaro » будут сниматься Андре Шуэн и Майкл Надь в роли графа Альмавивы, Мария Бенгтссон в роли графини Альмавивы, Регула Мюлеманн в роли Сюзанны, Патрисия Нольц и Вирджиния Веррез в роли Керубино и Филиппа Слай. Келлнер в главной роли.Антонелло Манакорда и Адам Фишер дирижируют постановкой Жан-Пьера Поннель.

Даты выступления : 30 сентября 2021 — 16 мая 2022

Монтеверди « L’Incoronazione di Poppea » с Вирджини Веррес, Ксавье Сабата, Кристина Бок, сэр Уиллард Уайт, Вера-Лотте Беккер и Славка Замечникова в главной роли. Пабло Эрас-Касадо дирижирует постановкой Яна Лауэрса.

Даты выступления : 6–13 октября 2021 г.

В фильме Чайковского « Евгений Онегин » Николь Кар в роли Татьяны, Богдан Волков в роли Ленского и Андре Шуэн в главной роли.В актерский состав также входят Хелен Шнайдерман, Анна Горячова, Лариса Дядкова, Димитрий Иващенко и Дэн Пауль Думитреску. Томаш Ханус дирижирует постановкой Дмитрия Чернякова.

Даты выступления : 15 — 26 октября 2021 г.

Эрмонела Яхо снялась в главной роли Силеи « Адриана Лекуврер » с Брайаном Ягде в роли Маурицио, Никола Алаймо в роли Мишонне и Элиной Гаранча в роли принцессы ди Буйон. Омер Меир Велбер дирижирует постановкой сэра Дэвида Маквикара.

Даты выступления : 22 октября — 5 ноября 2021 г.

Стивен Костелло, Рэйчел Уиллис-Соренсен, Адам Палка и Этьен Дюпюи в фильме Гуно « Faust ». Бертран де Билли дирижирует постановкой Фрэнка Касторфа.

Даты выступления : 31 октября — 11 ноября 2021 г.

Верди « Nabucco » демонстрирует Анну Нетребко в роли Абигайль и Энхбат Амартувшин и Пласидо Доминго в главной роли.В актерский состав также входят Алессандро Либераторе, Роберто Тальявини и Сильвия Вёрёш. Паоло Кариньяни дирижирует постановкой Гюнтера Кремера.

Даты выступления : 1–12 ноября 2021 г.

Бизе « Кармен » будут сниматься Фредди Де Томмазо и Витторио Григоло в роли Дона Хосе, Эрвин Шротт и Александр Виноградов в роли Эскамильо, Вера-Лотте Бекер и Тамуна Гочашвили в роли Микаэлы и Клементина Маргейн и Анна Горячова в главной роли.Омер Меир Велбер и Алехо Перес дирижируют постановкой Каликсто Биеито.

Даты проведения : 8 ноября 2021 г. — 12 апреля 2022 г.

В фильме Вагнера « Der Fliegende Holländer » в главной роли участвуют Франц-Йозеф Селиг, Аня Кампе, Эрик Катлер, Ноа Бейнарт, Джош Ловелл и сэр Брин Терфель. Бертран де Билли дирижирует Кристин Милиц.

Даты выступления : 17 ноября — 2 декабря 2021 г.

Доницетти « L’Elisir d’amore » освещает Нину Минасян и Ольгу Кульчинскую в роли Адины, Хуана Диего Флореса, Стивена Костелло и Джоша Ловелла в роли Неморино; Клеменс Унтеррайнер и Сергей Кайдалов в роли Belcore; и Эрвин Шротт и Миша Кириа в роли Дулькамара.Риккардо Фризца и Марко Армилиато дирижируют постановкой Отто Шенка.

Даты выступления : 26 ноября , 2021 — 6 марта 2022

Никола Алаймо, Амброджо Маэстри, Сирил Дюбуа, Сергей Кайдалов, Кристина Мхитарян и Славка Замечникова — звезда в постановке Ирины Брук « Дон Паскуале ». Джакомо Сагрипанти и Эвелино Пидо дирижируют.

Даты проведения : 7 декабря 2021 г. — 2 мая 2022 г.

В фильме Вагнера « Парсифаль » в главной роли будут Вольфганг Кох в ролях Амфортаса и Клингсора, Рене Папе в роли Гурнеманца, Аня Кампе в роли Кундри и Брэндон Йованович в главной роли.Филипп Жордан дирижирует постановкой Кирилла Серебренникова.

Даты выступления : 12–26 декабря 2021 г.

В итальянской версии оперы Верди « Дон Карло » Эйн Гнев в роли Филиппа II, Борис Пинхасович в роли Родриго, Дмитрий Ульянов в роли Der Großinquisitor, Асмик Григорян в роли Элизабетты ди Валуа, Анита Рачвелишвили в роли Эболи и Фабио Сартори в главной роли. Франц Вельзер-Мёст дирижирует постановкой Даниэле Аббадо.

Даты исполнения : дек.16 — 25, 2021

Оперетта Иоганна Штрауса « Летучая мышь » принимает традиционные представления к Новому году. В знаменитой оперетте здесь играют Андреас Шагер в роли Габриэля фон Эйзенштейна и Рэйчел Уиллис-Соренсен в роли Розалинды. В актерский состав также входят Вольфганг Банкл, Кристина Бок, Йорг Шнайдер, Клеменс Унтеррайнер, Вера-Лотте Беккер и Питер Симонишек. Бертран де Билли дирижирует Отто Шенком.

Даты исполнения : дек.31 января 2021 г. — 5 января 2022 г.

Бенджамин Бернхейм, Николь Кар, Клеменс Унтеррайнер, Этьен Дюпюи, Вера-Лотте Беккер и Славка Замечникова — звезды в постановке Франко Дзеффирелли по опере Пуччини « Богема ». Ын Сун Ким дирижирует.

Даты проведения : 2 — 16 января 2022 г.

Россини « La Cenerentola » представлены Лоуренс Браунли, Вито Прианте, Паоло Бордоньа, Анна Горячова и Эрвин Шротт. Джанлука Капуано дирижирует постановкой Свена-Эрика Бехтольфа.

Даты проведения : 8-17 января 2022 г.

Массне « Werther » снимались Хуан Диего Флорес, Этьен Дюпюи, Жюли Булианна и Славка Замечникова. Джакомо Сагрипанти дирижирует постановкой Андрея Сербана.

Даты выступления : 15–20 января 2022 г.

Лука Сальси, Роберто Тальявини, Мартина Серафин и Фредди Де Томмазо — звезды в постановке Барри Коски « Макбет ». Джампаоло Бизанти дирижирует.

Даты выступления : 19–25 января 2022 г.

Чайковский « Пиковая дама » — это Дмитрий Головнин, Алексей Марков, Борис Пинхасович, Ольга Бородина и Елена Гусева. Валерий Гергиев дирижирует постановкой Веры Немировой.

Даты выступления : 21 — 30 января 2022 г.

Йонас Кауфманн, Лиз Дэвидсен и сэр Брин Терфель играют главную роль в постановке Кристин Милиц по пьесе Бриттена « Питер Граймс .Симона Янг дирижирует.

Даты выступления : 26 января — 8 февраля 2022 г.

Асмик Григорян исполняет главную роль в опере Пуччини « Манон Леско » с Брайаном Жагде в роли шевалье Рене де Грие и Борисом Пинхасовичем в роли Леско. Никола Луизотти дирижирует постановкой Роберта Карсена.

Даты выступления : 1–13 февраля 2022 г.

« Die Tote Stadt » Корнгольда — это Клаус Флориан Фогт, Вида Микнявичюте, Адриан Эрд и Моника Богинец.Томас Гуггейс дирижирует постановкой Вилли Декера.

Даты выступления : 6–14 февраля 2022 г.

Диана Дамрау играет главную роль в опере Доницетти « Анна Болена» вместе с Эрвином Шроттом в роли Энрико VIII и Екатериной Семенчук в роли Джованны Сеймур. В актерский состав также входят Пене Пати и Виржини Веррез. Джакомо Сагрипанти дирижирует постановкой Эрика Женовеза.

Даты выступления : 12-19 февраля 2022 г.

В фильме Рихарда Штрауса « Саломея » в главной роли представлены Вольфганг Аблингер-Сперхак, Клаудия Манке, Джон Лундгрен, Даниэль Дженц и Дженнифер Холлоуэй.Томас Гуггейс дирижирует постановкой Болеслава Барлога.

Даты выступления : 7 — 16 марта 2022 г.

Моцарт « Die Entführung aus dem Serail » с участием Кристиана Никеля, Лизетт Оропеса, Регулы Мюлеманн, Горана Юрича, Даниэля Беле и Михаэля Лоренца. Антонелло Манакорда дирижирует постановкой Ганса Нойенфельса.

Даты выступления : 12 — 22 марта 2022 г.

Верди « Риголетто » Франческо Демуро в роли Дука ди Мантуа, Вера-Лотте Беккер в роли Гильды, Евгений Солодовников в роли Спарафучиле, Моника Богинек в роли Маддалены и Людовик Тезье в главной роли.Марко Армилиато дирижирует постановкой Пьера Ауди.

Даты выступления : 20-30 марта 2022 г.

В фильме Рихарда Штрауса « Der Rosenkavalier » Мария Бенгтссон сыграет Фельдмаршаллин, а Кристину Бок — Октавиана. В актерский состав также входят Гюнтер Гройсбёк, Адриан Эрод, Луиза Алдер и Джош Ловелл. Филипп Жордан дирижирует Отто Шенком.

Даты выступления : 7–17 апреля 2022 г.

Джордж Питан, Лизетт Оропеса, Бенджамин Бернхейм, Джош Ловелл и Роберто Тальявини — звезды в фильме Доницетти « Лючия ди Ламмермур ».Эвелино Пидо дирижирует постановкой Лорана Пелли.

Даты выступления : 16-29 апреля 2022 г.

В фильме Мусоргского « Борис Годунов » в главной роли будут представлены Маргарет Пламмер, Тамуна Гочашвили, Томас Эбенштейн, Виталий Ковальов, Дмитрий Головнин и Ильдар Абдразаков. Себастьян Вайгле дирижирует постановкой Янниса Коккоса.

Даты выступления : 11–27 мая 2022 г.

Беллини « I Puritani » снимаются Роберто Тальявини, Джон Осборн, Игорь Головатенко и Прелестная Йенде.Франческо Ланзиллотта дирижирует постановкой Джона Дью.

Даты выступления : 20 мая — 2 июня 2022 г.

Моцарт « Die Zauberflöte » будет играть Анте Еркуница в роли Зарастро, Саймир Пиргу в роли Тамино и Ханна-Элизабет Мюллер в роли Памины. В актерский состав также входят Клеменс Унтеррайнер, Илеана Тонка и Георг Нигл. Ивор Болтон дирижирует постановкой Моше Лейзера и Патриса Корье.

Даты выступления : 19-25 июня 2022 г.

« Capriccio » Рихарда Штрауса освещает Марию Бенгтссон, Адриан Эрод, Даниэль Беле, Андре Шуен, Кристоф Фишессер и Микаэлу Шустер.Филипп Жордан дирижирует постановкой Марко Артуро Марелли.

Даты выступления : 20-30 июня 2022 г.

« La Cenerentola » получает еще одно особое выступление с приглашенным оркестром Les Musiciens du Prince-Monaco. Звезда Сесилия Бартоли, Эдгардо Роча, Никола Алаймо, Карлос Чауссон, Хосе Кока Лоза, Ребека Ольвера и Роза Бове. Джанлука Капуано дирижирует постановкой Клаудии Блерш.

Дата исполнения : 28 июня 2022 г.

« Il Turco in Italia » — это Ильдар Абдразаков, Сесилия Бартоли, Никола Алаймо, Барри Бэнкс, Джованни Ромео, Мария Хосе Ло Монако и Давид Асторга.Джанлука Капуано дирижирует «Музыкантами князя Монако» в постановке Жана-Луи Гринды.

Даты выступления : 3-7 июля 2022 г.

« Rossini-Gala » будут посвящены Сесилии Бартоли, Вардуи Абрамян, Роландо Вильясону, Ильдару Абдразакову, Леви Секгапане, Алессандро Корбелли, Никола Алаймо и Эдгардо Роча. Джанлука Капуано дирижирует Les Musiciens du Prince-Monaco.

Дата исполнения : 8.07.2022

Кольцо цикла

« Der Ring des Nibelungen » Вагнера будет исполнено в этом сезоне с участием некоторых из величайших вагнеровских певцов.Аксель Кобер дирижирует постановкой Свена-Эрика Бехтольфа.

« Das Rheingold » представит Джона Лундгрена в роли Вотана, Даниэля Беле, Сильвию Вёрёш, Регину Ханглер, Ноа Бейнарт, Йохена Шмекенбехера, Йорга Шнайдера, Артема Васнецова и Дмитрия Белосельского.

Дата исполнения : 4-21 мая 2022 г.

« Die Walküre » в главных ролях Стюарт Скелтон в роли Зигмунда, Джон Лундгрен в роли Вотана, Лиз Давидсен в роли Зиглинде и Нина Стемме в роли Брунгильды.В актерском составе также Дмитрий Белосельский и Сильвия Вёрёш.

Дата исполнения : 8-22 мая 2022 г.

« Siegfried » демонстрирует Нину Стемме, Джона Лундгрена, Йохена Шмекенбехера, Ноа Бейнарт, Йорга Шнайдера, Дмитрия Белосельского и Михаэля Вайниуса в главной роли.

Дата исполнения : 14-26 мая 2022 г.

Наконец, « Götterdämmerung » снимались Михаэль Вайниус, Клеменс Унтеррайнер, Дмитрий Белосельский, Йохен Шмекенбехер, Нина Стемме, Регина Ханглер и Сильвия Вёрёш.

Дата исполнения : 19-29 мая 2022 г.

Концерты

Лизетта Оропеса, Эрвин Шротт, Петр Бецала и Рене Папе выступят с концертами в новом сезоне. Хосе Каррерас представит специальный концерт AbschiedsGala.

Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности.Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.

Настройка вашего браузера для приема файлов cookie

Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее частые причины:

• В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки своего браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
• Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались.Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файлы cookie.
• Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
• Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере.
• Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie.Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Чтобы предоставить доступ без файлов cookie потребует, чтобы сайт создавал новый сеанс для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.

Что сохраняется в файле cookie?

Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.

Как правило, в cookie-файлах может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта. Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, пока вы не введете его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступа к остальной части вашего компьютера, и только сайт, который создал файл cookie, может его прочитать.

ISC-SAI |

Стратегии и тактика оценочного дискурса

Анна Приходько, Александра Приходченко, Марина Залужна, Галина Морошкина

Исследование включает анализ и описание коммуникативных стратегий и тактик в рамках оценочного дискурса.Под оценочным дискурсом понимается сложное коммуникативное явление, включающее, помимо лингвистических, экстралингвистические факторы (знания о мире, социокультурные…

Динамика онкологической заболеваемости в окружающей среде Кривого Рога

Дарья Шиян, Елена Лакомова, Сергей Сонько

В статье исследуются эколого-пространственные особенности распространения заболеваемости в Криворожском регионе (Кривбасс). Анализируются различные подходы к идентификации медико-географических территорий.В статье предлагается типология болезней, в соответствии с которой выделяются экологические и геопатогенные зоны….

Теоретические предпосылки для управления бизнес-процессами энергоэффективности на горнодобывающих предприятиях

Анатолий Темченко, Александр Темченко, Станислав Стовпник, Наталья Шевчук, Виктория Вапнична, Ростислав Тульчинский

В статье обоснована необходимость дальнейшего развития научного подхода к оценке и выбору энергосберегающих технологий при открытой разработке железорудных месторождений, что важно для горнодобывающей промышленности Украины.Предлагается структурная схема теории энергосбережения….

Правовая политика: последние аспекты развития

Ирина Мима, Владислав Ямковый, Иван Копайгора, Нина Иванюк

Проанализировано соотношение правовых категорий «политика» и «право», порождающее такое правовое явление, как «правовая политика». Дано общее теоретическое описание понятия «правовая политика», ее особенности, принципы функционирования. Суть правовой политики…

Бизнес и права человека: диалектика взаимодействия

Орлова Елена, Кучук Андрей, Ивании Елена

Принятие Руководящих принципов предпринимательской деятельности в аспекте прав человека и Руководящих принципов ОЭСР для многонациональных предприятий свидетельствует о постепенном изменении теории прав человека.Однако Конвенция о защите прав человека и основных свобод является наиболее универсальным международным договором и…

Развитие навыков делового общения с помощью междисциплинарного подхода к изучению английского языка

Кира Вишневская, Ольга Братаныч, Сергей Скидан, Елена Гушко, Ирина Лопатинская, Оксана Баланаева

Современное быстроразвивающееся общество знаний требует междисциплинарного подхода к изучению иностранного языка в неязыковых университетах.Чтобы соответствовать современным требованиям, преподавание иностранного языка в определенных областях требует нового подхода к учебной программе, направленного на повышение мотивации студентов…

Многоязычный подход к обучению второму иностранному языку студентов неязыковых специальностей

Оксана Романенко, Лариса Дзевицкая, Ольга Чижикова, Ирина Заболоцкая, Елена Зотова-Садыло, Ирина Базаренко

В статье рассмотрены проблемы обучения второму иностранному языку студентов не-лингвистического профиля на основе многоязычного подхода.В статье определено понятие плюрилингвизма. Раскрыты принципы изучения второго иностранного языка, сравнительная характеристика английского,…

Отчет о труде в системе управления персоналом

Людмила Ловинская, Евгения Калюха, Ирина Крыштопа, Лилия Корытник, Анна Умерова

Статистическая отчетность — это источник информационного обеспечения, комплексной оценки, мониторинга социально-трудовой деятельности для оперативного и стратегического управления предприятием, регионом, отраслью, государством для получения достоверной и полной информации об организации, использовании рабочей силы, социальной и трудовой…

Искусственный интеллект в электронной торговле: правовые аспекты

Денис Колодин, Оксана Теличко, Виктор Рекун, Максим Ткалыч, Владислав Ямковый

В настоящее время массовый переход розничной торговли к Интернету и замена таких продавцов искусственным интеллектом, а также использование искусственного интеллекта для обработки больших баз данных потенциальных покупателей, наряду с привлечением чат-ботов для общения с покупателями товаров, создают множество возможных…

Инновационные формы управления для реабилитируемых компаний

Анна Матукова, Валентина Храпкина, Дарья Матукова-Ярыха, Алла Максимова, Наталья Бахашова

В статье рассматриваются проблемы антикризисного управления предприятиями и пути решения проблемы трансформации кризисов и восстановления платежеспособности предприятий-банкротов и создания системы реабилитации в условиях кризисов.Авторами обоснован комплекс эффективных управленческих, экономических…

Коллаборационизм и военные преступления как явления в информационном обществе

Валентина Шайкан, Катерина Дацко, Нина Иванюк, Алим Батюк

В статье рассматривается важность для Украины в условиях гибридной войны имплементации норм международного и гуманитарного права в Уголовный кодекс Украины. Авторы утверждают, что проблема военных преступлений и сотрудничества в современном информационном обществе, и ее решение важно…

Концепция терминологической толерантности для экономического медиа-дискурса: украинские слова против заимствованных слов

Лариса Козловская, Светлана Терещенко, Леся Малевич, Майя Дзюба, Наталья Краснопольская, Елена Ткаченко

В исследовании представлен анализ экономического сегмента современного медиадискурса, который не только воспроизводит профессиональную информацию в различных жанрах, но и активно влияет на формирование новых языковых направлений.Одно из самых приоритетных явлений в украинских СМИ — найти постоянный…

Киберпреступность: аспекты защиты современного информационного пространства

Сергей Ткаличенко, Валентина Хоцкина, Жанна Цымбал

В статье рассматривается актуальная проблема современного общества — киберпреступность. Классификация понятия «киберпреступность» осуществляется в процессе изучения киберпреступлений и механизмов защиты от угроз информационной безопасности.Список тяжелейших киберпреступлений…

Социально-правовые механизмы предотвращения и противодействия издевательствам в молодежной среде

Катерина Левченко, Николай Легенький, Ольга Швед, Марина Легенко, Ольга Дунебабина

Масштабы издевательств в Украине и в мире в целом подтверждаются статистическими данными и данными исследований, и эта шкала требует принятия мер по обеспечению адекватного реагирования на нее. Проблема издевательств является международной, и для принятия мер по ее предотвращению и ограничению требуется инновационный подход…

Экологическое налогообложение и его влияние на стимулирование развития интеллектуальной промышленности

Марина Садовенко, Ирина Васильчук, Катерина Слюсаренко

В статье представлены результаты исследования, основанного на анализе теоретических концепций разработки экологического налога, оценке текущей климатической ситуации в мире и в Украине в частности.В статье также представлен анализ качественных и количественных показателей…

Актуальные аспекты развития экономики замкнутого цикла

Ольга Сосновская, Елена Штепа

Быстрые темпы роста промышленного производства в течение нескольких десятилетий привели к улучшению экономического благосостояния общества и спровоцировали обострение глобальных проблем в виде деградации окружающей среды, истощения природных ресурсов и возникновения глобального экологического кризиса.В…

Актуальные проблемы правового регулирования внутреннего водного транспорта в Украине

Олег Стец, Роман Шелудяков, Мераби Габриадзе, Антон Бусакевич

В статье анализируются пробелы в законодательстве по вопросу внутреннего водного транспорта в Украине. В частности, авторы определяют и характеризуют процесс внедрения европейского законодательства в области внутреннего водного транспорта и исследуют влияние европейских стандартов…

Анализируемые показатели устойчивого развития стран Европейского Союза и Украины

Катерина Холикова, Ирина Максимова, Светлана Мацюра, Виктория Радько, Нина Руденко, Дарина Жукова

В последнее время концепция устойчивого развития стала важным вопросом для каждой страны мира.Украина не исключение. Основная идея устойчивого развития — найти модель, которая бы уравновешивала экономическое развитие, социальную устойчивость и экологические проблемы. В этом исследовании мы…

Развитие бренда университета в условиях социально-демографических изменений

Илута Арбидане, Алена Богданова, Алена Колесова, Ирина Тетерева

Обоснование рекомендаций по развитию направлений развития бренда университета — неотъемлемая часть развития интеллектуального общества, а также основа преимущества в конкурентной среде в условиях социально-демографических изменений.Развитие…

Рынок криптовалют: проблемы и перспективы развития в Украине

Ермак Светлана, Маргарита Сатаньевская

В статье исследована история возникновения и развития криптовалюты, рассмотрены ее основные особенности, технология использования и виды. Курс биткойна по отношению к доллару США изучался в динамике за последние 5 лет и на конкретную дату (9 февраля 2020 г.). Рейтинг…

Моделирование транзакционных издержек клиента в электронной коммерции

Олег Пурский, Александр Харченко, Татьяна Дубовик, Ирина Бучацкая, Ирина Гамова, Павел Демидов

В настоящем исследовании представлены результаты моделирования транзакционных издержек клиентов в электронной коммерции.В этом исследовании мы сосредоточили свое внимание на влиянии внедрения коллективных маршрутов доставки продуктов и уровня конверсии потребителей на транзакционные издержки клиентов в…

Комплексный мониторинг качества родниковой воды в Мостиском районе Львовской области

Наталья Хойванович, Светлана Волошанская, Светлана Монастырская, Галина Ковальчук, Ярослав Лесык, Анзелика Ивасовка

Сельское население Украины в основном потребляет воду из колодцев и индивидуальных колодцев, которые (в подавляющем большинстве) находятся в неудовлетворительном техническом и санитарном состоянии.Для оценки качества родниковой воды в некоторых населенных пунктах Мостиского района были отобраны сезонные пробы воды в…

Трансформация валютных отношений в цифровой экономике

Анатолий Супрун, Ольга Смирна, Наталья Волошанюк, Татьяна Петришина, Олег Терещенко

Цифровая экономика влияет на все компоненты социально-экономической жизни. Денежные отношения также быстро меняются в связи с внедрением цифровых технологий. Причин этих изменений много.Единицы неодинаковы в разных странах; на них влияет как внутренняя среда страны…

Lempel-Ziv Сложность и кризисы рынка криптовалют

Владимир Соловьев, Сергей Семериков, Виктория Соловьева

Информационная (Колмогоровская) мера сложности в соответствии с алгоритмом Лемпеля-Зива (LZC) вычисляется для логарифмических возвратов ежедневных значений Биткойн / $. Расчеты проводились для движущегося окна с вариацией его размера (50–250 дней) с шагом в один день в диапазоне…

Здоровьесберегающая компетентность будущих учителей начальной школы: индикаторы развития

Светлана Паламар, Людмила Нежива, Галина Васьковская, Елена Ващенко, Геннадий Бондаренко, Марина Науменко

Исследование выявило возрастающий интерес ученых к проблеме формирования здоровьесберегающей компетентности будущих учителей начальных классов.Эта тенденция связана с необходимостью проведения социальных исследований для модернизации подготовки будущих педагогов, улучшения отдельных областей. Авторы исследования…

Межкультурный компонент в обучении иностранных студентов в Украине

Лариса Бондарчук, Тамара Подгурская, Оксана Ковтунец

Анализируются основные направления адаптации иностранных студентов к обучению в Украине, а также рассматривается современный формат гуманизации обучения иностранных студентов в экономических вузах на примере Киевского национального экономического университета имени Вадима Гетьмана.Наш опыт показывает, что…

Внедрение интеллектуальной специализации для регионального промышленного развития

Николай Сычевский, Людмила Дейнеко, Оксана Кушниренко, Елена Цыплицкая, Александр Дейнеко

Умная специализация рассматривается как новая возможность для развития европейских регионов и экономики в целом. В Украине умная специализация только осваивается по результатам исследования украинских промышленных предприятий, проведенного авторами в 2019 году. Целью исследования является идентификация…

Акмеологический подход к формированию здорового образа жизни студентов вузов

Баходир Мамуров, Абдухаким Маманазаров, Кобылжон Абдуллаев, Исмоил Давронов, Нурзод Давронов, Косимжон Кобылжонов

В статье представлен анализ формирования здорового образа жизни студентов в условиях реформирования системы высшего образования, дана педагогическая трактовка здорового образа жизни, сформулированы условия использования акмеологического подхода к формированию образа жизни. здоровый…

Моделирование объема государственного финансирования капитальных вложений с использованием логистических кривых

Виталий Кузьменко, Светлана Урванцева, Сергей Ходакевич, Владимир Романишин

В рамках настоящего исследования дано методологическое обоснование порогового значения государственного финансирования капитальных вложений как точки разворота (LPI).Точка реверса означает долю государственных расходов в структуре ВВП, превышение которой замедлит экономический рост….

Социальные работы в отдельных районах Донецкой и Луганской областей

Ганна Коваль, Валентина Санжаровец, Юлия Шатило

Предупреждение негативных явлений в окружающей среде дополняется ежегодным ростом кризисных явлений в обществе. Они тесно связаны с политической, социально-экономической ситуацией и нестабильностью в украинском обществе.Остро обсуждают боевые действия в некоторых районах…

Проблема децентрализации государственной власти в контексте территориальной независимости

Валентин Орлов, Обиджон Хамидов, Виктория Полякова, Валентина Шилова

Развитие современных форм социальной организации в условиях процветания и углубления влияния на человеческую жизнь информационного общества затрагивает в первую очередь все элементы механизма общества, и особенно подсистему государственного управления.Выступая в роли общественного деятеля…

Федеральная налоговая служба издает руководство по освобождению от налогообложения движимого имущества, полученного от связанных лиц

% PDF-1.5 % 2 0 obj > / Метаданные 4 0 R / Страницы 5 0 R / StructTreeRoot 6 0 R / Тип / Каталог >> эндобдж 4 0 obj > транслировать