День: 21.05.1978

Композиция из цветов в интерьере

Цветочная композиция из живых цветов может создаваться из самых разных растений. Сегодня существует такое их разнообразие, что реализовать творческий замысел в букетах будет вовсе не сложно. Важно все продумать, представить себе, что хочется видеть в результате, подобрать правильно цветы, чтобы они отлично сочетались.

Опытные флористы создают композиции цветов, используя самые разнообразные сочетания. В букетах встречаются и привычные нам розы, тюльпаны, гвоздики, и такие экзотические, как альстромерии, анемоны, герберы и множество других. Хорошо их дополняют декоративные травы, которые помогают сбалансировать композиции цветов, подчеркнуть их яркую индивидуальность.

Виды композиций

Композиция из цветов живых может иметь круглую, овальную, треугольную форму, быть каскадной и не только. Также различают разновидности букетов в соответствии с акцентами, размерами растений, подходом к компоновке. Бывают следующие варианты:

• один большой бутон в окружении цветов меньшего размера и декоративных трав;
• множество цветов одинакового примерно размера, которые могут быть одного цвета или же контрастировать;
• цветы одного вида в сочетании с декоративными листьями и травами.

Искусственные цветы в интерьере кухни

Натуральные флористические композиции с цветками всегда радуют глаз в интерьере собственного дома. Однако постоянно иметь дома свежие букеты – это удовольствие не из дешевых. Тем более, далеко не во всех помещениях существуют благоприятные условия для сохранения свежести растений. Но это вовсе не означает, что невозможно в них украсить интерьер красивыми цветками.

Существует большое количество искусственных цветов, которые, даже близко рассматривая, невозможно отличить от настоящих. Поэтому можно составить композиции с такими растениями, что поможет привнести в интерьер яркие краски, сделать его уникальным, порадовать себя красивыми растениями, букет которых будет смотреться ничуть не хуже живых цветов. 

Композиции из искусственных цветков будут радовать на протяжении длительного времени. Их можно сделать несколько, чтобы менять в зависимости от настроения и привносить в интерьер новизну.

Композиция из цветов на стену

Композиции букетов из живых цветов размещают не только на столе или полу. Ими уже давно флористы успешно украшают стены, чем делают любой интерьер максимально привлекательным, нарядным и эффектным.  

Букет для стены может иметь традиционную форму, но чаще флористы создают плоские круглые, овальные композиции, делают настоящие гирлянды. Использовать цветы для украшения комнат можно самыми разными способами. Необходимо просто проявить фантазию.

Как создать инсталляцию

Как составить красивый букет из живых цветов, чтобы он простоял максимально долго. Важно правильно выбрать основание, обеспечить поступление влаги к срезу стеблей. Понадобится выбрать самые свежие цветы, отдать предпочтение тем, которые стоят дольше других.

Первоначально придумывается идея композиций, выбирается форма, размеры, цветовое решение. На следующем этапе определяются, какие цветы, которые отлично сочетаются друг с другом. Затем в соответствии с выбранной концепцией их объединяют в единое целое, закрепляя каждое на своем месте. Действуют, как правило, работая с цветками, от центра к краям.

Букет на флористической губке

Для цветов используются специальные флористические губки, которые смачивают предназначенными составами. В основу флористических композиций с цветками ложится специальная ваза, подбукетник, декоративная подставка. При помощи тонкой проволоки и специальной клейкой ленты получается зафиксировать цветы в необходимых местах, чтобы они не двигались и сохраняли первоначальную красоту.

Флористические композиции из живых цветов при правильном уходе способны простоять довольно долго, радуя глаз.

Веер из цветов

Цветочные композиции такой формы являются одними из наиболее популярных. Они отлично подходят для вручения виновнику торжества или же для украшения интерьера. Такая композиция с цветками обращает на себя всегда внимание, создает праздничное настроение. Украшение цветами пользуется популярностью много веков и в любом случае является беспроигрышным вариантом.

Заключение

Красивыми живыми цветами можно отлично украсить любой интерьер. Они привносят в него частичку живой природы. Экспериментируйте, и результат флористических композиций, созданных своими руками, не заставит себя долго ждать. Пусть цветы наполнят вашу жизнь яркими красками

Светодиодная композиция из арок «Новогодняя Аллея»

Соглашение на обработку персональных данных

Данная политика конфиденциальности относится к сайту с доменным именем iskraled.ru и его поддоменам. Страница содержит сведения о том, какую информацию администрация сайта или третьи лица могут получать, когда пользователь (вы) посещаете его.

Данные, которые собираются при посещении Персональные данные

Персональные данные при посещении сайта передаются пользователем добровольно, к ним могут относиться: имя, фамилия, отчество, номера телефонов, адреса электронной почты, адреса для доставки товаров или оказания услуг, реквизиты компании, которую представляет пользователь, должность в компании, которую представляет пользователь, аккаунты в социальных сетях, а также — прочие, заполняемые поля форм.

Эти данные собираются в целях оказания услуг или продажи товаров, возможности связи с пользователем или иной активности пользователя на сайте, а также, чтобы отправлять пользователю информацию, которую он согласился получать.

Мы не проверяем достоверность оставляемых данных и не гарантируем качественного исполнения заказов, оказания услуг или обратной связи с нами при предоставлении некорректных сведений.

Данные собираются имеющимися на сайте формами для заполнения (например, регистрации, оформления заказа, подписки, оставления отзыва, вопроса, обратной связи и иными).

Формы, установленные на сайте, могут передавать данные как напрямую на сайт, так и на сайты сторонних организаций (скрипты сервисов сторонних организаций).

Данные могут собираться через технологию cookies (куки) как непосредственно сайтом, так и скриптами сервисов сторонних организаций. Эти данные собираются автоматически, отправку этих данных можно запретить, отключив cookies (куки) в браузере, в котором открывается сайт.

Не персональные данные

Кроме персональных данных при посещении сайта собираются не персональные данные, их сбор происходит автоматически веб-сервером, на котором расположен сайт, средствами CMS (системы управления сайтом), скриптами сторонних организаций, установленными на сайте. К данным, собираемым автоматически, относятся: IP адрес и страна его регистрации, имя домена, с которого вы к нам пришли, переходы посетителей с одной страницы сайта на другую, информация, которую ваш браузер предоставляет добровольно при посещении сайта, cookies (куки), фиксируются посещения, иные данные, собираемые счетчиками аналитики сторонних организаций, установленными на сайте.

Эти данные носят неперсонифицированный характер и направлены на улучшение обслуживания клиентов, улучшения удобства использования сайта, анализа статистики посещаемости.

Предоставление данных третьим лицам

Мы не раскрываем личную информацию пользователей компаниям, организациям и частным лицам, не связанным с нами. Исключение составляют случаи, перечисленные ниже.

Данные пользователей в общем доступе

Персональные данные пользователя могут публиковаться в общем доступе в соответствии с функционалом сайта, например, при оставлении отзывов / вопросов, может публиковаться указанное пользователем имя, такая активность на сайте является добровольной, и пользователь своими действиями дает согласие на такую публикацию.

По требованию закона

Информация может быть раскрыта в целях воспрепятствования мошенничеству или иным противоправным действиям; по требованию законодательства и в иных случаях, предусмотренных законами РФ.

Для оказания услуг, выполнения обязательств

Пользователь соглашается с тем, что персональная информация может быть передана третьим лицам в целях оказания заказанных на сайте услуг, выполнении иных обязательств перед пользователем. К таким лицам, например, относятся курьерская служба, почтовые службы, службы грузоперевозок и иные.

Сервисам сторонних организаций, установленным на сайте

На сайте могут быть установлены формы, собирающие персональную информацию других организаций, в этом случае сбор, хранение и защита персональной информации пользователя осуществляется сторонними организациями в соответствии с их политикой конфиденциальности.

Сбор, хранение и защита полученной от сторонней организации информации осуществляется в соответствии с настоящей политикой конфиденциальности.

Как мы защищаем вашу информацию

Мы принимаем соответствующие меры безопасности по сбору, хранению и обработке собранных данных для защиты их от несанкционированного доступа, изменения, раскрытия или уничтожения, ограничиваем нашим сотрудникам, подрядчикам и агентам доступ к персональным данным, постоянно совершенствуем способы сбора, хранения и обработки данных, включая физические меры безопасности, для противодействия несанкционированному доступу к нашим системам.

Ваше согласие с этими условиями

Используя сайт, вы выражаете свое согласие с этой политикой конфиденциальности. Если вы не согласны с этой политикой, пожалуйста, не используйте его. Ваше дальнейшее использование сайта после внесения изменений в настоящую политику будет рассматриваться как ваше согласие с этими изменениями.

Отказ от ответственности

Политика конфиденциальности не распространяется ни на какие другие сайты и не применима к веб-сайтам третьих лиц, которые могут содержать упоминание о нашем сайте и с которых могут делаться ссылки на сайт, а также ссылки с этого сайта на другие сайты сети интернет. Мы не несем ответственности за действия других веб-сайтов.

Изменения в политике конфиденциальности

Мы имеем право по своему усмотрению обновлять данную политику конфиденциальности в любое время. Мы рекомендуем пользователям регулярно проверять эту страницу для того, чтобы быть в курсе любых изменений о том, как мы защищаем информацию о пользователях, которую мы собираем. Используя сайт, вы соглашаетесь с принятием на себя ответственности за периодическое ознакомление с политикой конфиденциальности и изменениями в ней.

Цветочные композиции в студии флористики «Фреш»

Композиция из цветов ориентирована на торжество и конкретного человека. Соответственно выбор должен проводиться с учетом многих факторов: характера праздника, пола и возраста виновника, его семейного положения или занимаемой должности, отношений между дарителем и получателем.

Торжество влияет на характеристики букета. Так, подарочные композиции на юбилей начальника или день рождения любимой женщины будут выглядеть совершенно по-разному, нести различную смысловую нагрузку. То же самое касается любого другого праздника. При выборе букета необходимо учитывать его особенности:

• официальное мероприятие по поводу юбилея фирмы, заключения важного договора, открытия дополнительных филиалов или любое другое значимое мероприятие не допускает легкомысленных, ярких букетов. Цветочная композиция должна быть сдержанной, элегантной;
• цветочная композиция на рождение ребенка оформляется в двух вариантах — в виде букета или корзины. Второй вариант преподносят, когда роженица еще находится в палате, а с букетом встречают при выписке из роддома. Подарок не должен обладать сильным ароматом, используются гипоаллергенные цветы;
• композиция на свадьбу должна быть пышной, яркой и сочетаться с платьем и аксессуарами невесты, фатой или цветочным венком на ее голове.

Что надо знать о цветах для композиций?

В зависимости от цветовой гаммы, дизайна и цветов букет поднимет настроение, создаст романтическую атмосферу или подчеркнет торжественность мероприятия.

Выбор цветов должен опираться на их сочетаемость друг с другом, предпочтения получателя, особенности праздника. В частности:

1. Если композиция приобретается по случаю рождения ребенка, то от пола малыша зависит превалирующий цвет: если это мальчик, то цветы или ленточки в букете должны быть голубого или синего тона, если девочка – розового.
2. Букет, предназначенный для мужчины (особенно на 23 февраля), должен символизировать надежность, защиту, поэтому цветы для него имеют четкие и строгие формы. В фаворитах — гвоздики или тюльпаны.
3. На юбилей начальнику или коллеге следует дарить элегантный букет из того количества цветов, которое соответствует дате. Если число четное, нужно добавить еще одно растение. А на юбилей родному человеку, например отцу, можно преподнести гладиолусы, астры или хризантемы.

Дизайнеры студии флористики «Фреш» создадут композицию из живых цветов с использованием качественного декора. Опыт работы позволяет понимать клиентов с полуслова. Достаточно описания вкусовых предпочтений получателя, чтобы будущая цветочная композиция осталась для него приятным воспоминанием.

Выбирайте композицию для любого торжества: юбилея, дня рождения малыша, свадьбы, Нового года. Доставим заказ в любую точку Москвы в течение часа.

Композиции из цветов — статьи о цветах на Флора Экспресс

Самые зрелищные цветочные выставки России и мира

Для цветочной индустрии характерно проведение различных выставок, парадов, фестивалей и шоу. На таких мероприятиях каждый желающий может насладиться великолепием выращиваемых растений, посетить мастер-класс или просто прогуляться по искусно оформленной территории. Невероятные по зрелищности цветочные выставки проводятся во многих государствах мира, в том числе и в России.

Игрушки из живых цветов. Как ухаживают за ними?

Игрушка из цветов – оригинальный и незабываемый презент на любой праздник. Популярность трогательных фигурок растет. Они способны вызвать большую гамму положительных эмоций и поднять настроение на длительное время. В флористических салонах можно встретить невероятно красивые игрушки и подарить в особенный или обычный день.

Идеи свадебного украшения зала: люстры из цветов

Живые цветы – украшение, которое уместно везде. Тем более, если речь идет о свадьбе. Декорирование праздничного зала бутонами и растениями всегда было неотъемлемой частью свадебного торжества. Интересной деталью такого декора является оформление потолка и люстр красивыми соцветиями. Как украсить их так, чтобы это органично смотрелось с общим стилем всего помещения, мы расскажем в этой статье.

Игрушки из живых цветов

Игрушки из живых цветов – это альтернатива классическому букету. Цветочная игрушка будет уместна в качествен подарка на день рождения девушке или ребенку. Такой букет можно преподнести ребенку, который пошел в 1 класс или закончил год на отлично. Композиции изготавливаются профессиональными мастерами, в изготовлении используется несколько видов растений, а также флористическая губка или оазис. Используя такую технологию можно создать не только игрушки, но и абсолютно любые композиции.

Пасхальные композиции из цветов

Помимо творожной пасхи, куличей и крашенных яиц праздничный стол могут украшать горшки с цветами, венки из растений и сухоцветов, украшенные в соответствии с тематикой, цветочные корзинки, гнезда и т.д. В оформлении композиций часто используются игрушечные цыплята, яичные скорлупки или пасхальные зайчики.

Композиции из цветов в корзине

Композиция из цветов в корзине всегда была популярным подарком на день рождения, свадьбу и любое значимое событие. Корзина выглядит презентабельно и дорого, более того, она дольше сохраняет свежесть, нежели букет на длинных ножках. Корзинку можно поливать как комнатное растение, тем самым продлевая жизнь букету.

Весенние композиции из цветов

Весна богата на недорогие яркие цветы, которые появляются с первыми лучиками солнца.

Композиции из белых цветов

Белый цвет – символ чистоты и невинности. Конечно же, первое, что приходит на ум, когда мы представляем композиции из белых цветов, это невеста! Белый ангел, воплощение непорочности, будущая мать – продолжательница рода и хранительница семейного очага – кто может быть важнее в этом мире? Радовать такую женщину – святой долг каждого мужчины! Жених, выбирающий свадебный букет, нередко обращает свой взор на розы, разумеется, белого оттенка! Такой букет априори будет прекрасен, а преподнесённый в наиважнейший день – день рождения молодой семьи, он станет символом начала новой счастливой жизни!

Маленькие композиции из цветов

Цветы – это, пожалуй, самое прекрасное, что создала Природа. От разнообразия красок и ароматов, форм и размеров просто захватывает дух. Цветы, особенно умело подобранные композиции, способны повысить настроение в самый хмурый день. Скомбинированные мастером-флористом герберы, розы, орхидеи, эустомы заставят вас улыбнуться и сделают жизнь ярче.

Необычные композиции из цветов

Бизнес-букет, столь необходимый на различных важных мероприятиях, должен выглядеть как минимум шикарным, как максимум – оригинальным. Типовые композиции, так часто встречаемые нами на днях рождениях и юбилеях, в таком случае не подойдут: букет, создаваемый для важных деловых встреч на высшем уровне, должен быть составлен настоящим мастером-флористом, чьи идеи вызывают восторг у окружающих. Только необычные композиции из цветов запомнятся деловым людям и понравятся гостям праздника. В такие букеты входят только дорогие цветы, способные подчеркнуть всю торжественность мероприятия.

Композиция с красным, синим и жёлтым, Пит Мондриан, картина

Истории произведений искусства уникальны.  В рубрике «Pic of the Week» мы продолжаем рассказывать о знаменитых шедеврах живописи и их секретах. Сегодня речь пойдёт о работе Пита Мондриана «Композиция с красным, синим и жёлтым».

Год создания

1930

История создания

Голландец Пит Мондриан являлся одним из основателей общества художников «Стиль» (De Stij), образованного в 1917 году. Также это движение носило название неопластицизм.  В основе его идеологии лежал рационально-утилитаристский подход к искусству. Основными же элементами живописи ими были провозглашены прямой угол и три цвета, красный, жёлтый и синий, которые могли дополняться чёрным и белым.

В соответствии с этой концепцией Мондриан в своих работах прибегал к окрашиванию чистым цветом широких областей на картине в манере импрессионистов, что отражало беспокойную и эмоциональную часть творчества. В то же время, в качестве основы для композиции он избрал скрещенные и горизонтальные линии. Сочетание этих двух технических элементов составили основу творчества Мондриана.

Именно картину «Композиция с красным, синим и желтым» можно назвать квинтэссенцией этих художественных принципов. Контрастные горизонтальные и вертикальные линии представляют для Мондриана активную связь, в которой он стремился имитировать ритм и вибрации жизни. Этой же цели подчинено и использование разноформатных областей, заполненных цветом. Таким образом, все элементы, находящиеся внутри композиции, контрастируют и указывают на внутреннюю гармонию жизни, которая скрыта под поверхностью.

Интересные факты

Интересно, что работа Мондриана «Композиция с красным, синим и желтым» приобрела широкую известность после показа кутюрной коллекции Ива Сен-Лорана 1965 года. Для неё дизайнер создал шесть платьев, ставших своего рода полотном для знаковой работы художника. Собственно, коллекция легендарного кутюрье и была озаглавлена «Мондриан».

Комментарии

Определение композиции по Merriam-Webster

состав | \ Käm-pə-ˈzi-shən \ 1а : акт или процесс составления конкретно : расположение в определенной пропорции или соотношении, особенно в художественной форме уникальная композиция картины

б (1) : расположение шрифта для печати состав руки

(2) : изготовление шрифтов или типографских знаков (как в фотокомпозиции), предназначенных для печати

2а : способ составления чего-либо

б : общий макияж меняющийся этнический состав населения города

c : качественный и количественный состав химического соединения. химический состав полимера

3 : взаиморасчет или договор Две партии составили композицию.

4 : продукт смешивания или комбинирования различных элементов или ингредиентов. смесь резины и пробки

5 : интеллектуальное творение: например,

а : кусок письма особенно : школьное упражнение в форме краткого сочинения написал сочинение о роли полиции в нашем обществе

б : музыкальное произведение, особенно значительного размера и сложности. На сольном концерте прозвучала ее композиция для фортепиано и флейты.

6 : качество или состояние соединения

Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности. Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.

---

Настройка вашего браузера для приема файлов cookie

Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее частые причины:

• В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки своего браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
• Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались.Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файлы cookie.
• Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
• Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере.
• Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie.Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.

---

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Чтобы предоставить доступ без файлов cookie потребует, чтобы сайт создавал новый сеанс для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.

---

Что сохраняется в файле cookie?

Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.

Как правило, в файле cookie может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта. Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, пока вы не введете его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступа к остальной части вашего компьютера, и только сайт, который создал файл cookie, может его прочитать.

Состав функций

«Композиция функций» применяет одну функцию к результатам другой:

Результат f () отправляется через g ()

Записано: (g º f) (x)

Что означает: g (f (x))

Пример:

f (x) = 2x + 3 и g (x) = x ²

«x» — это просто заполнитель .Во избежание путаницы назовем его просто «ввод»:

f (ввод) = 2 (ввод) +3

г (ввод) = (ввод) ²

Начнем:

(г º f) (x) = g (f (x))

Сначала мы применяем f, затем применяем g к этому результату:

(g º f) (x) = (2x + 3) ²

Что, если мы поменяем местами порядок f и g?

(f º g) (x) = f (g (x))

Сначала мы применяем g, затем применяем f к этому результату:

(f º g) (x) = 2x ² +3

Получаем другой результат!

Когда мы меняем порядок, результат редко бывает одинаковым.

Так что будьте осторожны, какая функция стоит первой.

Символ

Обозначение композиции — маленький кружок:

(g º f) (x)

Это , а не , а заполненная точка: (g · f) (x), так как это означает, что умножить на .

Состоит из себя

Мы даже можем составить функцию сама с собой!

Пример:

f (x) = 2x + 3

(f º f) (x) = f (f (x))

Сначала мы применяем f, затем применяем f к этому результату:

(f º f) (x) = 2 (2x + 3) +3 = 4x + 9

Мы могли бы обойтись без красивой диаграммы:

(f º f) (x) = f (f (x))

= е (2x + 3)

= 2 (2x + 3) +3

= 4x + 9

Домены

До сих пор это было легко, но теперь мы должны рассмотреть Домены функций.

Домен — это , набор всех значений , которые входят в функцию.

Функция должна работать для всех значений, которые мы ей даем, так что зависит от нас , чтобы убедиться, что мы получили правильный домен!

Пример: домен для √x (квадратный корень из x)

У нас не может быть квадратного корня из отрицательного числа (если мы не используем мнимые числа, но это не так), поэтому мы должны исключить отрицательных чисел:

Область √x — все неотрицательные действительные числа

На числовой прямой это выглядит так:

В нотации конструктора множеств записано:

{x | x ≥ 0}

Или, используя обозначение интервала, это:

[0, + ∞)

Важно правильно оформить домен, иначе мы получим плохие результаты!

Область составной функции

Мы должны получить для обоих Доменов правильно (составная функция и — первая использованная функция).

При выполнении, например, (g º f) (x) = g (f (x)):

• Убедитесь, что мы получили домен для f (x) правильно,
• Затем также убедитесь, что g (x) получает правильный домен

Пример:

f (x) = √x и g (x) = x ²

Область f (x) = √x — все неотрицательные действительные числа

Область g (x) = x ² — это все действительные числа

Составная функция:

(g º f) (x) = g (f (x))

= (√x) ²

= х

Итак, «x» обычно имеет Домен всех действительных чисел…

… но поскольку это составная функция , мы должны также учитывать f (x) ,

Таким образом, домен состоит из неотрицательных вещественных чисел

Почему оба домена?

Ну, представьте, что функции — это машины … первая плавит отверстие пламенем (только для металла), вторая просверливает отверстие немного больше (работает с деревом или металлом):

То, что мы видим в конце, — это просверленное отверстие, и мы можем подумать, что «это должно работать для дерева или металла ». Но если мы поместим дрова в g º f, то первая функция f разожжет огонь и сожжет все дотла!

Поэтому важно то, что происходит «внутри машины».

Функция разложения

Мы можем пойти другим путем и разбить функцию на набор других функций.

Пример:

(x + 1 / x) ²

Эту функцию можно выполнить с помощью этих двух функций:

f (х) = х + 1 / х

г (х) = х ²

И получаем:

(g º f) (x) = g (f (x))

= г (х + 1 / х)

= (х + 1 / х) ²

Это может быть полезно, если исходная функция слишком сложна для работы.

Резюме

• «Функциональная композиция» применяет одну функцию к результатам другой.
• (g º f) (x) = g (f (x)) , сначала примените f (), затем примените g ()
• Мы также должны уважать область первой функции
• Некоторые функции можно разделить на две (или более) более простые функции.

Химический состав Земли, Венеры и Меркурия

Proc Natl Acad Sci U S A.1980 Dec; 77 (12): 6973–6977.

Джон У. Морган

^* Геологическая служба США, Национальный центр, Рестон, Вирджиния 22092

Эдвард Андерс

^† Институт Энрико Ферми, Чикагский университет, Чикаго, Иллинойс 60637

^* Геологическая служба США Survey, Национальный центр, Рестон, Вирджиния 22092

^† Институт Энрико Ферми, Чикагский университет, Чикаго, Иллинойс 60637

Эта статья цитируется другими статьями в PMC.

Abstract

Модельные составы Земли, Венеры и Меркурия рассчитаны исходя из предположения, что планеты и хондриты претерпели четыре идентичных процесса фракционирования в солнечной туманности. Поскольку элементы схожих свойств остаются вместе в этих процессах, для определения состава планеты достаточно пяти ограничений: масса ядра, содержание U и отношения K / U, Tl / U и FeO / (FeO + MgO). . Для всех трех планет даны полные таблицы содержания и нормативные минералогии.Обзор доступных данных показывает только несколько общих тенденций для внутренних планет: FeO уменьшается с гелиоцентрическим расстоянием, тогда как летучие вещества истощаются, а рефракторы обогащаются на меньших планетах.

Полный текст

Полный текст доступен в виде отсканированной копии оригинальной печатной версии. Получите копию для печати (файл PDF) полной статьи (1,2M) или щелкните изображение страницы ниже, чтобы просмотреть страницу за страницей. Ссылки на PubMed также доступны для Избранные ссылки .

Изображения в этой статье

Щелкните изображение, чтобы увидеть его в увеличенном виде.

Избранные ссылки

Эти ссылки находятся в PubMed. Это может быть не полный список ссылок из этой статьи.

• Андерс Э., Оуэн Т. Марс и Земля: происхождение и содержание летучих веществ. Наука. 1977, 4 ноября; 198 (4316): 453–465. [PubMed] [Google Scholar]
• Аренс Т.Дж. Динамическое сжатие материалов Земли. Наука. 7 марта 1980 г .; 207 (4435): 1035–1041.[PubMed] [Google Scholar]
• Вассербург Г.Дж., Макдональд Г.Дж., Хойл Ф., Фаулер В.А. Относительные вклады урана, тория и калия в производство тепла на Земле. Наука. 1964, 31 января; 143 (3605): 465–467. [PubMed] [Google Scholar]
• Поллак Дж. Б., Блэк, округ Колумбия. Влияние измерений газового состава Пионерной Венеры на происхождение планетных атмосфер. Наука. 6 июля 1979 г.; 205 (4401): 56–59. [PubMed] [Google Scholar]
• Льюис Дж. С.. Градиент температуры в солнечной туманности.Наука. 1 ноября 1974 г.; 186 (4162): 440–443. [PubMed] [Google Scholar]

---

Статьи из материалов Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки любезно предоставлены Национальной академией наук

---

Split-BioID — подход условной протеомики для мониторинга состав пространственно-временных белковых комплексов

Плазмиды и антитела

Плазмиды, праймеры и антитела, использованные в этом исследовании, представлены в дополнительных таблицах 1–5

Культура клеток

Клетки HELA 11ht с низким прохождением, субклональные клетки HeLa-CCL2 Линия, стабильно экспрессирующая активатор транскрипции, контролируемого обратным тетрациклином, rtTA-M2 и содержащая локус для опосредованного Flp-рекомбиназой обмена кассет ⁶² , была получена от Dr Kai Schönig (ZI Mannheim).Клетки регулярно проверяли на заражение микоплазмами. Клетки выращивали в среде DMEM (Sigma), содержащей 10% бычьей сыворотки без тетрапов (Biowest), 200 мкг мл ^-1 HygromycinB (Sigma) и 200 мкг мл ^-1 G418 (Sigma).

Конструирование плазмид

Различные конструкции сплит-BioID были сконструированы для совместной экспрессии с использованием остова pSF3, несущего двунаправленный тетрациклин-чувствительный промотор ⁵¹ . Фрагменты NBirA * и CBirA * амплифицировали с помощью ПЦР с использованием плазмиды pSF3-BirA * в качестве матрицы и введения либо SalI и AscI, либо PacI и BglII в качестве сайтов разрезания соответственно.Амплификацию фрагмента CBirA * проводили с использованием прямого праймера C66, C271 или C274 вместе с обратным праймером BirA *. Фрагмент NBirA * амплифицировали с использованием прямого праймера BirA * вместе с обратным праймером N65, N270 или N273. FRB был амплифицирован с дополнительными сайтами рестрикции для FseI и PacI, тогда как FKBP был сконструирован с помощью AscI и BamHI. Глицин-сериновые линкеры были интегрированы между FRB и CBirA * с использованием PacI (линкер 1) или NBirA * и FKBP с использованием сайтов рестрикции AscI (линкер 2).

Оптимальные плазмиды с расщепленным BioID (четыре комбинации E256 / G267) также были сконструированы с каркасом pSF3, но CBirA * и NBirA * были заказаны как gBlocks (IDT), слитые с последовательностью, кодирующей те же глицин-сериновые линкеры ( QISYASRGGGSSGG и GGGSSGGQISYASRG), которые использовались в PCA на основе расщепленной люциферазы ¹⁷ , и к конкретным сайтам рестрикции для вставки интересующих слитых белков. Большинство используемых слитых белков были либо интегрированы через сайты рестрикции PmeI и PacI, либо ClaI и MluI, в зависимости от слияния с частью CBirA * или частью NBirA *, соответственно.Белки слияния, в которых эти сайты рестрикции не могут быть использованы, были разработаны с использованием инструмента NEBuilder. Все слитые белки амплифицировали с помощью ПЦР.

Конструкция

E140 / Q141 была сконструирована путем замены частей sBirA * E256 / G267 в конструкции 2 на FKBP-NBirA * E140 и CBirA * Q141, амплифицированные с помощью ПЦР, с использованием сайтов рестрикции ClaI / BamHI и EcoRI / BglII соответственно.

Для экспрессии рекомбинантных белков CED-домен TNRC6C (аминокислоты 1369–1690) был амплифицирован с помощью ПЦР и перенесен с использованием сайтов рестрикции BamHI и NheI в модифицированную плазмиду pMal-c2x (New England Biolabs), которая допускает N-концевой маркировка MBP и маркировка C-конца шестью гистидинами.Соответствующий мутант, кодирующий AAGL, был получен сайт-направленным мутагенезом. Два фрагмента GIGYF2 (аминокислоты 532–740 и 607–740) были амплифицированы с помощью ПЦР и перенесены с использованием сайтов рестрикции MfeI и NotI в плазмиду pGEX-6p (GE Healthcare), которая позволяет метить N-конец с помощью GST.

Иммунопреципитации

Для каждого образца использовали 35 мкл суспензии связанных с белком магнитных шариков (CST или NEB (25 мкл суспензии)). Гранулы связывали с 2,5–5 мкг антитела при 4 ° C в течение 1 ч в промывочном буфере (50 мМ Трис, pH 7.4, 300 мМ NaCl, 1 мМ MgCl ₂ , 0,5% NP-40). Лизаты клеток получали, как описано выше (Скрининг на биотинилирование). Такие же количества белка (100–250 мкг) загружали на предварительно связанные шарики, затем образцы доводили до 250 мкл с помощью буфера для лизиса и инкубировали в течение ночи при 4 ° C на вращающемся колесе. На следующий день шарики промывали четыре раза промывочным буфером IP и элюцию проводили путем кипячения (в случае анти-Myc IP) или инкубации с пептидом FLAG (150 нг мкл ^-1 в TBS) в течение 30 мин. при 4 ° C.Полученные образцы анализировали методом вестерн-блоттинга.

Для совместного IP эндогенных белков клетки HeLa 11ht выращивали в чашке диаметром 10 см и собирали в 1,4 мл буфера для лизиса, который инкубировали в течение 30 мин при 4 ° C. Очищенные лизаты обрабатывали микрококальной нуклеазой или без нее (14 гелевых единиц на мкл, NEB) и 1,5 мМ CaCl ₂ в течение 25 минут при комнатной температуре (RT). Затем образцы загружали на предварительно связанные шарики с использованием контрольных антител против Ago2, против TNRC6A, против GIGYF2 или против IgG (каждое по 5 мкг).Инкубацию, промывку и элюцию выполняли, как описано выше.

Скрининг на биотинилирование

клеток HeLa 11ht высевали в концентрации 1 × 10 ⁵ клеток на лунку шестилуночного планшета или 8 × 10 ⁵ клеток на 10 см чашку за день до трансфекции. Трансфекцию проводили с использованием полиэтиленимина (Polysciences, Inc.) в соотношении 2: 1 (мас. / Мас.) К добавленному количеству ДНК. Плазмидную ДНК (3 мкг для шести лунок и 6 мкг для 10 см), полиэтиленимин и DMEM (без сыворотки) смешивали в общем объеме 500 мкл, инкубировали в течение 5 мин при комнатной температуре и добавляли к клеткам.Среду клеток меняли непосредственно перед трансфекцией. На следующий день после трансфекции к среде добавляли биотин (Sigma) (50 мкМ) и клетки индуцировали 200 нг мл доксициклина ^-1 (Sigma). Кроме того, для конструкций FRB / FKBP добавляли рапамицин (Invivogen) до 100 нМ. Лизаты готовили через 24 часа после индукции следующим образом: клетки промывали один раз PBS и соскребали 100 мкл лизирующего буфера (50 мМ Трис, pH 7,4, 150 мМ NaCl, 2 мМ EDTA, 0,5% NP-40, 0,5 мМ DTT и полная протеаза. ингибитор (Roche)) с последующей стадией центрифугирования при 14000 g в течение 10 мин при 4 ° C.Количество белка определяли с помощью анализа Брэдфорда (Expedeon), и равные количества белка наносили на гели SDS-PAGE и анализировали с помощью вестерн-блоттинга.

Вестерн-блот-анализ

После SDS-PAGE белки были перенесены на мембрану из PVDF с низкой флуоресценцией (Millipore) с использованием программы высокомолекулярного анализа Trans-Blot Turbo Transfer System (BioRad) или переноса в течение ночи (80 мА, 4 ° C) в ячейке Mini Trans-Blot (BioRad). Мембраны блокировали на 1 час в 5% обезжиренном молоке в PBS при комнатной температуре, а затем инкубировали с соответствующими первичными антителами (дополнительная таблица 4).После трех промывок в PBS-T мембраны инкубировали с вторичными антителами, связанными с IRDye. После двух промывок PBS-T и одной промывки PBS флуоресцентные сигналы были обнаружены путем сканирования мембран с помощью системы визуализации Odyssey CLx (LI-COR). Количественный анализ проводился с помощью программного обеспечения LI-COR Image Studio в соответствии с инструкциями дистрибьютора. Соответствующие части полученных изображений были обрезаны, и линейная регулировка уровней яркости и контрастности была применена ко всем обрезанным областям, чтобы оптимизировать визуализацию полос без ущерба для информации исходного изображения.Полное сканирование блотов, использованных для сборки фигур, показано на дополнительном рисунке 7.

Конструирование стабильных клеточных линий

Для конструирования стабильных клеточных линий (конструкции Cdc25C / 14-3-3ɛ для сплит-BioID и BirA * -Ago2 и BirA * -контрольные белки для Ago2 и контрольного BioID, контрольными белками были Rab11a, Lamp1, TGN38, GRASP65, RHD4 и Sec61β), клетки HeLa 11ht, несущие стабильно интегрированную кассету Hygromycin-TK, фланкированную мишенью распознавания флиппазы ( FRT).Конструкции сплит-BioID были сконструированы с каркасом pSF3 ⁵¹ , который также содержит те же самые сайты FRT и, следовательно, совместим с опосредованным Flp-рекомбиназой обменом кассет в клетках HeLa 11ht. Клетки высевали в концентрации 1 × 10 ⁵ клеток на лунку шестилуночного планшета за день до трансфекции, которую проводили с использованием липофектамина 3000 (LifeTechnologies) в соответствии с протоколом производителя (котрансфекция конструкции BirA * и кодирование Flp. плазмида pPGKFLPobpA (addgene 13793)).Клетки переносили в 10-сантиметровую чашку через 24 часа после трансфекции и через 72 часа после трансфекции добавляли 50 мкМ ганцикловира (Sigma), чтобы начать процедуру отбора. Примерно через неделю образовались колонии, которые можно было собирать и размножать. В целом клетки обрабатывали ганцикловиром не менее 3 недель.

BioID

Для каждого условия расщепления BirA * были выполнены три биологических повтора и проанализированы с помощью МС. Кроме того, прогоны BioID были выполнены со стабильными клеточными линиями, экспрессирующими шесть неродственных белков с меткой BirA * (Sec61β, RHD4, GRASP65, TGN38, Lamp1 и Rab11a), эти шесть прогонов использовали в качестве контроля для общей основы метода.От трех до четырех 10-сантиметровых чашек на условие (конструкции Dicer / TNRC6C / Ago2) трансфицировали соответствующими конструкциями сплит-BioID, как описано выше. На следующий день клетки из каждой чашки 10 см переносили в чашки диаметром 15 см в среде, содержащей 50 мкМ биотина и 200 нг / мл доксициклина ^-1 , чтобы вызвать продукцию слитых белков CBirA * и NBirA *. Для стабильных клеточных линий чашки размером 8 × 15 см (конструкции Cdc25 / 14-3-3ɛ) или 2 × 15 см (BirA * -Ago2 и BirA * -контроли) засевали с количеством клеток 2.6 × 10 ⁶ клеток на чашку в среде, содержащей биотин (50 мкМ), и непосредственно индуцированных 200 нг мл ^-1 (конструкции Cdc25 / 14-3-3ɛ) или 25 нг мл ^-1 доксициклина ( BirA * -Ago2 и BirA * -контроли). Через 24 часа после индукции клетки дважды промывали PBS, а затем соскабливали в 1,5 мл PBS. Затем клетки осаждали (1200, г, , 5 мин), мгновенно замораживали в жидком азоте и хранили при -80 ° C. Для лизиса клеток осадки клеток ресуспендировали в 1 мл буфера для лизиса (50 мМ Трис, pH 7.4, 500 мМ NaCl, 0,4% SDS, 5 мМ ЭДТА, 1 мМ DTT, 1 × полный ингибитор протеазы (Roche)) при комнатной температуре, а затем механическое разрушение путем 10 пассажей через иглу 25 G с последующей обработкой ультразвуком (Bioruptor plus sonification device ( Diagenode), четыре цикла с высокой интенсивностью, 30 с на цикл).

После обработки ультразвуком концентрация Triton X-100 была доведена до 2%, а концентрация хлорида натрия — до 150 мМ. Затем лизаты центрифугировали при 4 ° C 16000 г в течение 10 мин. Десять процентов каждого супернатанта сохраняли как исходный материал, а остальную часть инкубировали в равных количествах (3–3.5 мг на образец в зависимости от эксперимента) с 200 мкл Dynabeads MyOne Streptavidin C1 (Invitrogen, каталожный номер 65002) при 4 ° C в течение ночи на вращающемся колесе. Магнитные шарики уравновешивали в течение 10 мин при комнатной температуре в буфере для уравновешивания (50 мМ Трис pH 7–4, 150 мМ NaCl, 0,05% Тритон X-100, 1 мМ DTT) перед использованием. Все этапы промывки выполнялись при комнатной температуре на вращающемся колесе каждый в течение 8 мин. Гранулы промывали четырьмя разными промывочными буферами по два раза каждый. Промывочный буфер 1 (2% SDS в воде), промывочный буфер 2 (50 мМ HEPES pH7.4, 1 мМ EDTA, 500 мМ NaCl, 1% Triton X-100, 0,1% Na-дезоксихолат), промывочный буфер 3 (10 мМ Tris pH 8, 250 мМ LiCl, 1 мМ EDTA, 0,5% NP-40, 0,5% Na-дезоксихолат), промывочный буфер 4 (50 мМ Трис, pH 7,4, 50 мМ NaCl, 0,1% NP-40). Биотинилированные белки элюировали из шариков кипячением их в течение 15 мин при 98 ° C в 30 мкл элюирующего буфера (10 мМ Трис, pH 7,4, 2% SDS, 5% β-меркаптоэтанол, 2 мМ биотина). Затем гранулы немедленно удаляли и образцы хранили при -20 ° C.

Подготовка образцов для MS

Для анализа МС элюированные образцы обрабатывали на 4–20% готовых гелях RunBlue SDS (Expedeon) до тех пор, пока они не переместились на 2–3 см в гель.Всю полосу нарезали после окрашивания коллоидным кумасси бриллиантовым синим G250 (ссылка 63), за исключением полосы стрептавидина. Образцы были отправлены на анализ в отдел протеомики FingerPrints (Университет Данди, Великобритания). Там образцы обрабатывали для расщепления трипсином в течение ночи (16 ч) (Modified Sequencing Grade, Roche). Пептиды экстрагировали из геля и сушили в SpeedVac (Thermo Scientific). Затем пептиды ресуспендировали в 50 мкл 1% муравьиной кислоты, центрифугировали и переносили во флаконы для ВЭЖХ.

Жидкостная хроматография / МС анализ

Образцы загружали (объем впрыска 15 мкл) в систему жидкостной хроматографии Ultimate 3000 RSLCnano (Thermo Scientific, работающая на двух колонках), соединенную с LTQ OrbiTrap Velos Pro (Thermo Scientific). Пептиды сначала улавливали на колонке-ловушке Acclaim PepMap 100 (C18, 100 мкМ × 2 см), а затем разделяли на колонке Acclaim PepMap RSLC C18 (75 мкМ × 50 см) с последующей линией переноса (20 мкМ × 50 см). ), прикрепленный к эмиттеру Easy-Spray (внутренний диаметр 7 мкМ) (Thermo Scientific), к МС через источник Easy-Spray с температурой, установленной на 50 ° C, и напряжением источника 2.5 кВ. Пептиды растворяли в градиенте ацетонитрила в 0,08% муравьиной кислоте, увеличивая процентное содержание ацетонитрила от 2 до 40% в течение 120 минут и до 98% в течение дополнительных 25 минут.

Масс-спектры были получены в режиме зависимости от данных с автоматическим переключением между сканированием МС и МС / МС с использованием метода из топ-15. Полное сканирование МС было выполнено в масс-анализаторе Orbitrap в диапазоне m / z 350–1800 с разрешением 60 000 и целевым значением 10 ⁶ ионов.Фрагментацию пептидов проводили в режиме диссоциации, индуцированной столкновением. Спектры МС / МС были получены с целевым значением 5000 ионов. Порог отбора ионов был установлен на 5000 отсчетов.

Анализ данных MS

Необработанные файлы MS были проанализированы с помощью MaxQuant ⁶⁴ версии 1.5.5.1. Спектры МС / МС искали с помощью встроенной поисковой системы Andromeda по базе данных Uniprot-human (загруженной в марте 2016 г.), в которую были добавлены общие контаминанты и обратные последовательности всех записей.Поиск включал различные модификации окисления метионина, N-концевого ацетилирования и биотинилирования лизина, а также фиксированную модификацию карбамидометилцистеина. Минимальная длина пептида была установлена ​​равной семи аминокислотам, и было допущено максимум два неправильных расщепления. Коэффициент ложного обнаружения (FDR) был установлен на 0,01 для идентификации пептидов и белков. Для сравнения между образцами мы использовали LFQ ⁶⁵ с минимум двумя значениями отношения для определения нормализованной интенсивности белка. Мы активировали опцию «матч между запусками».

Затем данные были обработаны с помощью Perseus версии 1.5.5.3 (ссылка 66). Идентификации из обратной базы данных, общие примеси и белки, идентифицированные только с помощью модифицированного пептида, были удалены. Затем интенсивности без метки логарифмировали (основание 2), а затем образцы группировали в соответствии с повторами с шестью запусками BioID на неродственных белках, определенных как контрольная группа. Для каждого идентифицированного белка требовалось по крайней мере два действительных значения в трех повторностях.После конвейера анализа Персея пустые значения были импортированы случайными числами из нормального распределения для моделирования низких значений численности ниже предела обнаружения прибора. Затем для каждого условия разделения BioID был применен двухвыборочный тест t , основанный на статистике FDR на основе перестановок (250 перестановок; FDR = 0,07; S ₀ = 0,1) для выявления конкретных совпадений по контролю. Чтобы дополнительно отфильтровать данные, мы сохранили результирующие совпадения, у которых медиана LFQ в трех биологических повторностях по крайней мере в два раза выше, чем у образца GFP split-BioID.

Таблицы белков представлены как дополнительные данные 1–3.

Нокдауны

Эксперименты по нокдауну проводили в 96-луночных планшетах с использованием ранее описанных стабильных индуцибельных линий клеток HeLa, коэкспрессирующих контрольный репортер люциферазы светлячка и репортер люциферазы renilla, присоединенный к 3’UTR миРНК-мишени let-7 Hmga2. или его мутант с нарушенными сайтами связывания miRNA ⁵¹ . Трансфекцию проводили с помощью реагента для трансфекции jetPrime (Polyplus Transfection) и 50 нМ GIGYF2 esiRNA (Sigma), 16.67 нМ каждой миРНК TNRC6A, B и C, 16,67 нМ каждого CNOT1, CNOT 7 и 8 или 50 нМ контрольной миРНК (Qiagen, 1027281) в соответствии с протоколом производителя. SiRNA, нацеленная на белки TNRC6 и субъединицы CNOT, была ранее описана ⁵¹ . Через 24 часа после трансфекции среду меняли и нокдаун анализировали через 48 часов после трансфекции с помощью вестерн-блоттинга и анализа люциферазы.

Иммунофлуоресценция

Иммунофлуоресценцию конструкций sBirA * проводили с временно трансфицированными клетками, обнаруживая FLAG- и Myc-tag и биотинилированные белки.Клетки фиксировали 4% формальдегидом в течение 15 минут при комнатной температуре с последующими тремя стадиями промывки PBS каждые 5 минут. Проницаемость проводили с 0,2% Triton X-100 в PBS в течение 20 минут при комнатной температуре. Перед инкубацией первичных антител в течение ночи при 4 ° C клетки блокировали в 5% BSA / 2% козьей сыворотке / 2% ослиной сыворотке в 0,2% Triton X-100 / PBS в течение 1 часа при комнатной температуре. На следующий день клетки промывали 4 раза 0,2% Triton X-100 / PBS в течение 5 мин. Инкубацию со вторичными антителами проводили в течение 2 ч при комнатной температуре с последующими тремя стадиями промывки при 0.2% Triton X-100 / PBS и один с PBS каждые 5 мин. Окрашивание DAPI проводили в течение 20 мин, а затем клетки снова дважды промывали PBS перед фиксацией с помощью Fluoromount-G (Southern Biotech). Антитела и разведения перечислены в дополнительной таблице 4. Снимки были сделаны с объективом × 100 конфокального микроскопа с вращающимся диском Perkin Elmer ERS-6, контролируемого программным обеспечением Velocity в центре визуализации Heidelberg Nikon. Минимальные и максимальные отображаемые значения можно найти в дополнительной таблице 5.Пороговые значения для трансфицированных клеток устанавливали против нетрансфицированных клеток HeLa 11ht для всех изображений IF и дополнительно против клеток, которые не были обработаны первичными антителами (не показаны).

Экспрессия и очистка рекомбинантных белков

GST-меченных фрагментов GIGYF2 и MBP-His ₆ -меченных фрагментов TNRC6C экспрессировали в клетках BL21 (DE3) (New England Biolabs). Клетки выращивали в 500 мл среды LB при 37 ° C до достижения OD ₆₀₀ 0,6. После этого изопропил-β-D-1-тиогалактопиранозид был добавлен до 0.1 мМ для индукции экспрессии белка, и клетки выращивали в течение ночи при 16 ° C. Затем клетки собирали центрифугированием и ресуспендировали в буфере для лизиса (для слияния GST: PBS + 1 мМ DTT, для слияния MBP-His _{6 слияния} : 50 мМ Na ₂ HPO ₄ , pH = 8, 500 мМ NaCl , 20 мМ имидазол, 0,5% Triton X-100, 1 мМ DTT). Клетки лизировали с использованием френч-пресса и обрабатывали для очистки белка. Слитые GST очищали на гранулах, связанных с глутатионом (глутатион-сефароза 4B, GE Healthcare), следуя инструкциям поставщика (промывочный буфер, PBS, 1 мМ DTT; буфер для элюции, 20 мМ Tris pH 8, 150 мМ NaCl, 20 мМ глутатион, 1 мМ. ДТТ).MBP-His _{6 слитых форм} сначала очищали на Ni-NTA-связанных гранулах (Ni-sepharose high performance GE Healthcare) путем инкубации лизатов в течение 1 ч при 4 ° C. Затем следует две стадии промывки промывочным буфером 1 (100 мМ HEPES, pH = 7,4, 500 мМ NaCl, 50 мМ имидазол, 0,5% Triton X-100) и одна стадия промывки буфером 2 (100 мМ HEPES, pH = 7,4, 500 мМ). мМ NaCl, 50 мМ имидазол, 0,1% Тритон Х-100). Элюцию (100 мМ HEPES, pH = 7,4, 200 мМ NaCl, 250 мМ имидазол) проводили в течение 5 мин при 4 ° C. Затем элюированный образец разбавляли в буфере для колонки (50 мМ Трис-HCl, pH = 7.4, 200 мМ NaCl, 1 мМ ЭДТА, 1 мМ DTT), а затем инкубировали с 250 мкл предварительно уравновешенных шариков, связанных с амилозой (смола амилоза, New England Biolabs). Гранулы трижды промывали буфером для колонок и проводили элюирование 0,5 мл буфера для элюирования (буфер для колонки плюс 10 мМ мальтоза).

Анализ связывания in vitro

MBP-CED (WT или AAGL) -His _{6 Фрагменты} и GST-GIGYF2 (600 пмоль каждый) смешивали вместе в 100 мкл связывающего буфера (50 мМ HEPES, pH = 7,4, 150 мМ NaCl, 20 мМ имидазол, 0.05% Triton X-100, 1 мМ DTT) в течение 30 мин при комнатной температуре. Затем к каждой реакции добавляли по 10 мкл шариков, связанных с Ni-NTA, и инкубацию возобновляли в течение 30 мин. Затем шарики пять раз промывали 400 мкл буфера для связывания холода. Связанный материал затем элюировали 50 мкл связывающего буфера, содержащего 250 мМ имидазола.

Люциферазный анализ

После индукции, опосредованной доксициклином, клетки лизировали с использованием цитоплазматического буфера для лизиса (50 мМ трис-HCl, pH 7,4, 150 мМ NaCl, 1 мМ EDTA, pH 8,0.5% НП-40) в течение 20 мин при 4 ° С. Активности FL и RL измеряли в лизатах на люминометре для микропланшетов Xenius XL (SAFAS Monaco) с использованием системы анализа репортеров двойной люциферазы (Promega).

Анализ обогащения ГО

Для анализа обогащения ГО мы использовали приложение VLAD ⁶⁷ с протеомом человека в качестве фона. VLAD использует гипергеометрический тест для определения значимости. Чтобы скорректировать значения P с учетом множественного тестирования, VLAD вычисляет значение q , которое основано на концепции вероятности положительного ложного обнаружения.

Анализ сетей взаимодействия STRING

Для анализа сетей взаимодействия мы использовали STRING v10.0 (ссылка 68) (www.string-db.org), сохраняя параметры по умолчанию.

Статистический анализ

На рис. 9 данные были проверены на нормальность с использованием критерия Шапиро – Уилка. Нулевая гипотеза для этого теста — нормальные данные. Статистическая значимость была рассчитана на основе нормально распределенных данных с использованием двустороннего парного критерия Стьюдента t . Все сравниваемые данные имели одинаковую дисперсию.

Доступность данных

Данные протеомики MS были депонированы в Консорциум ProteomeXchange (http://proteomecentral.proteomexchange.org) через партнерский репозиторий PRIDE ⁶⁹ с идентификатором набора данных PXD005005. Данные, подтверждающие выводы этого исследования, можно получить у соответствующего автора по запросу.

Состав континентальной коры

https://doi.org/10.1016/0016-7037(95)00038-2 Получить права и содержание

Аннотация

Новый расчет состава земной коры основан на пропорциях верхней коры (UC) до кислой нижней коры (FLC) до основной нижней коры (MLC) примерно 1: 0.6: 0,4. Эти пропорции получены из сейсмического профиля рефракции длиной 3000 км через Западную Европу (EGT), включающего 60% старого щита и 40% более молодого складчатого пояса со средней глубиной Мохо около 40 км. Гранодиоритный валовой состав UC по основным элементам и 32 второстепенным и редким элементам был рассчитан по данным Канадского щита (Shaw et al., 1967, 1976). Расчетное содержание тридцати трех дополнительных элементов-примесей в UC основано на следующих пропорциях основных горных единиц, полученных в результате картирования: 14% осадочных пород, 25% гранитов, 20% гранодиоритов, 5% тоналитов, 6% габбро и 30% гранитов. % гнейсов и слюдяных сланцев.Состав FLC и MLC в основных и 36 второстепенных и следовых элементах рассчитан по данным по кислым гранулитовым территориям и основным ксенолитам, соответственно, собранным Рудником и Преспером (1990). Более тридцати дополнительных содержаний микроэлементов в FLC и MLC были рассчитаны или оценены на основе литературных данных.

Основная масса континентальной коры имеет тоналитный, а не диоритовый состав с явно более высокими концентрациями несовместимых элементов, включая изотопы, выделяющие тепло в наших расчетах.Диоритная объемная корка была предложена Тейлором и МакЛеннаном (1985). Количество тоналита в коре требует частичного плавления основных пород мощностью около 100 км (по сравнению с примерно 7 км в нынешнем MLC) и подачи воды из обезвоженных плит и основных интрузий. При относительно низких температурах старых сегментов земной коры MLC частично превратился в эклогит, который можно было повторно использовать в верхней мантии при благоприятных тектонических условиях. Химическое фракционирование UC против FLC + MLC было вызвано гранитоидными частичными расплавами и дегазацией мантии, которая контролировала выветривание и накопление летучих соединений вблизи поверхности Земли.

Рекомендуемые статьи Цитирующие статьи (0)

Полный текст

Авторские права © 1995 Издано Elsevier Ltd.

Рекомендуемые статьи

Цитирование статей

Организация и ее среда на JSTOR

Абстрактный

Совет директоров рассматривается как инструмент для работы с окружающей средой организации. В случайной выборке из восьмидесяти нефинансовых корпораций показано, что элементы размера и состава совета директоров систематически связаны с факторами, измеряющими потребности организации в кооперирующих секторах окружающей среды.Организации, которые больше отклоняются от эмпирически оцененного уравнения оптимальной структуры совета директоров, вероятно, будут работать хуже по сравнению с отраслевыми стандартами.

Информация о журнале

Основанный в 1956 году Джеймсом Томпсоном, ежеквартальный журнал «Административная наука» представляет собой рецензируемый междисциплинарный журнал, публикующий теоретические и эмпирические работы, продвигающие изучение организационного поведения и теории. ASQ публикует статьи, которые вносят вклад в теорию организации из ряда дисциплин, включая организационное поведение и теорию, социологию, психологию и социальную психологию, стратегическое управление, экономику, государственное управление и производственные отношения.ASQ публикует как качественные, так и количественные работы, а также чисто теоретические статьи. Теоретические перспективы и темы в ASQ варьируются от микро до макро, от лабораторных экспериментов по психологии до работы с национальными государствами. Время от времени появляется «Форум ASQ», эссе на особую тему с приглашенными комментариями. Вдумчивые рецензии на книги, относящиеся к исследованиям организаций и теории менеджмента, являются регулярной функцией. Специальные выпуски посвящены качественным методам, организационной культуре, использованию организационных исследований, распределению вознаграждений в организациях и критическим взглядам на организационный контроль.

Информация об издателе

Сара Миллер МакКьюн основала SAGE Publishing в 1965 году для поддержки распространения полезных знаний и просвещения мирового сообщества. SAGE — ведущий международный поставщик инновационного высококачественного контента, ежегодно публикующий более 900 журналов и более 800 новых книг по широкому кругу предметных областей.