Информация о персональном составе педагогических работников каждой реализуемой образовательной программы

1	Абдрахманова Любовь Вениаминовна	Доцент	Иностранный язык	Высшее	Учитель английского и немецкого языков	Кандидат педагогических наук	Без учёного звания	Английский и немецкий языки	1. «Реализация адаптированных программ профессионального образования и профессионального обучения. Вопросы обеспечения доступности объектов и услуг в сфере образования»,06.03.2020, Самара. 2. «Применение инновационных образовательных технологий при преподавании лингвистических дисциплин в техническом вузе», 13.03.2020, Самара. 3. «Использование ЭИОС СамГУПС при реализации программ высшего и дополнительного образования», 14.03.2020, Самара. Английский язык в вузе: современные тенденции в методике преподавания День с Пенни УР Разработка и реализация образовательных программ в соответствии с требованиями образовательных и профессиональных стандартов Реализация основных образовательных программ в современных условиях Технология обучения взрослых 38.03.03. «Управление персоналом» показать все	33 года	12 лет
2	Вострякова Юлия Викторовна	Доцент	Философия	высшее	социолог	Кандидат философских наук	Доцент	социология, философия	1. «Реализация адаптированных программ профессионального образования и профессионального обучения. Вопросы обеспечения доступности объектов и услуг в сфере образования»,06.03.2020, Самара. 2. «Использование ЭИОС СамГУПС при реализации программ высшего и дополнительного образования», 14.03.2020, Самара. Использование возможностей пакета MS Office при подготовке электронных ресурсов учебного назначения Организация учебно-методической и воспитательной работы в университете на основе современных технологий Технология обучения взрослых 38.03.03. «Управление персоналом» показать все	25 лет	26 лет
3	Гарипов Дмитрий Сергеевич	Доцент	Математика	высшее	инженер путей сообщения	Кандидат технических наук	Без учёного звания	Организация перевозок и управление на транспорте	«Реализация адаптированных программ профессионального образования и профессионального обучения. Вопросы обеспечения доступности объектов и услуг в сфере образования» показать все	14 лет	14 лет
4	Глухова Татьяна Георгиевна	Доцент	История	высшее	педагог-психолог, учитель русского языка и литературы	Кандидат психологических наук	Без учёного звания	практическая психологияРусский язык и литература	1. «Реализация адаптированных программ профессионального образования и профессионального обучения. Вопросы обеспечения доступности объектов и услуг в сфере образования»,06.03.2020, Самара. 2. «Использование ЭИОС СамГУПС при реализации программ высшего и дополнительного образования», 14.03.2020, Самара. 3. ««Идеи неопатристического синтеза в современной культуре, теологии, религиозной философии», 20.03.2020, Самара Технология обучения взрослых 38.03.03. «Управление персоналом» показать все	46 лет	38 лет
5	Голубенцов Сергей Леонардович	Старший преподаватель	Элективные курсы по физической культуре и спорту	высшее	учитель физического воспитания	Без ученой степени	Кандидат в мастера спорта	Физическое воспитание	1. «Реализация адаптированных программ профессионального образования и профессионального обучения. Вопросы обеспечения доступности объектов и услуг в сфере образования»,06.03.2020, Самара. 2. «Использование ЭИОС СамГУПС при реализации программ высшего и дополнительного образования», 14.03.2020, Самара. 3. «Инновационные направления системы преподавания физической культуры в вузе», 20.03.2020, Самара. Разработка и реализация образовательных программ в соответствии с требованиями образовательных и профессиональных стандартов Технология обучения взрослых 38.03.03. «Управление персоналом» показать все	32 года	16 лет
6	Зайчикова Татьяна Васильевна	Старший преподаватель (ППС)	Физика	высшее	учитель физики	Без ученой степени	Без учёного звания	Физика	Реализация основных образовательных программ в современных условиях Технология обучения взрослых 38. 03.03. «Управление персоналом» показать все	30 лет	13 лет
7	Игошкин Александр Николаевич	Старший преподаватель	Элективные курсы по физической культуре и спорту	высшее	педагог по физической культуре и спорту	Без ученой степени	Без учёного звания	физическая культура и спорт	1. «Реализация адаптированных программ профессионального образования и профессионального обучения. Вопросы обеспечения доступности объектов и услуг в сфере образования»,06.03.2020, Самара. 2. «Использование ЭИОС СамГУПС при реализации программ высшего и дополнительного образования», 14.03.2020, Самара. 3. «Инновационные направления системы преподавания физической культуры в вузе», 20.03.2020, Самара. Навыки оказания первой помощи Организация учебно-методической и воспитательной работы в университете на основе современных технологий Профессиональный имидж преподавателя Реализация основных образовательных программ в современных условиях Руководители нештатных аварийно-спасательных формирований (НАСФ) Технология обучения взрослых 38.03.03. «Управление персоналом» показать все	18 лет	18 лет
8	Комарова Лидия Александровна	Старший преподаватель	Химия	высшее	врач	Без ученой степени	Без учёного звания	лечебное делопедагог-психолог	Не проходил(а)	5 лет	3 года
9	Кузнецов Владимир Петрович	Доцент	Математика		Физик-преподаватель	Кандидат физико-математических наук	Доцент	Физика	«Реализация адаптированных программ профессионального образования и профессионального обучения. Вопросы обеспечения доступности объектов и услуг в сфере образования» показать все	36 лет	30 лет
10	Липатова Марина Николаевна	Старший преподаватель (ППС)	Информатика	высшее	инженер путей сообщения — строитель	Без ученой степени	Без учёного звания	Строительство железных дорог, путь и путевое хозяйство	«Реализация адаптированных программ профессионального образования и профессионального обучения. Вопросы обеспечения доступности объектов и услуг в сфере образования» показать все	34 года	29 лет
11	Лунева Людмила Петровна	Профессор	Русский язык и культура речи	Высшее	Учитель русского языка и литературы	Доктор педагогических наук	Профессор	Русский язык и литература	1. «Реализация адаптированных программ профессионального образования и профессионального обучения. Вопросы обеспечения доступности объектов и услуг в сфере образования»,06.03.2020, Самара. 2. «Применение инновационных образовательных технологий при преподавании лингвистических дисциплин в техническом вузе», 13.03.2020, Самара. 3. «Использование ЭИОС СамГУПС при реализации программ высшего и дополнительного образования», 14.03.2020, Самара.Инновации в воспитании студенческой молодежи:современные формы и технологии развития общекультурных и профессиональных компетенций обучающихся Реализация основных образовательных программ в современных условиях Технология обучения взрослых 38.03.03. «Управление персоналом» показать все	29 лет	24 года
12	Лысак Елена Анатольевна	Доцент	Материаловедение	высшее	инженер путей сообщения-строитель	Кандидат технических наук	Доцент	Строительство железных дорог, путь и путевое хозяйство	Разработка и реализация образовательных программ в соответствии с требованиями образовательных и профессиональных стандартов Современный подвижной состав железных дорог показать все	29 лет	26 лет
13	Макарова Ирина Сергеевна	Доцент	Информатика; Дополнительные разделы информатики		Механик	Кандидат физико-математических наук	Доцент	Механика	Разработка и реализация образовательных программ в соответствии с требованиями образовательных и профессиональных стандартов Реализация основных образовательных программ в современных условиях Современные тенденции в развитии систем обеспечения движения поездов показать все	35 лет	26 лет
14	Мулюкин Олег Петрович	Профессор	Инженерная и компьютерная графика	высшее	инженер-механик	Доктор технических наук	Профессор	авиационные двигатели	«Реализация адаптированных программ профессионального образования и профессионального обучения. Вопросы обеспечения доступности объектов и услуг в сфере образования» показать все	51 год	27 лет
15	Рудина Татьяна Владимировна	Доцент	Математика	высшее	Математик преподаватель	Кандидат педагогических наук	Без учёного звания	Математика	«Реализация адаптированных программ профессионального образования и профессионального обучения. Вопросы обеспечения доступности объектов и услуг в сфере образования» показать все	28 лет	4 года
16	Сеницкая Галина Борисовна	Доцент	Химия	высшее	химик, преподаватель химии	Кандидат химических наук	Доцент	Химия	Использование возможностей пакета MS Office при подготовке электронных ресурсов учебного назначения Разработка и реализация образовательных программ в соответствии с требованиями образовательных и профессиональных стандартов Технология обучения взрослых 38. 03.03. «Управление персоналом» показать все	43 года	29 лет
17	Судакова Ольга Васильевна	Доцент	Правоведение и политология	высшее	юрист	Кандидат юридических наук	Без учёного звания	Педагогика и психология, юриспруденция	1. «Реализация адаптированных программ профессионального образования и профессионального обучения. Вопросы обеспечения доступности объектов и услуг в сфере образования»,06.03.2020, Самара. 2. «Использование ЭИОС СамГУПС при реализации программ высшего и дополнительного образования», 14.03.2020, Самара. Организация учебно-методической и воспитательной работы в университете на основе современных технологий показать все	28 лет	12 лет
18	Токарев Геннадий Петрович	Доцент	Физика	высшее	инженер-механик	Кандидат технических наук	Доцент	Самолетостроение	Реализация основных образовательных программ в современных условиях Технология обучения взрослых 38. 03.03. «Управление персоналом» показать все	51 год	34 года
19	Чередникова Любовь Васильевна	Старший преподаватель (ППС)	Элективные курсы по физической культуре и спорту	высшее	преподаватель физического воспитания	Без ученой степени	Кандидат в мастера спорта	физическая культура и спорт	1. «Реализация адаптированных программ профессионального образования и профессионального обучения. Вопросы обеспечения доступности объектов и услуг в сфере образования»,06.03.2020, Самара. 2. «Использование ЭИОС СамГУПС при реализации программ высшего и дополнительного образования», 14.03.2020, Самара. 3. «Инновационные направления системы преподавания физической культуры в вузе», 20.03.2020, Самара. Реализация основных образовательных программ в современных условиях Технология адаптивного персонифицированного профессионального образования Технология обучения взрослых 38.03.03. «Управление персоналом» показать все	45 лет	18 лет
20	Чучелина Елена Владимировна	Доцент	Культурология и социология	высшее	психолог, учитель	Кандидат психологических наук	Без учёного звания	психологиябиология и химия	1. «Реализация адаптированных программ профессионального образования и профессионального обучения. Вопросы обеспечения доступности объектов и услуг в сфере образования»,06.03.2020, Самара. 2. «Использование ЭИОС СамГУПС при реализации программ высшего и дополнительного образования», 14.03.2020, Самара. 3. ««Идеи неопатристического синтеза в современной культуре, теологии, религиозной философии», 20.03.2020, Самара Реализация основных образовательных программ в современных условиях Технология обучения взрослых 38.03.03. «Управление персоналом» Технология стресс-менеджмента показать все	28 лет	20 лет
21	Шматов Евгений Николаевич	Доцент	История	высшее	учитель истории и социально-политических дисциплин	Кандидат исторических наук	Доцент	История	1. «Реализация адаптированных программ профессионального образования и профессионального обучения. Вопросы обеспечения доступности объектов и услуг в сфере образования»,06.03.2020, Самара. 2. «Использование ЭИОС СамГУПС при реализации программ высшего и дополнительного образования», 14.03.2020, Самара. 3. «Актуальные проблемы российской истории в современной историографии», 20.03.2020, Самара 4. ««Идеи неопатристического синтеза в современной культуре, теологии, религиозной философии», 20.03.2020, Самара Использование возможностей пакета MS Office при подготовке электронных ресурсов учебного назначения Организация работы ВУЗа по стандартам 3 поколения и функционирование системы менеджмента качества в ОУ Организация учебно-методической и воспитательной работы в университете на основе современных технологий Технология обучения взрослых 38.03.03. «Управление персоналом» показать все	19 лет	18 лет
22	Юсупов Руслан Рифович	Доцент	Физические основы измерений и эталоны	Высшее	Инженер-электрик	Кандидат наук	не имеет		Не проходил(а)	Отсутствует	Отсутствует
23	Яковлев Виктор Михайлович	Доцент	Химия	высшее	преподаватель химии	Кандидат химических наук	Без учёного звания	Химия	Разработка и реализация образовательных программ в соответствии с требованиями образовательных и профессиональных стандартов Реализация основных образовательных программ в современных условиях Технология обучения взрослых 38. 03.03. «Управление персоналом» показать все	41 год	28 лет

Гештальт-подход в работе с ЛГБТ+сообществом, Киев, Украина, специализация – Гештальт Клуб

° Как влияет детский опыт на влечение моих би- и гомосексуальных клиентов?

° Как корректно поддержать человека в поиске его гендерной идентичности?

° Как работать с внутренней транс-, гомофобией клиентов, если я тоже от нее не свободен?

° Может ли травма сформировать сексуальную ориентацию человека?

° Что мне делать со стыдом, недоумением, злостью рядом с ЛГБТ+клиентами?

° Кто может мне помочь, когда я не понимаю, что происходит с моим ЛГБТ+клиентом?

 

Где можно научиться работе с ЛГБТ+сообществом? Где найти специалистов, глубоко разбирающихся в этой проблематике?

 

На нашей специализации!

 

Наша команда тренеров:

 

Стас Дмитриев (А. Товкач) 

основатель программы психологической помощи в одной из ведущих ЛГБТ+организаций Украины,

психолог, работающий с 2012 года в крупнейшей на данный момент Службе психологической помощи ЛГБТ+сообществу в Украине,

аккредитированный гештальт-терапевт, сертифицированный супервизор.

 

Татьяна Зайчикова

кандидат психологических наук, доцент НПУ имени М.П.Драгоманова,

преподаватель курсов «Гендерная психология и психология пола», «Психотерапия сексуального поведения и сексуальных расстройств в парах и семьях» (с разделом о  работе с лгбт+ сообществом)

действительный тренер ВОПП ГП «УГИ», «МГИ»

 

Наша команда экспертов — профессионалы, специализирующиеся на работе с ЛГБТ+сообществом:

психиатр, гинеколог, эндокринолог, юрист, также другие специалисты, чье участие будет приятным сюрпризом для вас

 

Мы ждем вас, если вы:

 

• студент 1, 2 ступени гештальт программ 

• практикующий гештальт-терапевт, который работает или планирует работать с ЛГБТ+сообществом, и:

 

~ не знаете какие инструменты гештальт-терапии могут понадобиться и как их использовать на практике.

~ хотите изучить теорию, из которой эта практика строилась ~ обнаружили, что некоторые ваши представления ограничивают вас в работе не только с ЛГБТ+, но и другими «ненормативными» клиентами и хотите расширить свое восприятие

~ вам важно быть корректным с клиентом, но вы не уверены в своих знаниях терминологии, этических норм. Боитесь сказать что-то не так и теряете свою спонтанность.

~ У вас есть много базовых вопросов о сексуальности, идентичности и устройстве жизни ЛГБТ+людей, которые вы стесняйтесь задавать. Вы считаете их «детскими» или «глупыми»

~ переживаете эмоциональные сложности рядом с ЛГБТ+клиентами и вам важно понять их причину, а потом вашу потребность, стоящую за этим.

~ вам недостает знаний по сексологии о развитии и реализации сексуальности би- , гомосексуаьных и трансгенделрных людей

~ вы интересуетесь процессом формирования идентичности, особенно «негативной» и практическими аспектами работы с ней

~ ваш клиент относиться к «+» в аббревиатуре ЛГБТ. ..КИА: человек с интерсекс-вариациями, человек с небинарным гендеромчеловек аромантичного и/или асексуального спектра

~ вас ставит в тупик феномен трансгендерности

~ вы хотите исследовать собственную сексуальность и гендерную идентичность

• студент 3 ступени, а также работающий супервизор, и:

~ ваш супервизант ставит вас в тупик запросами о своих ЛГБТ+клиентах

 ~ в ваших группах и проектах участвуют ЛГБТ+клиенты и их участие вызывает у вас, у группы или самого клиента сложности

~ вы ведете или планируете вести группы, проекты для и про ЛГБТ+людей и хотите разобраться со всеми нюансами, особенно если проект рассчитан на людей из нескольких групп.

  А если вы:

• студент психологического факультета 

• психолог или психотерапевт, работающий в другом направлении, то:

ВСЕ ВЫШЕПЕРЕЧИСЛЕННОЕ ТОЖЕ К ВАМ ОТНОСИТСЯ!

Не бойтесь незнакомого вам направления. Мы поможем перевести язык гештальта на язык, понятный для вас.

 

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ПРОГРАММЫ:

1. Современные тенденции в психотерапии: отказ от теорий, патологизирующих вариативность гендерной и сексуальной идентичности.                                                21-23 декабря 2020                     12:00-19:00

2. Этапы развития гендерной и сексуальной идентичности (с рождения до препубертата).                                                                                                                             15-17 февраля 2021 (онлайн).                 15:00-22:00

3. Этапы развития гендерной и сексуальной идентичности (пубертат). Гештальт-терапия ЛГБТ+подростков.                                                                                                             12-14 апреля 2021.                      12:00-19:00

4. Специфические аспекты гештальт-терапии взрослых ЛГБ+людей.                                                                                                                                                                                 21-23 июня 2021.                        12:00-19:00

5.Гештальт-терапия в работе со взрослыми трансгендерными и интерсекс-людьми.                                                                                                                                                     13-15 сентября 2021.                  12:00-19:00

6. Клиент-терапевтические отношения в психотерапии ЛГБТ+людей:                                                                                                                                                                            29 ноября — 1 декабря 2021

7. Сертификационная сессия

ДЛИТЕЛЬНОСТЬ: 180 часов (6 модулей по 3 дня), 7-й модуль сертификационный и супервизорский. Занятия проходят в виде тематических модулей по будним дням 12:00-19:00, раз в 2 месяца.

Стоимость — эквивалент 140€ за трехдневку.

Заполните форму для предварительной регистрации в которой вы можете задать вопросы касательно специализации, подтверждения регистрации и оплаты, и мы свяжемся с вами удобным для вас способом.

Для подтверждения регистрации на курс необходимо внести 50% предоплаты за трехдневку.

Закончив нашу специализацию, вы получите:

~ Достоверные современные научные знания о гендере и сексуальности

~ Эффективные практические гештальт-методики работы со сложными запросами ЛГБТ+клиентов

~ Твердую опору на компетентных тренеров, а по окончании курса — на себя и полученные знания

~ Простые и понятные этические правила 

~ Обнаружите и присвоите очень ценный ресурс — собственную идентичность и сексуальность во всей ее полноте и проявлениях.

~ Включенность в коллегиальное сообщество, поддержку, общность опыта.

~ Сертификат об окончании специализации ВОПП ГП УГИ и все необходимые часы в зачетку.

Контакты ведущих:

 Стас Дмитриев (Товкач А.): (только сообщения)

Viber: +380936131211,

Telegram :@Nusllik,

Skype: nusia.tovkach

________________________________________________

Зайчикова Татьяна:

+38-066-251-30-01 (только смс)

________________________________________________

Версия для слабовидящих | Федеральное дорожное агентство

Ведомственные награды отличившимся работникам дорожной отрасли вручили в Росавтодоре

24 декабря 2021, 14:38

Роман Новиков поблагодарил присутствующих за высокий профессионализм и продуктивность в работе в 2021 году.     

«На сегодняшний день нами и коллективами федеральных казенных учреждений, а также командами региональных проектных офисов все показатели 2021 года выполнены. Это результаты общего труда: выполнение программ дорожных работ и тех задач, которые перед нами ставит Правительство страны и Президент. Мы успешно реализуем национальный проект «Безопасные качественные дороги» и все федеральные программы, которые связаны с нашей деятельностью», – отметил глава Росавтодора.

За достигнутые успехи, личный вклад в развитие дорожного хозяйства благодарность Министра транспорта Российской Федерации объявлена

БЕЛЯКОВУ Петру Михайловичу – начальнику отдела транспортной безопасности на объектах дорожного хозяйства Управления транспортной безопасности Федерального дорожного агентства

ЗАБРОДИНОЙ Евгении Владимировне – главному специалисту-эксперту отдела организации подготовки территории строительства Управления земельно-имущественных отношений Федерального дорожного агентства

Благодарственным письмом министра транспорта Российской Федерации поощрена

ГОЛОВИНА Марина Анатольевна – заместитель начальника отдела организации подготовки проектной документации Управления строительства автомобильных дорог Федерального дорожного агентства

За активное взаимодействие с подразделениями Госавтоинспекции по вопросам обеспечения безопасности дорожного движения благодарность начальника ГУОБДД МВД России объявлена 

КУРУГЛИЕВУ Фариду Магомедкеримовичу – советнику отдела организации дорожного движения Управления эксплуатации автомобильных дорог Федерального дорожного агентства

СОСИКУ Алексею Александровичу – заместителю начальника Управления строительства автомобильных дорог Федерального дорожного агентства

За добросовестный труд, безупречную и эффективную гражданскую службу почетной грамотой Федерального дорожного агентства награждены 

ВАСИН Александр Викторович – консультант отдела транспортной безопасности на автомобильном транспорте Управления транспортной безопасности Федерального дорожного агентства

ИЛЬИН Александр Владимирович – заместитель начальника отдела судебно-правового обеспечения и правовой экспертизы Управления административно-кадровой работы и правового обеспечения Федерального дорожного агентства

ПЛЕВАКО Наталья Васильевна – советник отдела судебно-правового обеспечения и правовой экспертизы Управления административно-кадровой работы и правового обеспечения Федерального дорожного агентства

СТАДНИЧУК Александр Вячеславович – заместитель начальника отдела транспортной безопасности на объектах дорожного хозяйства Управления транспортной безопасности Федерального дорожного агентства

За достигнутые успехи, личный вклад в развитие дорожного хозяйства благодарностью руководителя Федерального дорожного агентства поощрены 

БУБНОВ Кирилл Александрович – главный специалист-эксперт отдела организации строительства автомобильных дорог Управления строительства автомобильных дорог Федерального дорожного агентства

ВОЛЫНОВА Марина Петровна – ведущий специалист-эксперт отдела организации подготовки территории строительства Управления земельно-имущественных отношений Федерального дорожного агентства

КРУТИКОВА Ольга Всеволодовна – главный специалист-эксперт отдела земельных отношений Управления земельно-имущественных отношений Федерального дорожного агентства

КУРАПОВА Мария Сергеевна – заместитель начальника отдела проектной деятельности и реализации национального проекта Управления регионального развития и реализации национального проекта Федерального дорожного агентства

СУЛТАНОВ Даниль Ильдарович – ведущий специалист-эксперт отдела организации ремонта и содержания дорог и сооружений Управления эксплуатации автомобильных дорог Федерального дорожного агентства

За эффективное и добросовестное выполнение работы при подготовке и проведении комплексной мобилизационной тренировки под руководством Президента Российской Федерации благодарственным письмом Федерального дорожного агентства поощрены 

АНАНИН Александр Анатольевич – ведущий консультант отдела мобилизационной подготовки дорожного хозяйства Управления транспортной безопасности Федерального дорожного агентства

ГЛАЗКОВ Дмитрий Михайлович – заместитель начальника отдела информационного и хозяйственного обеспечения Управления научно-технических исследований, информационных технологий и хозяйственного обеспечения Федерального дорожного агентства

ЗАЙЧИКОВА Татьяна Евгеньевна – советник отдела организации исполнения бюджета и внутреннего финансового контроля Финансово-экономического управления Федерального дорожного агентства

КИРЕЕВА Евгения Николаевна – советник отдела планирования текущих расходов подведомственных организаций Финансово-экономического управления Федерального дорожного агентства

ШПАГИН Максим Владимирович – заместитель начальника отдела региональных проектов государственно-частного партнерства и международного сотрудничества Управления регионального развития и реализации национального проекта Федерального дорожного агентства

За достигнутые успехи, личный вклад в развитие дорожного хозяйства благодарственным письмом Федерального дорожного агентства поощрены 

МАСЛЕННИКОВА Наталья Григорьевна – заместитель начальника отдела ФКУ «Дороги России»

ПЫСИНА Ирина Андреевна – главный специалист-эксперт отдела организации подготовки проектной документации Управления строительства автомобильных дорог Федерального дорожного агентства

ЦУНАЕВА Анна Михайловна – эксперт дорожного хозяйства отдела методологии регионального развития ФКУ «Дороги России»

ЧЕРКЕСОВ Ибрагим Султанович – эксперт дорожного хозяйства отдела ФКУ «Дороги России»

Учитель начальных классов из Волоколамска получила сертификат социальной ипотеки

Губернатор Московской области Андрей Воробьёв вручил сертификат социальной ипотеки Татьяне Зайчиковой, учителю младших классов Волоколамской начальной школы № 6.

15 июля губернатор Московской области Андрей Воробьев вручил сертификаты двенадцати педагогам на жилье в рамках программы «Социальная ипотека». В этом году приобрести квартиры на особых льготных условиях смогут учителя начальных классов, математики, литературы, английского и русского языков из Власихи, Волоколамска, Дубны, Дмитрова, Лобни, Мытищ, Чехова, Электростали и Ленинского м.р.

За три года в Подмосковье выданы сертификаты «Социальной ипотеки» 119 педагогическим работникам, в том числе приехавшим из других регионов. В 2019 сертификаты на приобретение жилья получат 50 учителей, 20 молодых учителей и 20 воспитателей. С этого года программа расширена: в ней также участвуют учителя биологии, физики и молодые учителя в возрасте до 35 лет.

Программа «Социальная ипотека» реализуется по инициативе губернатора Московской области с 2016 года и финансируется за счет регионального бюджета. Она рассчитана на врачей, учителей, молодых ученых, уникальных специалистов, тренеров. Механизм реализации «Социальной ипотеки» следующий: 50% от стоимости жилья выдается в виде единовременной субсидии, остальные 50% возвращаются в виде ежемесячных платежей в счет погашения суммы основного долга. Сам участник в течение 10 лет оплачивает только проценты по кредиту. За все время реализации программы  ее участниками стали свыше 1300 тысяч специалистов.

В этом году в Подмосковье запланировано выдать 360 сертификатов на социальную ипотеку.

Губернатор Московской области Андрей Воробьёв.

«Программа социальной ипотеки в Подмосковье будет продлена на следующие 3 года. Более того, мы ее увеличиваем: если в этом году у нас 90 учителей получат субсидии на жилье, то в следующем — уже 110. Также эта программа будет по-прежнему действовать и для других специалистов.

Я хотел бы поблагодарить всех педагогов, которые добросовестно, качественно отработали прошедший учебный год».

ТАТЬЯНА Зайчикова, учитель младших классов ВНОШ №6

— В конкурсе я участвовала еще в прошлом году, но по ряду причин не прошла. Так как мне давно хотелось улучшить свои жилищные условия, я решила попытать удачи и в этому году. Собрала необходимую документацию, портфолио и отправила на проверку в министерство образования Московской области. Через какое-то время, проверив предоставленные документы, мне сообщили, что я прошла на второй этап. Затем пригласили на собеседование, которое каждый проходил лично. Сертификат мне выдали через месяц. Сейчас дело за выбором жилья. На это тоже свои сроки — три месяца.

Я считаю, что эта программа очень выгодна для молодых специалистов, ведь накопить на собственное жилье в наше время практически нереально. А по программе социальной ипотеки, 50 процентов первоначального взноса начисляет Министерство образования МО, а вторую половину я буду вносить сама. Но и мой личный взнос мне также компенсируют областной субсидией в размере пятидесяти процентов от моего вклада.

Одно из важных условий получения социальной ипотеки для учителей: проработать в школе Подмосковья 10 лет.

 

Ольга БУРАКОВА, начальник Управления системой образования Волоколамского района:

— Сертификат на социальную ипотеку получила учитель начальных классов Волоколамской начальной школы 6 Татьяна Зайчикова. Отбор кандидатов очень сложен и строг. Последний этап — собеседование с представителями Министерства образования области, профсоюза, педагогической общественности. Татьяна Михайловна достойно прошла все ступени отбора и теперь, благодаря программе соципотеки, сможет приобрести жильё в кредит, причём сумма основного долга будет погашена за счёт бюджета Московской области. Программа работает уже несколько лет. Волоколамские педагоги участвовали в ней и ранее, но сертификат получили впервые.

 

 

 

Источник: http://involokolamsk.ru/novosti/obrazovanie/uchitel-nachalnyh-klassov-iz-volokolamska-poluchila-sertifikat-socialnoy-ipoteki

База жителей Москвы 2022 Номер телефона Адрес по фамилии Поиск людей Найти человека База Интервеб interweb

Поиск людей  2022

Москва

Первые пять цифр номера 43283

Абуков Бийсолтан Шахсолтанович 1962 60 лет
Абуков Роман Бийсолтанович 1987 34 года
Абукова Ольга Тимофеевна 1956 65 лет
Агапова Таисия Григорьевна 1945 76 лет
Агафонов Алексей Владимирович 1973 48 лет
Агуреев Вячеслав Викторович 1939 82 года
Адмаева Вера Михайловна 1958 63 года
Азарьянц Стелла Валерьевна 1964 57 лет
Аксенова Александра Сергеевна 1926 96 лет
Алхасова Татьяна Ароновна 1990 32 года
Аниканова Евгения Мартыновна 1940 82 года
Аниканова Евдокия Мартыновна 1940 82 года
Анохин Алексей Викторович 2001 20 лет
Анохина Елена Константиновна 1969 53 года
Ахмад Сулейман Юсеф 1960 62 года
Ахмад Сулейман Юсеф
Бегунова Мария Николаевна 1921 101 год
Бекташянц Арусяк Мирзаджановна 1922 99 лет
Бекташянц Георгий Леонович 1920 102 года
Бекташянц Сергей Георгиевич 1948 74 года
Белозеров Михаил Юрьевич 1955 66 лет
Белозерова Наталья Борисовна 1981 40 лет
Белозерова Наталья Михайловна 1981 40 лет
Блинкова Надежда Сергеевна
Божокин Алексей Васильевич 1962 60 лет
Божокин Михаил Алексеевич 1996 26 лет
Божокин Павел Алексеевич 1994 28 лет
Божокина Татьяна Николаевна 1968 53 года
Войцеховская Юдифь Александровна 1922 99 лет
Войцеховский Александр Алексан
Войцеховский Александр Александрович 1923 98 лет
Войцеховский Владимир Александрович 1949 73 года
Волнов Дмитрий Николаевич 1980 41 год
Волнов Николай Иванович 1948 73 года
Галактионов Станислав Никитич 1934 87 лет
Гарбко Владимир Николаевич 1949 73 года
Герасимов Игорь Сергеевич 1988 33 года
Герасимов Сергей Николаевич 1964 58 лет
Голышева Валентина Васильевна 1935 87 лет
Грачева Надежда Федоровна 1946 76 лет
Гришанов Вадим Валентинович 1961 60 лет
Гришанова Диана Вадимовна 1983 39 лет
Гришанова Наталья Петровна 1959 62 года
Гулиева Сабина Арифовна
Гусева Римма Григорьевна 1948 73 года
Гусева Татьяна Васильевна 1918 104 года
Данилин Александр Викторович 1962 59 лет
Данилин Иван Александрович 1991 30 лет
Данилин Иван Александрович 1991 30 лет
Данилин Кирилл Александрович 1990 32 года
Данилин Константин Алексеевич 1990 32 года
Данилина Наталия Владимировна 1967 54 года
Данилова Любовь Сафроновна
Дмитриева Екатерина Геннадьевна 1973 49 лет
Дмитриева Наталья Геннадьевна 1980 41 год
Дмитриева Татьяна Юрьевна 1949 73 года
Домахина Нина Михайловна 1928 93 года
Ез Джихдттин Тин 1940 81 год
Екин Сергей Игоревич 1997 25 лет
Елесина Зинаида Николаевна 1932 89 лет
Еркин Игорь Николаевич 1970 51 год
Ефремова Ольга Семеновна 1969 53 года
Железнова Раиса Григорьевна 1921 100 лет
Жуков Вячеслав Семенович 1949 72 года
Жукова Марина Валентиновна 1953 69 лет
Зайчиков Алексей Иванович 1957 64 года
Зайчиков Вячеслав Алексеевич 1984 37 лет
Зайчикова Марина Алексеевна 1986 36 лет
Зайчикова Татьяна Александровна 1961 60 лет
Знаева Надежда Андреевна
Зуев Николай Васильевич 1921 101 год
Зуева Нина Ивановна 1925 96 лет
Иванов Альберт Николаевич 1932 89 лет
Иванов Дмитрий Эдуардович 1969 53 года
Иванова Алла Альбертовна 1957 64 года
Иванова Антонина Парфеновна 1931 91 год
Ионов Владимир Сергеевич 1929 92 года
Ионова Валентина Александровна 1933 88 лет
Керимова Мелания Гулджановна
Киреанова Неля Минабутдиновна 1958 63 года
Кирсанова Анна Александровна 1982 39 лет
Кирсанова Неля Минабутдиновна 1958 63 года
Кирьяков Игорь Николаевич 1971 51 год
Кожевникова Маргарита Александровна 1921 100 лет
Коновалов Евгений Валентинович 1965 56 лет
Кориневская Ирина Викторовна 1943 78 лет
Корнева Зинаида Семеновна 1937 84 года
Красильникова Алла Юрьевна
Кузина Анна Ивановна 1928 94 года
Кузнецов Борис Викторович 1947 75 лет
Кулиев Георгий Вагифович 1984 37 лет
Кулиева Ирина Сергеевна 1962 59 лет
Лаврик Татьяна Олеговна 1990 31 год
Леонова Надежда Сергеевна
Логунова Майя Александровна 1931 91 год
Лоева Нина Дмитриевна 1998 24 года
Ломакина Татьяна Васильевна 1949 72 года
Лопатин Сергей Юрьевич
Лукьянов Владимир Александрович 1942 80 лет
Лукьянова Елена Александровна
Малаховская Екатрина Михайловна 1987 35 лет
Мамлина Матильда Марковна 1917 105 лет
Маркин Алексей Егорович 1990 31 год
Маркин Вячеслав Павлович 1930 91 год
Маркин Эдуард Александрович 1934 88 лет
Маркина Елена Вячеславовна 1958 63 года
Маркина Ирина Александровна
Марков Александр Всеволодович 1952 69 лет
Маркова Елена Михайловна 1978 43 года
Маркова Ольга Александровна 1979 42 года
Маркова Татьяна Владимировна 1952 69 лет
Маркова Юлия Игоревна 1999 23 года
Марудина Наталья Александровна
Матасов Антон Михайлович 1955 66 лет
Матасова Антонина Антоновна 1986 35 лет
Матасова Ирина Федоровна 1954 67 лет
Матасова Людмила Антоновна 1985 36 лет
Матова Александра Ивановна 1902 119 лет
Матросов Михаил Иванович 1955 66 лет
Мельникова Олеся Владимировна 1978 43 года
Меркулова Галина Сергеевна 1938 84 года
Мосин Виктор Васильевич 1953 68 лет
Мосин Дмитрий Викторович 1978 43 года
Мосин Олег Иванович 1974 48 лет
Мошатина Серафима Ивановна 1923 98 лет
Мухин Михаил Тимофеевич 1984 37 лет
Мухин Тимофей Михайлович 1950 71 год
Мухина Ольга Михайловна 1952 69 лет
Мущерова Лидия Ивановна 1938 83 года
Мясоедов Алексей Николаевич 1965 56 лет
Мясоедова Светлана Алексеевна 1985 36 лет
Мясоедова Ярослава Альбертовна 1965 56 лет
Невретдинов Харис Вагапович 1957 64 года
Неклюдова Раиса Ивановна 1935 86 лет
Николаев Анатолий Николаевич 1931 90 лет
Осколков Сергей Владимирович 1975 46 лет
Осмоловская Марина Владимировна 1958 63 года
Павлова Ираида Григорьевна 1935 87 лет
Павлюков Юрий Николаевич 1945 76 лет
Павлюкова Елена Юрьевна 1970 51 год
Панов Владимир Алексеевич 1986 36 лет
Панова Ирина Владимировна 1957 64 года
Панова Людмила Владимировна 1953 68 лет
Панова Мария Ивановна 1931 91 год
Панчук Марина Петровна 1949 72 года
Парекуннель Алиса Абрахамовна 1972 49 лет
Пачулия Вахтанг Вахтангович 1964 57 лет
Петросян Георгий Александрович 2000 21 год
Пинчук Александр Евгеньевич 1997 24 года
Пинчук Евгений Иларионович 1946 75 лет
Пинчук Марина Петровна 1949 72 года
Платонов Евгений Александрович 1938 83 года
Платонова Зоя Владимировна 1934 87 лет
Платонова Ольга Евгеньевна 1973 49 лет
Попов Валентин Семенович 1935 86 лет
Попов Николай Семенович 1940 81 год
Поросятникова Анастасия Григорьевна 1925 96 лет
Прибытковская Евгения Петровна 1917 105 лет
Прибытковский Владимир Адамович 1915 106 лет
Прокопчук Владимир Дмитриевич 1949 73 года
Прокопчук Лидия Михайловна 1948 73 года
Прокопчук Михаил Владимирович 1979 42 года
Прокофьев Александр Владимирович 1974 48 лет
Разумов Михаил Васильевич 1953 68 лет
Романов Вячеслав Владимирович
Роснадзе Анна Гивиевна 1982 39 лет
Рузеев Хасан Кадирович 1940 82 года
Рузеева Валентина Кузьминична 1939 82 года
Рыбникова Мария Иосифовна 1931 91 год
Рыжов Андрей Сергеевич 1962 59 лет
Рыжов Федор Андреевич 1999 22 года
Рыжова Ольга Сергеевна 1984 38 лет
Рязанов Сергей Васильевич 1968 54 года
Рязанова Анастасия Сергеевна 1995 26 лет
Рязанова Вера Юрьевна 1975 47 лет
Самохин Александр Николаевич 1974 47 лет
Самохина Анастасия Александровна 1997 24 года
Сапронов Александр Леонидович 1992 29 лет
Сапронов Леонид Александрович 1960 61 год
Сапронова Валентина Николаевна 1964 57 лет
Семенов Виктор Николаевич
Семикин Антон Васильевич 1978 43 года
Семикин Василий Васильевич 1949 72 года
Семикина Кристина Васильевна 1985 36 лет
Семикина Светлана Геннадиевна 1953 68 лет
Скляров Валентин Родионович 1951 70 лет
Смиренский Олег Валерьевич 1959 62 года
Смирнов Андрей Петрович 1948 74 года
Смирнова Елена Константиновна 1909 113 года
Смирнова Татьяна Андреевна 1987 34 года
Сократов Анатолий Васильевич 1944 77 лет
Соломина Федор Аркадьевич 1965 57 лет
Степина Анна Андреевна 1985 36 лет
Струль Белла Робертовна 1959 62 года
Сурская Анастасия Анатольевна 1985 36 лет
Сурская Светлана Викторовна 1962 59 лет
Сурский Анатолий Дмитриевич 1957 64 года
Ткачева Ирина Витальевна 1988 33 года
Трегубов Александр Анатольевич 1982 39 лет
Трегубов Анатолий Владимирович 1957 64 года
Трегубова Нина Леонидовна 1958 63 года
Трегубова Ольга Анатольевна 1987 34 года
Тритенко Игорь Александрович 1975 47 лет
Трушутин Андрей Викторович 1972 49 лет
Трушутина Галина Ульяновна 1951 70 лет
Усацких Любовь Викторовна 1970 51 год
Фалюкова Татьяна Валентиновна 1955 66 лет
Федулкин Валерий Николаевич 1959 63 года
Федулкин Денис Валерьевич 1981 40 лет
Федулкин Денис Федорович 1981 40 лет
Федулкина Валентина Борисовна 1953 68 лет
Филиппова Надежда Фердинандовна 1931 91 год
Филюков Валерий Викторович 1955 66 лет
Филюкова Елена Валерьевна 1982 40 лет
Филюкова Татьяна Валентиновна 1955 66 лет
Фипюков Валерий Викторович 1955 66 лет
Фролова Анастасия Павловна 1936 85 лет
Фролова Зоя Петровна 1944 77 лет
Хайскайа Билеим Нум 1969 52 года
Холявкина Татьяна Николаевна 1961 61 год
Хохлов Петр Леонидович 1959 62 года
Хохлов Петр Леонтьевич 1959 63 года
Хохлова Надежда Николаевна 1930 91 год
Хребтович Владимир Иванович 1946 76 лет
Хребтович Галина Александровна 1954 67 лет
Хренникова Надежда Михайловна 1915 106 лет
Худобин Юрий Александрович 1936 85 лет
Худобин Юрий Александрович 1936 86 лет
Худобина Надежда Юрьевна 1970 51 год
Худобина Тамара Ивановна 1940 81 год
Чайванов Владимир Александрович 1967 54 года
Чайванова Елена Алексеевна 1972 50 лет
Чайванова Наталья Владимировна 1989 33 года
Чарикова Елена Ивановна 1942 80 лет
Черникова Валентина Сергеевна 1950 72 года
Чечина Марина Михайловна 1981 41 год
Шейх Жанна Владимировна 1963 58 лет
Шибанов Виктор Геннадьевич 1957 64 года
Шибанова Алена Викторовна 1985 36 лет
Шибанова Виктория Викторовна 1983 38 лет
Шибанова Елена Анатольевна 1957 65 лет
Шишкина Валентина Ивановна 1954 67 лет
Шишкина Ольга Викторовна 1979 42 года
Юшин Геннадий Петрович 1938 83 года
Яблочкин Денис Керимович 1998 24 года
Яблочкина Наталья Михайловна 1950 71 год
Якобсон Людмила Алексеевна 1938 84 года
Якобсон Максим Семенович 1974 48 лет
Якобсон Семен Яковлевич 1936 85 лет
Якутина Елена Владимировна

собственники, учредители, руководство, реквизиты (ИНН 7703605980)

21. 20.2	Производство материалов, используемых в медицинских целях
41,2	Строительство жилых и нежилых зданий
43.12	Подготовка места
43.34.1	Живопись
46,1	Оптовая торговля за вознаграждение или на договорной основе
46.15	Деятельность агентов по оптовой торговле мебелью, предметами домашнего обихода, скобяными изделиями, ножами и прочими металлическими изделиями
46.18.1	Деятельность агентов, специализирующихся на оптовой торговле фармацевтической продукцией, продукцией для медицинских целей, парфюмерно-косметической продукцией, включая мыло, и чистящими средствами
46,3	Оптовая торговля пищевыми продуктами, напитками и табачными изделиями
46.45	Оптовая торговля парфюмерией и косметикой
46,46	Оптовая торговля фармацевтическими товарами
46. 46.1	Оптовая торговля фармацевтическими товарами
46,9	Оптовая неспециализированная торговля
47,2	Розничная торговля пищевыми продуктами, напитками и табачными изделиями в специализированных магазинах
47,25	Розничная торговля напитками в специализированных магазинах
47.5	Розничная торговля прочими предметами домашнего обихода в специализированных магазинах
47,74	Розничная торговля изделиями медицинского назначения, ортопедическими изделиями в специализированных магазинах
47,75	Розничная торговля косметикой и средствами личной гигиены в специализированных магазинах
47,8	Розничная торговля на нестационарных торговых объектах и ​​рынках
47.9	Розничная торговля вне магазинов, палаток или рынков
52. 10	Складирование и хранение
52,2	Вспомогательная деятельность по транспортировке
52,24	Обработка грузов
52,29	Другая вспомогательная транспортная деятельность
56.10	Предоставление продуктов питания и напитков
56.10.1	Деятельность ресторанов и кафе с полным ресторанным обслуживанием, столовых, ресторанов быстрого питания и ресторанов самообслуживания
56.10.3	Деятельность ресторанов и баров по обеспечению питанием в железнодорожных вагонах-ресторанах и на судах
64,1	Денежное посредничество
64,91	Деятельность по финансовой аренде (лизинг/субаренда)
64.92	Предоставление займов и других видов кредита
64. 92.1	Деятельность по потребительскому кредитованию
64.92.3	Деятельность по предоставлению кредитов наличными под залог недвижимости
64.99.1	Вложения в ценные бумаги
66.12.2	Деятельность по управлению ценными бумагами
68,1	Купля-продажа собственного недвижимого имущества
68.10	Купля-продажа собственного недвижимого имущества
68,20	Аренда и управление собственным или арендованным недвижимым имуществом
68,3	Операции с недвижимым имуществом за вознаграждение или на договорной основе
68,31	Деятельность агентств недвижимости за вознаграждение или на договорной основе
68,32	Управление недвижимостью за вознаграждение или на договорной основе
69	Деятельность в области права и бухгалтерского учета
69. 10	Деятельность в области права
73.11	Рекламные агентства
79,1	Деятельность туристических агентств и туроператоров
86	Деятельность в области здравоохранения
86.10	Больничная деятельность
86.21	Общая врачебная практика
86,23	Стоматологическая практика
86.90.1	Организации санитарно-эпидемиологической службы
86.90.4	Санаторно-курортные организации
86.90.9	Прочая деятельность в области медицины, не включенная в другие группировки
96.02	Парикмахерские и другие косметические услуги

собственники, учредители, руководство, реквизиты (ИНН 7715585537)

21. 1	Производство фармацевтических субстанций
21.10	Производство фармацевтических субстанций
21.20	Производство лекарственных средств и материалов, используемых в медицинских целях
21.20.1	Производство лекарств
21.20.2	Производство материалов, используемых в медицинских целях
46.18.1	Деятельность агентов, специализирующихся на оптовой торговле фармацевтической продукцией, продукцией для медицинских целей, парфюмерно-косметической продукцией, включая мыло, и чистящими средствами
46.3	Оптовая торговля пищевыми продуктами, напитками и табачными изделиями
46,45	Оптовая торговля парфюмерией и косметикой
46,46	Оптовая торговля фармацевтическими товарами
46. 46.1	Оптовая торговля фармацевтическими товарами
46,90	Оптовая неспециализированная торговля
47,1	Розничная торговля в неспециализированных магазинах
47.2	Розничная торговля пищевыми продуктами, напитками и табачными изделиями в специализированных магазинах
47,7	Розничная торговля прочими товарами в специализированных магазинах
47,74	Розничная торговля изделиями медицинского назначения, ортопедическими изделиями в специализированных магазинах
47,75	Розничная торговля косметикой и средствами личной гигиены в специализированных магазинах
64,91	Деятельность по финансовой аренде (лизинг/субаренда)
64.92	Предоставление займов и других видов кредита
64. 92.3	Деятельность по предоставлению кредитов наличными под залог недвижимости
64.99.1	Вложения в ценные бумаги
66.12.2	Деятельность по управлению ценными бумагами
68,1	Купля-продажа собственного недвижимого имущества
68.10	Купля-продажа собственного недвижимого имущества
68.20	Аренда и управление собственным или арендованным недвижимым имуществом
68,3	Операции с недвижимым имуществом за вознаграждение или на договорной основе
68,32	Управление недвижимостью за вознаграждение или на договорной основе
86	Деятельность в области здравоохранения
86.10	Больничная деятельность
86.21	Общая врачебная практика
86. 23	Стоматологическая практика
86.90.1	Организации санитарно-эпидемиологической службы
86.90.4	Санаторно-курортные организации
86.90.9	Прочая деятельность в области медицины, не включенная в другие группировки

Генетические полиморфизмы и функциональные свойства и возможность их использования для генотипирования

Марина В.Зайчикова

В равной степени в этой работе участвовали: Марина Владимировна Зайчикова, Наталья Васильевна Захаревич

Институт общей генетики им. Вавилова РАН, Москва, Россия, Научно-исследовательский центр биотехнологии антибиотиков «БИОАН», Москва, Россия

Наталья Васильевна Захаревич

В равной степени в этой работе участвовали: Марина Владимировна Зайчикова, Наталья В.Захаревич

Принадлежность Институт общей генетики им. Вавилова РАН, Москва, Россия

Мария Олеговна Сагайдак

Институт общей генетики им. Вавилова РАН, Москва, Россия, Государственный университет, Московский физико-технический институт, Москва, Россия

Надежда Александровна Боголюбова

Принадлежность Институт общей генетики им. Вавилова РАН, Москва, Россия

Татьяна Г.Смирнова

Принадлежность Центральный научно-исследовательский институт туберкулеза, Москва, Россия

Софья Николаевна Андреевская

Принадлежность Центральный научно-исследовательский институт туберкулеза, Москва, Россия

Елена Евгеньевна Ларионова

Принадлежность Центральный научно-исследовательский институт туберкулеза, Москва, Россия

Мария Георгиевна Алексеева

Принадлежность Институт общей генетики им. Вавилова РАН, Москва, Россия

Лариса Н.Черноусова

Принадлежность Центральный научно-исследовательский институт туберкулеза, Москва, Россия

Валерий Николаевич Даниленко

* E-mail: [email protected]

Институт общей генетики им. Вавилова РАН, Москва, Россия, Научно-исследовательский центр биотехнологии антибиотиков «БИОАН», Москва, Россия

Авторы заявили, что не существует никаких конкурирующих интересов.

Задумали и спроектировали эксперименты: МВЗ ВНД. Выполняли опыты: МВЗ НВЗ МОС НАБ МГА. Проанализированы данные: МВЗ НВЗ ВНД. Предоставленные реагенты/материалы/инструменты для анализа: TGS SNA EEL LNC. Написал статью: МВЗ НВЗ МГА ВНД.

Полногеномный транскрипционный ответ Mycobacterium smegmatis MC 2 155 на G-квадруплексные лиганды BRACO-19 и TMPyP4

doi: 10. 3389/fmicb.2022.817024. Электронная коллекция 2022.Егор Шитиков ¹ , Дмитрий Беспятых ¹ , Майя Малахова ¹ , Юлия Беспятых ¹ , Иван Бодоев ¹ , Татьяна Ведехина ¹ , Зайчикова Марина ¹ , Владимир Веселовский ¹ , Ксения Климина ¹ , Елена Ильина ¹ , Анна Варижук ¹

Принадлежности Расширять

принадлежность

• ¹ Федеральный научно-клинический центр физико-химической медицины Федерального медико-биологического агентства, Москва, Россия.

Бесплатная статья ЧВК

Элемент в буфере обмена

Егор Шитиков и др. Фронт микробиол. 2022 .

Бесплатная статья ЧВК Показать детали Показать варианты

Показать варианты

Формат АннотацияPubMedPMID

дои: 10.3389/fmicb.2022.817024. Электронная коллекция 2022.

Авторы

Егор Шитиков ¹ , Дмитрий Беспятых ¹ , Майя Малахова ¹ , Юлия Беспятых ¹ , Иван Бодоев ¹ , Татьяна Ведехина ¹ , Зайчикова Марина ¹ , Владимир Веселовский ¹ , Ксения Климина ¹ , Елена Ильина ¹ , Анна Варижук ¹

принадлежность

• ¹ Федеральный научно-клинический центр физико-химической медицины Федерального медико-биологического агентства, Москва, Россия.

Элемент в буфере обмена

Полнотекстовые ссылки Параметры отображения цитирования

Показать варианты

Формат АннотацияPubMedPMID

Абстрактный

G-квадруплексы (G4) представляют собой неканонические структуры ДНК, которые можно рассматривать в качестве потенциальных терапевтических мишеней для антимикробных соединений, также известных как G4-стабилизирующие лиганды.Хотя показано, что некоторые из этих лигандов in vitro обладают стабилизирующим эффектом, точный механизм антибактериального действия полностью не исследован. Здесь мы использовали полногеномное секвенирование РНК для анализа реакции Mycobacterium smegmatis на ингибирующие концентрации лигандов BRACO-19 и TMPyP4 G4. Профиль экспрессии изменился (FDR < 0,05, log ₂ FC > |1|) для 822 (515↑; 307↓) генов у M. smegmatis в ответ на BRACO-19 и для 680 (339↑; 341↓ ) генов в ответ на TMPyP4.Однако анализ не выявил значительных индуцированных лигандом изменений в уровнях экспрессии генов, несущих G4, генов под промоторами, содержащими G4, или межгенных областей, расположенных на мРНК-подобных или матричных цепях. В то же время для лиганда BRACO-19 нами обнаружены существенные изменения в генах систем репликации и репарации, а также в генах метаболизма железа, что, несомненно, свидетельствует о индуцированном стрессе. Для соединения TMPyP4 были обнаружены существенные изменения в факторах транскрипции и системе биосинтеза аргинина, что может свидетельствовать о наличии множественных биологических мишеней для этого соединения.

Ключевые слова: БРАКО-19; Г4; РНК; ТМПуП4; лиганды; микобактерии; транскриптом.

Copyright © 2022 Шитиков, Беспятых, Малахова, Беспятых, Бодоев, Ведехина, Зайчикова, Веселовский, Климина, Ильина и Варижук.

Заявление о конфликте интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Цифры

Рисунок 1

Различия в транскрипции между BRACO-19 и…

Рисунок 1

Различия в транскрипции между BRACO-19 и TMPyP4, обработанными образцами Mycobacterium smegmatis . (А) , МДС…

фигура 1

Различия в транскрипции между BRACO-19 и TMPyP4, обработанными образцами Mycobacterium smegmatis . (A) , график MDS корреляции уровней экспрессии генов трех повторных образцов (обозначенных разными цветами) в трех различных условиях; (B) , Диаграммы Венна, показывающие гены, совместно регулируемые присутствием соединений BRACO-19 и TMPyP4, как определено с помощью RNA-seq.

Рисунок 2

Не было статистически значимых…

Рисунок 2

Не выявлено статистически значимых различий в уровнях экспрессии генов, содержащих G4…

фигура 2

Не было статистически значимых различий в уровнях экспрессии генов, содержащих мотивы G4, между контрольными и обработанными образцами. (A) . Коробчатая диаграмма, показывающая вариабельность экспрессии связанных с G4 генов между контролем (зеленый), при воздействии BRACO-19 (желтый) и при воздействии TMPyP4 (синий). В рамке показаны верхний и нижний квартили, а линия внутри рамки показывает медиану. Белая точка указывает среднее значение. Точки над усами указывают на выбросы. Двусторонний критерий суммы рангов Уилкоксона с поправкой на непрерывность использовали для расчета значений p ; (B) , диаграмма, показывающая изменение экспрессии (log ₂ FC) совместно регулируемых генов ( n  = 191), наблюдаемое с помощью секвенирования РНК M.smegmatis MC ² 155 подвергались воздействию лигандов BRACO-19 и TMPyP4. В рамке показаны верхний и нижний квартили, а линия внутри рамки показывает медиану. Белая точка указывает среднее значение. Двусторонний критерий суммы рангов Уилкоксона с коррекцией на непрерывность использовали для расчета значений p .

Рисунок 3

Состав

BRACO-19 воздействует на M. смегматис…

Рисунок 3

Соединение BRACO-19 влияет на M. smegmatis MC ² 155 метаболизм железа. Сюжет вулкана указывает…

Рисунок 3

Соединение BRACO-19 влияет на M. smegmatis MC ² 155 метаболизм железа.График вулкана показывает распределение ДЭГ для M. smegmatis MC ² 155, подвергшихся воздействию лиганда BRACO-19. Логарифм преобразованных кратных изменений (log ₂ FC) нанесен на ось x , а значимость (-log ₁₀ FDR) нанесен на ось y . Цвета обозначают гены, участвующие в метаболизме железа, со значительно повышенным уровнем экспрессии (FDR < 0,05, log ₂ FC > |1|).

использованная литература

1. 1. Альманн-Эльце К. , Патил И. (2021). ggsignif: скобки значимости для «ggplot2». Доступно по адресу: https://CRAN.R-project.org/package=ggsignif (по состоянию на июнь 2021 г.).
2. 1. Обри А., Марк Фишер Л., Ярлиер В., Камбау Э. (2006). Первая функциональная характеристика однократно выраженной бактериальной топоизомеразы II типа: фермент из микобактерий туберкулеза. Биохим. Биофиз. Рез. коммун. 348, 158–165. дои: 10.1016/J.BBRC.2006.07.017, PMID: — DOI — пабмед
3. 1. Бартас М., Чутова М. , Бразда В., Каура П., Штястны Ю., Коломазник Ю. и др. . (2019). Наличие и локализация образующих G-квадруплекс последовательностей в домене бактерий. Молекулы 24:1711. doi: 10.3390/MOLECULES240, PMID: — DOI — ЧВК — пабмед
4. 1. Бодуэн Дж.-Д., Жодоин Р., Перро Ж.-П. (2014). Новая система подсчета очков для определения укладки G-квадруплекса РНК. Нуклеиновые Кислоты Res. 42, 1209–1223. doi: 10.1093/NAR/GKT904, PMID: — DOI — ЧВК — пабмед
5. 1. Бельмонте-Реш Э. , Моралес Дж. К. (2020). Измельчитель G4-iM: когда размер и частота имеют значение. Инструмент поиска и анализа структур G-Quadruplex, i-motif и более высокого порядка. НАР Геном. Биоинформ. 2: lqz005. doi: 10.1093/NARGAB/LQZ005, PMID: — DOI — ЧВК — пабмед

Показать все 66 ссылок

Род Asarum L.: Фитохимический и этнофармакологический обзор

Pubmed Style Анцышкина А. М., Арс Ю.В., Боков Д.О., Позднякова Н.А., Простодушева Т.В., Зайчикова С.Г. СРП. 2020; 11(5): 472-502. doi:10.31838/srp.2020.5.66 Web Style Анцышкина А.М., Арс Ю.В., Боков Д.О., Позднякова Н.А., Простодушева Т.В., Зайчикова С.Г. Род Asarum L.: фитохимический и этнофармакологический обзор.http://www.sysrevpharm.org/?mno=111893 [Доступ: 29 марта 2021 г.]. doi: 10.31838/srp.2020.5.66 AMA (Американская медицинская ассоциация), стиль Анцышкина А.М., Арс Ю.В., Боков Д.О., Позднякова Н.А., Простодушева Т.В., Зайчикова С.Г. Род Asarum L.: фитохимический и этнофармакологический обзор. СРЦ . 2020; 11(5): 472-502. doi: 10.31838/srp.2020.5.66 Ванкувер/ICMJE Style Анцышкина А.М., Арс Ю.В., Боков Д.О., Позднякова Н.А., Простодушева Т.В., Зайчикова С.Г. Род Asarum L.: фитохимический и этнофармакологический обзор. СРП. (2020), [по состоянию на 29 марта 2021 г.]; 11(5): 472-502. doi: 10.31838/srp.2020. 5.66 Гарвардский стиль Анцышкина А.М., Арс Ю.В., Боков Д.О., Позднякова Н.А., Простодушева Т.В., Зайчикова С.Г. (2020) Род Asarum L.: фитохимический и этнофармакологический обзор. СРП , 11 (5), 472-502. doi: 10.31838/srp.2020.5,66 Турабийский стиль Анцышкина А.М., Арс Ю.В., Боков Д.О., Позднякова Н.А., Простодушева Т.В., Зайчикова С.Г. 2020. Род Asarum L.: фитохимический и этнофармакологический обзор. Систематические обзоры в фармации , 11 (5), 472-502. doi: 10.31838/srp.2020.5.66 Стиль Чикаго Анцышкина А.М., Арс Ю.В., Боков Д.О., Позднякова Н.А., Простодушева Т.В., Зайчикова С.Г.. «Род Asarum L.: Фитохимический и этнофармакологический обзор.» Систематические обзоры в фармации  11 (2020), 472-502. doi:10.31838/srp.2020.5.66 MLA (Ассоциация современного языка) Стиль Анцышкина А.М., Арс Ю.В., Боков Д.О., Позднякова Н.А., Простодушева Т.В. , Зайчикова С.Г. «Род Asarum L.: фитохимический и этнофармакологический обзор». Систематические обзоры в фармации  11.5 (2020), 472–502. Распечатать. doi: 10.31838/srp.2020.5.66 Стиль APA (Американская психологическая ассоциация) Анцышкина А.М., Арс Ю.В., Боков Д.О., Позднякова Н.А., Простодушева Т.В., Зайчикова С.Г. (2020) Род Asarum L.: фитохимический и этнофармакологический обзор. Систематические обзоры в фармации , 11 (5), 472-502. doi: 10.31838/srp.2020.5.66

Конформационные изменения в тяжелой цепи ингибитора интер-α-трипсина 4 активируют его опухолеспецифическую активность у мышей с меланомой B16

Введение

Предыдущее исследование, проведенное нашей группой, продемонстрировало изменения в гликозилировании белков сыворотки у мышей с опухолями (1).Однако не удалось установить связь между различными N-связанными олигосахаридами остатки и опухоли животных или онкологических больных (1–3). Другое предыдущее исследование, проведенное нашей группой, показало, что серпин α-антитрипсин из сыворотки крови ингибирует или блокирует рост опухоли (4). Вопрос, который вытекает из этих исследований, как белки в сыворотке крови мышей с опухолями, а также в сыворотке крови мышей без опухолей приобретают опухолеассоциированную биологическую активность. Известно, что сыворотка крови опухоленосных животных содержит определенный фактор что специально ускоряет рост опухоли (2,5).Однако все попытки идентифицировать этот фактор как новый белок в сыворотки крови животных с опухолями оказались безуспешными. (5,6). Был достигнут значительный прогресс к всестороннему профилированию экспрессии белка и многочисленным были идентифицированы кандидаты в биомаркеры; однако ни один из было доказано, что биомаркеры полезны для пациентов с раком (7). Поэтому необходимо идентифицировать эти факторы через их биологические активность в естественных условиях. Вышеупомянутый N-сцепленный остатки олигосахаридов входят в состав белковых молекул. Изменения в эти остатки [в предыдущем исследовании нашей группы они стали короче (4)], вероятно, приведут к конформационные изменения белковой молекулы. может поэтому предположить, что изменения в гликозилировании белков происходят в чтобы изменить конформацию белковой молекулы (8,9). Конформационные изменения белка приводят к изменению его биологическая активность. В организмах, демонстрирующих опухолевой рост, нет новых в сыворотке крови обнаружены белки по сравнению с таковыми в неопухолевые организмы; это может быть связано с существующими белками претерпевают конформационные изменения, приводящие к активации их опухолеассоциированная активность (10).

Наиболее информативным методом изучения белков является протеомный анализ. Этот анализ включает, в частности, протеолиз белков. Известно, что некоторые протеолитические ферменты имеют специфические сайты расщепления. Эти сайты должны выполнять следующие требования: Они должны содержать определенные аминокислот, и, кроме того, эти сайты должны быть доступны для их специфическими ферментами расщепления. Если протеолиз белка выделен из сыворотки мыши-опухоленосителя и сыворотки тот же белок, выделенный из сыворотки мыши без опухоли, приводит к в продуктах указано, что этот белок имеет дифференциальную конформация между мышью с опухолью и мышью без опухоли.Однако до недавнего времени полная денатурация белка перед протеомным анализом для лучшей доступности трипсин. После полной денатурации белков дифференциальная конформация, ожидается, что они будут иметь одинаковую доступность трипсина и продуктов трипсинолиза этих денатурированные белки были бы идентичными, поэтому не обнаруживая никаких Информация о различиях в конформации белков. Этот гипотеза объясняет, почему протеомные исследования никогда не сообщали о каких-либо опухолеспецифические изменения белков сыворотки крови.

Триптическое расщепление в мягких условиях испытывающий; следовательно, для получения достаточного количества пептида ионов необходимо использовать «семитрипсиновый» анализ (11,12). Это повышает качество и надежность идентификации белков и позволяет идентифицировать белок структуры, включая различные посттрансляционные модификации.

Целью настоящего исследования было изучение гипотеза о том, что 1) опухолеспецифическая активность белков может быть связанные с изменением их нативной конформации, т.е.г., из-за изменения их гликозилирования и 2) можно определить изменение нативной конформации за счет продуктов протеолиза белок в мягких условиях. Полутриптические пептидные ионы были изучена и биологическая активность альбумина и тяжелая цепь 4 ингибитора интер-альфа-трипсина (ITIh5) в неопухолевых Оценивали мышей C57Bl/6 и мышей с меланомой B16. ITIh5 белок является членом суперсемейства серпинов (13).

Материалы и методы

Опухоли и эксперименты на животных

клеток меланомы В16 были получены из банка опухолевые штаммы Н.Российский онкологический научный центр им. Н. Блохина (Москва, Россия). Клетки меланомы были пересажены подкожно. для получения солидных опухолей правой задней конечности мышей C57Bl/6 (1×106 клеток/мышь, разведенных в 200 мкл RPMI-1640 Средняя; ПанЭхо, Москва, Россия). Эксперименты проводились с использованием в общей сложности 250 самцов C57Bl/6 и F1 в возрасте от 2 до 3 месяцев. (C57Bl/6xCBA/Lac) мыши (22–24 г), полученные от компании «Столбовая». (Москва, Россия). Мыши получали стандартную лабораторную диету и водопроводной воды ad libitum и содержались под естественным цикл свет/темнота.Все опыты проводились в соответствии с руководящие принципы Национального института здравоохранения (14), правовые нормы для животных эксперименты в России, и исследование было одобрено этическим комитета Института экспериментальной диагностики и терапии Опухоли РОНЦ им. Н. Н. Блохина (Москва, ул. Россия). Кровь брали по протоколу, описанному Фишер и др. (5).

Индуктивное действие сывороточного белка на рост опухоли

Для определения влияния белков сыворотки крови, фракции белков сыворотки вводили внутрибрюшинно здоровые мыши (100 мкг/мышь в 400 мкл 0.9% NaCl решение; PanEcho) за две недели до трансплантации опухоли. Каждый группа включала 10 животных.

Белки сыворотки

Белки сыворотки крови были собраны у здоровых и от мышей с опухолями. Сыворотка от мышей с опухолью B16 была собранные через 30 дней после инъекции опухолевых клеток. Белки сыворотки были разделение на фракции с помощью ультрафильтрационных мембран (Миллипор, Биллерика, Массачусетс, США) под давлением воздуха с номинальным предел молекулярной массы 300 кДа [PBMK04310; номинальная молекулярная предел массы тела (NMWL), 300 000] (фракция 1), 100 кДа (PBHK; NMWL, 100 000) (фракция 2) или 50 кДа (PBQK; NMWL, 50 000) (фракция 3).Белки фракции-3 разводили в 0,01 М трис-буфере (pH 7,4, 0,01% азида натрия) и переносили на колонки ПД-10. (Amersham Biosciences, GE Healthcare, Литтл Чалфонт, Великобритания) (4). Белки наносили на Колонки Sepharose Q FF и Sepharose Blue FF (XK 16/20; GE Здравоохранение). Несвязанные белки сыворотки элюировали 0,01 М Трис. буфер (pH 7,4, содержащий 0,01% азида натрия; Sigma-Aldrich, St. Louis, Миссури, США), в то время как связанные белки элюировали с помощью градиент хлорида натрия (0. 5 М, 0,01 М Трис-буфер, рН 7,4, с 0,01% азида натрия; Sigma-Aldrich) (10) с помощью программируемого градиентный насос (Pharmacia Biotech, GE Healthcare). Элюирование белка контролировали в проточной ячейке (SN 20257; 2 мм; GE Healthcare) при λ=280 нм. Образцы, содержащие альбумин и серпины, были собраны и анализировали с помощью спектрофотометра с диодной матрицей HP 8452A. (Agilent Technologies, Санта-Клара, Калифорния, США) измерение значение поглощения при λ=280 нм. В дальнейшем белки были внутрибрюшинно вводят по 100 мкг/мышь в 400 мкл 0.9% раствор NaCl здоровым мышам. Через 14 дней, 1×106 опухолевых клеток меланомы В16 трансплантировали в этим мышам подкожно. В каждую группу входило по 10 животных.

Белковый гель-электрофорез

образцов Serpin разделяли с помощью 12,5% SDS-PAGE и окраска кумасси синим (Sigma-Aldrich) по Лэммли (15). Образцы, подвергнутые SDS-PAGE солюбилизировали в буфере для образцов (Sigma-Aldrich). содержит 63 мМ Трис/HCl, pH 6,8, 10% (об./об. ) глицерина, 2% (вес./об.) SDS и 30 М бромфенолового синего (Sigma-Aldrich).2-меркаптоэтанол 5% (v/v) (Sigma-Aldrich) был условно добавлен или опущен в буфер образцов. 12,5% акриламидные гели с использовали соотношение бисакриламид/акриламид 0,8:30. Образцы были применяется в количестве 10 и 50 мкг белка/полосу для оценить все компоненты белковых комплексов. Белковый гель электрофорез использовали для определения массы ITIh5 с опухолеспецифической активностью.

Оценка связывания альбумина с использованием электронный спиновой резонанс (ЭПР)

Для каждого образца было измерено

спектров ЭПР с использованием коммерчески доступный спектрометр ЭПР (AXM-09; ESR-Analyzer/MMS; MedInnovation GmbH, Берлин, Германия).Принцип этого методика заключается в измерении переменных связывания альбумина, достигаемых с помощью спинового зонда жирных кислот. Связывающие переменные спинового зонда были определены при различных перестановках этанола концентрация, а также соотношение спинового зонда и альбумина концентрация. Изменение концентрации этанола разрешено для оценка переменных связывания спинового зонда с альбумином в различных гидрофобных условиях. Изменения в соотношении спиновой зонд к альбумину позволил измерить связывание сродство альбумина к спиновому зонду.

Коммерческая 16-доксилстеариновая кислота (Sigma-Aldrich) была используется в качестве спинового зонда. Это соединение было выбрано из-за исключительно высокая константа связывания альбумина со стеариновой кислотой (6,9×107 л/моль), что обеспечивает >99,9% связывания спин-зонд к альбумину. Этанол особо чистый (Merck Millipore) был используется для изменения сродства связывания спина жирной кислоты зонд на альбумин. Конечные концентрации этанола (моль/л) и спинового зонда (10–3 моль/л) – 2,9 и 0,83 в аликвоте 1, 3.4 и 1.61 в аликвоте 2 и 3,8 и 2,34 в аликвоте 3, соответственно (16).

Масс-спектрометрия

Для масс-спектрометрического анализа образцы белка использовали только после очистки с использованием колонок Sephadex Q FF. Белки разводили в 50 мМ растворе бикарбоната аммония и переносили на колонки PD-10 (W359685; GE Healthcare). Финал концентрация белков в образцах составляла 1 мг/мл. Исключительно после колоночной хроматографии без электрофореза образцы инкубировали при 37°С в 100 мкл 20 мМ аммиака бикарбонат, содержащий 5 нг/мкл трипсина, химотрипсина и 10% ацетонитрила на ночь (все от Sigma-Aldrich).Пептиды были концентрированный с использованием картриджей SEP-PAK C18 (Millipore).

Масс-спектры были записаны с использованием Ultraflex Масс-спектрометр Extreme MALDI-TOF/TOF (Bruker Daltonics, Биллерика, Массачусетс, США), оснащенный неодимовым лазером. Анализировать масс-спектры, программное обеспечение FlexAnalysis, версия 3.3 (Bruker Daltonics, Бремен, Германия). Аликвоты образцов смешивали на стальную мишень раствором 2,5-дигидроксибензойной кислоты (20 мг/мл) в 30% (об./об.) ацетонитриле (Sigma-Aldrich) с 0.5% (об./об.) трифторуксусная кислота. Молекулярные ионы [MH]+ были анализируют в линейном (белки) или рефлекторном (пептиды) режиме, а Отношения m/z были точными до 30 частей на миллион. Спектры фрагментарных ионов были полученные в режиме Lift с точностью определения массы лучше 1 Да. В смесях пептидов использовали пептиды, расщепленные протеазами. То данные обрабатывали с помощью программного обеспечения Flex Analysis 2.2 (Bruker Daltonics), и пики фрагментов трипсина, содержащиеся в образцах использовались для калибровки. Следующие параметры поиска были использовано: Точность определения массы = 100 ppm, база данных NCBInr, Таксон Rodentia (грызуны), одно пропущенное дробление и, возможно, окисление метионина.Белки идентифицировали с помощью Mascot. ПО для поиска версии 2.2.07 (опция пептидного отпечатка пальца); http://www.matrixscience.com). То поиск проводился в базах данных NCBI и/или EST позвоночных. Для поиска белков-кандидатов в комбинированных данных мс + (мс-мс) Использовали Biotools версии 3.0 (Bruker Daltonics). Если значение параметр Score, рассчитанный для каждого белка, превысил 70, идентификация была признана достоверной.

Статистический анализ

Статистическая оценка проводилась с использованием критерия Фишера. точный критерий или критерий Стьюдента.Данные представлены как среднее значение ± стандартное отклонение и Microsoft Office Excel (14.0.6112.5000) программное обеспечение использовалось для статистического анализа. Р<0,05 был Считается, что это указывает на статистически значимое различие между значениями.

Результаты

Мыши без опухолей и мыши с B16 меланома имеет дифференциальные протеолитические фрагменты сыворотки альбумин

С помощью колоночной хроматографии фракция соответствующий альбумину, был выделен из сыворотки крови мышей без опухолей и сыворотки крови мышей с меланомой В16.Последующий протеомный анализ идентифицировал сывороточный предшественник альбумина в двух случаях (рис. 1А и Б). Таким образом, альбумин, выделенный из мышей с опухолью, обладает та же аминокислотная последовательность, что и у альбумина, экстрагированного из неопухолевого мышей.

Кроме того, данные, представленные на рис. 1А и Б, показывают, что протеолитические анализ альбумина у мышей без опухолей выявил большую количество ионов полутриптического пептида по сравнению с таковым у мышей с Меланома В16 (64 против 15 пептидов соответственно). Обычные мыши и у больных меланомой B16 было семь общих пептидов и восемь пептиды обнаружены исключительно у мышей с меланомой В16 (табл. I и II). Однако ряд пептидов которые частично или полностью выявлены у мышей с меланомой В16 перекрываются со значительным количеством пептидов, идентифицированных в мышей без опухолей. Это привело к увеличению числа идентифицированных пептидов у мышей без опухолей по сравнению с мышами с B16 меланома (табл. III).

Таблица I Полутриптические пептиды альбумина идентифицированы у мышей с опухолями и у мышей без опухолей.

Таблица I

Полутриптические пептиды альбумина идентифицированы у мышей с опухолями и у мышей без опухолей.

97784 7774126 97744126 439-452 45-57 243-257 4 25-57

Меланома B16 (m/z пептид-ион)	Мыши без опухолей (m/z иона пептида)	Аминокислоты (Начало)
777. 3831	199-205
1149.6602	1149.6265	66-75
1250.6354		+1250,5844 35-44
	+1439,8602 1439.7895
	1479,9253 1479,8529
	1681,9364 1681,8677
3870. 3227	3869.8416	25-57

0

Таблица II Полупептические пептиды альбумина идентифицированы только у мышей с опухолями.

Таблица II

Полутриптические пептиды альбумина идентифицированы только у мышей с опухолями.

Ион пептида (м/з)	Аминокислоты (Начало-конец)
	960,4622 484-490
	1019,6167 234-242
	1272,6371 211-221
	1902,0049 153-168
2711. 6178	35-57
2982,4342	563-588
3369,7339	559-588
342,693	410-438

В таблице III Перекрывающиеся пептиды альбумина в у мышей с опухолями и у мышей без опухолей.

Таблица III

Перекрывающиеся пептиды альбумина в у мышей с опухолями и у мышей без опухолей.

Животные	Ион пептида (m/z)	Начало-конец	Аминокислота последовательность
Меланома B16	2711,6178	35–57	R. YNDLGEQHFKGLVLIAFSQYLQK.C
Мыши без опухолей	1725.8446	24–37	R.REAHKSEIAHRYND.L
Мыши без опухолей	989.4819	29–36	K.SEIAHRYN.D

4 3369. 6769

Mice	1406.7102	34-44	H.RYNDLGEQHFK.G
Mice
37-65	N.DLGEQHFKGLVLIAFSQYLQKCSYDEHAK.L +2 дезамидированный (NQ)
Мыши без опухолей	2982,5004	45–70	К.ГЛВЛИАФСКЙЛЬККСЙДЕХАКЛВКЕВ.Т + дезамидированные (NQ)
Мыши без опухолей	984,497	50–57	I.AFSQYLQK.C
Мыши без опухолей	1918. 8436	50–65	I.AFSQYLQKCSYDEHAK.L + deamidated (nq)
B16 Melanoma	1272.6371	2112221	K.ekalvssvrqr.m
Mice
90.8889	211-225	K.ekalvssvrqrmkcs.ss + цистеинил (C)
Мыши без опухолей	2123. 9409	218–233	S.VRQRMKCSSMQKFGER.А + 2 дезамидированные (NQ)
Мыши без опухолей	1681,8677	243–257	R.LSQTFPNADFAEITK.L
Меланома B16	1681.9364	243–257	R.LSQTFPNADFAEITK.L
Мыши без опухолей	808.4006	243–249	R. LSQTFPN.A + 2 дезамидированный (NQ)
Мыши без опухолей	894,4789	250–257	N.ADFAEITK.L
Меланома B16	3420.693	410–438	K.NLVKTNCDLYEKLGEYGFQNAILVRYTQK.A
Без опухолей мыши	3086,5296	414–438	K.TNCDLYEKLGEYGFQNAILVRYTQK.A + Деамидированный (NQ)
Без опухолей мыши	3267,5911	414–441	К. TNCDLYEKLGEYGFQNAILVRYTQKAPQ.V +5 дезамидированный (NQ)
Без опухолей мыши	1901,9604	419–434	Л.YEKLGEYGFQNAILVR.Y + 2 дезамидированных (NQ)
Без опухолей мыши	1703.8686	425–438	E.YGFQNAILVRYTQK.A + 3 дезамидированные (NQ)
Без опухолей мыши	962,5168	427–434	G.FQNAILVR.Y + 2 дезамидированный (NQ)
Без опухолей мыши	3110,6117	435–462	R.YTQKAPQVSTPTLVEARNLGRVGTKCC.T + цистеинил (C)
Без опухолей мыши	1439.7895	439–452	K.APQVSTPTLVEAAR.N
Меланома B16	1439.8602	439–452	K.APQVSTPTLVEAAR.N
Без опухолей мыши	3241,6137	440–469	A.PQVSTPTLVEAARNLGRVGTKCCTLPEDQR.L + 2 дезамидированный (NQ)
Без опухолей мыши	2846,3625	445–469	T.PTLVEAARNLGRVGTKCCTLPEDQR.L + цистеинил (С)
Меланома B16	3369.7339	559–588	K.HKPKATAEQLKTVMDDFAQFLDTCCKAADK. Д + окисление (М)
Меланома В16	2982.4342	563–588	K.ATAEQLKTVMDDFAQFLDTCCKAADK. Д + цистеинил (C)
Без опухолей мыши	3232,5635	560–588	H.KPKATAEQLKTVMDDFAQFLDTCCKAADK. Д + окисление (М)
Без опухолей мыши	761,3758	563–569	K.ATAEQLK.T + дезамидированный (NQ)
Без опухолей мыши	1552.6675	572–584	V.MDDFAQFLDTCCK.A + окисление (М)
Без опухолей мыши	2285.0967	584–604	C.KAADKDTCFSTEGPNLVTRCK.D + дезамидированный (NQ)

У мышей без опухолей было идентифицировано семь пептидов. частично перекрываться с таковыми, идентифицированными у мышей с B16 меланомы в отношении аминокислотных последовательностей 35–57 и отношение m/z 2711,6178, и два пептида были идентифицированы как частично перекрываются в отношении их аминокислотных последовательностей в 211–221 и отношение m/z 1,272.6371. Кроме того, при отсутствии опухолей мышей было идентифицировано два пептида, которые частично перекрываются с обнаружены у мышей с меланомой B16 в отношении их аминокислот последовательности 243–257 и отношение m/z 1681,9364. В свободном от опухоли мышей было идентифицировано шесть пептидов, частично или полностью перекрываются с таковыми у мышей с меланомой B16 по их аминокислотному составу. последовательности 410–438 и m / z 3420,693. Кроме того, в мышей без опухолей, два пептида были идентифицированы как частично перекрывающиеся с пептидами от мышей с меланомой В16 в их аминокислотной последовательности 439–452 и отношение m/z 1439.8602 и 1 439,7895. Наконец, у мышей без опухолей были обнаружены четыре пептида. идентифицировано частичное или полное перекрытие с двумя пептидами у мышей с меланомой В16 относительно аминокислотных последовательностей 559–588 с отношение m/z 3 369,7339 и 563–588 с отношением m/z 2982,4342. Большое количество и разнообразие продуктов протеолиза белков сыворотки от мышей без опухолей по сравнению с белками от мышей с меланомой В16, указывает на подвижность этих специфических области в первом и жесткость тех же частей молекула в последнем.Увеличение жесткости альбумина молекулы при росте опухоли может быть связано с образованием поперечные связи внутри молекулы. Этот процесс может быть аналогичен трансформация фибрина с образованием внутренних поперечных связей (17). Этот процесс может создавать белки в животные с опухолями более ригидны по сравнению с животными без опухолей животных и приводит к уменьшению количества протеолиза продукты.

Мыши без опухолей и мыши с B16 меланома имеет дифференциальные протеолитические фрагменты сыворотки ITIh5

Другой белок, выделенный с помощью колоночной хроматографии – белковая фракция, соответствующая ITIh5.Аналогично В случае с альбумином необходимо было убедиться, что белки с такая же аминокислотная последовательность была проанализирована в выделенном белке из сыворотки крови мышей с меланомой В16 и из сыворотка крови мышей без опухолей. Как показано на рис. 2А и В, протеомный анализ идентифицировали ITIh5 в двух группах.

Общее количество идентифицированных пептидов после протеолиз ITIh5 из сыворотки мышей без опухолей составил 32, что мышей с меланомой В16 было 35. Таким образом, в отличие от альбумина, в случае с серпином существенной разницы не наблюдалось в количество идентифицированных пептидных фрагментов ITIh5.Как обсуждалось выше, отсутствие вариаций количества идентифицированных пептидов в плазме при росте опухоли можно объяснить различными Механизмы модификации белков в организме. Серпин, в отличие от альбумина, является гликозилированным белком и его пространственная структура изменения из-за гликозилирования, а не из-за внутренних поперечных связей. Гликозилированные изменения белков сыворотки крови при опухолях роста обсуждались выше (2).

Среди идентифицированных пептидных фрагментов ITIh5 после протеолиза было идентифицировано 10 общих пептидов среди белки, полученные от мышей с опухолями, и белки, полученные из мышей без опухолей (таблица IV), в то время как остальные пептидные фрагменты были уникальны для опухоленосного мышей (таблица V, n=22) и мыши без опухолей (n=25).

Таблица IV Полутриптические пептиды тяжелая цепь 4 ингибитора интер-альфа-трипсина, идентифицированная в мыши с опухолями и без опухолей.

Таблица IV

Полутриптические пептиды тяжелая цепь 4 ингибитора интер-альфа-трипсина, идентифицированная в мыши с опухолями и без опухолей.

926.8700 9160 17048644 729-746

Ион пептида в B16 меланома (m/z)	Ион пептида в мыши без опухолей (m/z)	Аминокислоты (начало-конец)
674.3956		674,3995 98-103
	+1405,7664 1405.7547	171-181
1457,7798	1457,7543	820-830
1563,882	1563,858	812-824
1626.8700	1626.852	1-14
44	1704.8222	163-176
1973.9866	1973.9343
	2156.1239 2156.0816	544-560
1796,9473	1812,8909	272-288
4205,2788	4205,1424	188-224

Таблица V Полутриптические пептиды тяжелая цепь 4 ингибитора интер-альфа-трипсина, идентифицированная в только мыши с опухолями.

Таблица V

Полутриптические пептиды тяжелая цепь 4 ингибитора интер-альфа-трипсина, идентифицированная в только мыши с опухолями.

490-496 1040.5248 1126.5997 295-305 .9788 84 837-853 767-785

Ион пептида (m/z)	Аминокислоты (нач. до конца)
	733.3792
	790,4290 267-273
	905,5092 40-47
	916,5098 111-119
943,5501	859-866
280-289
697-705
1228.7227
	1277.6970 906-916
1330,7948	826-837
1545,8697	44-57
1609,8461	896-909
1780.0213	279-294
827-842
1926.9701
984.0943	659-678
2119.0905
	2354.1529 404-424
2427,2856	838-859
2544,3711	140-159
2977,5123	538-560
3499.9311	610–641

Среди пептидов, идентифицированных у мышей без опухолей, обнаружено двенадцать пептидов, которые частично или полностью перекрывается с тринадцатью пептидами, обнаруженными у мышей с B16 меланома (табл. VI).пептид фрагмент с аминокислотной последовательностью 104–121 и m/z 1794,9294 было обнаружено у мышей без опухолей. Этот пептид полностью перекрывается с пептидным фрагментом с аминокислотной последовательностью 111–119 и m/z 916,5098, обнаруженные у мышей с меланомой B16. Кроме того, пептид с аминокислотной последовательностью 140–158 и отношение m/z 2415,1894, обнаруженное у мышей без опухолей частично перекрываются с пептидом с аминокислотной последовательностью 140-159 и m / z 2544,3711, обнаруженный у мышей с меланомой B16.Пептид с аминокислотной последовательностью 171–195 и m/z 2943,3268. обнаруженный у мышей без опухолей, полностью перекрывающийся с пептидом с аминокислотной последовательностью 171–181, обнаруженной у мышей с B16 меланома (m/z, 1405,7664) и у мышей без опухолей (m/z 1405,7547). Пептид с аминокислотной последовательностью 265–273 и m/z 1016,4871, обнаруженный у мышей без опухолей, частично перекрывается с пептид с аминокислотной последовательностью 267–273 и m/z 790,429 обнаружен у мышей с меланомой В16.Пептид с амино кислотная последовательность 280–294 и m / z 1666,8365, обнаруженная в мышей без опухолей, частично перекрывающихся с пептидом с аминокислотная последовательность 279–294 и m/z 1780,0200 и полностью перекрывается с пептидом с аминокислотной последовательностью 280–289 и отношение m/z 1040,5248, обнаруженное у мышей с B16 меланома. Пептид с аминокислотной последовательностью 404–431 и m / z 3202,485, обнаруженный у мышей без опухолей, частично перекрывается с пептидом с аминокислотной последовательностью 404–424 и m/z 2354.1529 от мышей с меланомой В16. Пептид аминокислотной последовательностью 544–560, обнаруженной в мыши без опухолей (m/z, 2156,1239) и у мышей с меланомой B16 (m/z, 2,156,0816) частично перекрывается с пептидом с последовательность аминокислот 547–566 и m / z 2226,2278, обнаруженные в мышей с меланомой В16. Пептид с аминокислотной последовательностью 612–635 и m / z 2586,3754, обнаруженные у мышей без опухолей. частично перекрывается с пептидом с аминокислотной последовательностью 610–641 и m / z 3499.9311 обнаружен у мышей с В16 меланома. Пептид с аминокислотной последовательностью 656–673 и m/z 1791,8798, обнаруженные у мышей без опухолей, частично перекрываются с пептидом с аминокислотной последовательностью 659–678 и m/z 1 987 0943 найдено у мышей с меланомой B16. Пептид с. аминокислотная последовательность 822–827 и m/z 881,4796, обнаруженные в мышей без опухолей, частично перекрывающихся с пептидом с аминокислотная последовательность 826–837 и m / z 1330,7948, обнаруженные в мышей с меланомой В16.Пептид с аминокислотной последовательностью 895–905 и m / z 1311,651, обнаруженные у мышей без опухолей. частично перекрывается с пептидом с аминокислотной последовательностью 896–909 и m / z 1609,8461, обнаруженные у мышей с B16. меланома. Пептид с аминокислотной последовательностью 910–916 и m / z 793,4153, обнаруженный у мышей без опухолей, частично перекрывается с пептидом с аминокислотной последовательностью 906–916 и отношение m/z 1277,697, обнаруженное у мышей с меланомой B16. Таким образом, была подтверждена та же картина, что и для альбумина. для ИТИх5, т.е.е. ITIh5, полученный от мышей с меланомой B16, обеспечен полутриптические пептидные фрагменты, отличающиеся от полутриптических пептидные фрагменты ITIh5 из сыворотки мышей без опухолей. Этот результат указывал на разницу в доступности протеолиза сайты и, следовательно, другая молекулярная конформация альбумина и ITIh5 в сыворотке мышей с опухолями и без опухолей.

Таблица VI Перекрывающиеся пептиды тяжелая цепь 4 ингибитора интер-альфа-трипсина в опухоленосных и в мышей без опухолей.

Таблица VI

Перекрывающиеся пептиды тяжелая цепь 4 ингибитора интер-альфа-трипсина в опухоленосных и в мышей без опухолей.

Животные	Ион пептида (m/z)	Начало-конец	Аминокислота последовательность
Без опухолей мыши	1794,9294	104–121	K.QYSAAVGRGESAGIVKTT.G
Меланома B16	916.5098	111–119	Г.РГЕСАГИВК.Т
Без опухолей мыши	2415.1894	140–158	K.ITFELIYQELLQRRLGMYE.L
Меланома B16	2544.3711	140–159	K.ITFELIYQELLQRRLGMYEL.L + окисление (M)
Без опухолей мыши	2943,3268	171–195	K.HLQMDIYIFEPQGISILETESTFMT.P
Без опухолей мыши	1405.7547	171–181	K.HLQMDIYIFEP.Q
Меланома B16	1405.7664
Без опухолей Mice	1016.4871	265-273	A.Penlptmsk.n
B16 Melanoma	990.429	267-273	E.NLPTMSK.N
мыши	1666.8365	280–294	I.DKSGSMSGKKIQQTR.E + окисление (М)
Меланома В16	1780.0200	279–294	V.IDKSGSMSGKKIQQTR.E + окисление (M)
Меланома B16	1040.5248	280–289	I.DKSGSMSGKK.I + окисление (М)
Без опухолей мыши	3202,485	404–431	R.EAINGQYSLFCLGFGFDVNYPFLEKMAL. + окисление (М)
Меланома В16	2354.1529	404–424	R.EAINGQYSLFCLGFGFDVNYP.F
Без опухолей мыши	2156.0816	544–560	F.MERLWALLTIQQQLEQR.I
Меланома B16	2156.1239	544–560	F.MERLWALLTIQQQLEQR.I
Меланома B16	2226.2278	547–566	R.LWALLTIQQQLEQRISASGA.E
Без опухолей мыши	2586,3754	612–635	V.GDGMQRLPLAAQAHPFRPPVRGSK.L
Меланома B16	3499.9311	610–641	В.EVGDGMQRLPLAAQAHPFRPPVRGSKLMTVLK.G
Без опухолей мыши	1791,8798	656–673	R.ASRQYIPPGFPPGPPGPPG.F
Меланома B16	1987.0943	659–678	R.QYIPPGFPGPPGPPGFPAPP.G
Без опухолей мыши	881.4796	822–827	T.EYKWKK.T
Меланома B16	1330.7948 9006	869883 3 В.ККТЛФСВЛПГЛК.M
Без опухолей мыши	1311,651	895–905	V.WEPPVEPDNTK.R
Меланома B16	1609.8461	896–909	W.EPPVEPDNTKRTVK.V
Без опухолей мыши	793.4153	910–916	K.VQGVDYL.A
Меланома B16	1277.697	05 05 K.RTVKVQGVDYL.A

Сывороточный альбумин имеет дифференциальную конформационно-зависимая связывающая активность между опухоленосными и мыши без опухолей

На следующем этапе настоящего исследования было необходимо проверить, является ли биологическая активность оцениваемого белки были изменены при их конформационных изменениях.Для оценка функциональной активности альбумина, анализ СОЭ используется, что позволяет оценить конформационный статус и транспортные параметры альбумина. Для этого взаимодействие альбумина с помощью спинового зонда 16-доксилстеариновой кислоты. Как видно из таблицы VII показывают, что спин-меченая кислота по-разному взаимодействовала с альбумина в зависимости от того, был ли он получен из неопухолевого или мышей с опухолями. Наибольшая разница (почти в 1,4 раза) среди все определенные значения наблюдались в параметре дискриминации.По словам разработчиков прибора СОЭ, это параметр дискриминации характеризует конформацию молекула. Таким образом, полученные результаты подтвердили гипотезу что альбумин у мышей с опухолями и у мышей без опухолей дифференциальные конформации, которые могут участвовать в регуляции опухолеассоциированной активности белков.

Таблица VII Взаимодействие между альбумином и Спин-зонд жирных кислот 16-доксилстеаратная кислота определяется с помощью электронов анализ спинового резонанса.

Таблица VII

Взаимодействие между альбумином и Спин-зонд жирных кислот 16-доксилстеаратная кислота определяется с помощью электронов анализ спинового резонанса.

Параметр	Без опухолей мыши	Опухоленосные мыши	P-значение
Дискриминация параметр	-3,08±0,06	-2,2±0,09	<0,05
Эффективность связывания (%)	28.4±5,1	22,0±5,0	<0,05
Реальный транспорт качество (%)	39,9±5,4	34,5±6,3	>0,05
Детоксикация эффективность (%)	14,6±4,5	9,7±3,8	>0,05

Предварительная инъекция ITIh5 от мышей с Меланома B16 снижает рост меланомы у мышей

Впоследствии серия экспериментов in vivo были выполнены для изучения влияния inter ITIh5 (серпин) и альбумина на рост меланомы В16 (рис.3). С этой целью мышей вводили альбумин или ITIh5 из плазмы мышей с В16 меланома или мыши без опухоли за две недели до опухолевой клетки инокуляции, и наблюдалось влияние на рост опухоли (4). Было обнаружено, что альбумин, независимо от онкологического статуса животного, от которого оно было получено. полученный, не влиял на рост меланомы В16 у мышей. Серпин, полученный из свежей сыворотки крови неопухолевых животных или из замороженной сыворотки крови мышей с меланомой В16 не влияет рост меланомы В16.Как показано на рис. 3, значительное ингибирование рост опухоли был достигнут только в группе 7, в которой животные вводили ITIh5, полученный из свежей сыворотки Мыши C57Bl/6 с меланомой B16 до трансплантации опухоль. Предварительное замораживание этой сыворотки или использование аллогенных белок приводил к потере опухолеспецифической активности. Таким образом, только белок, выделенный из свежей сыворотки крови мышей C57Bl/6 значительно ингибировал рост меланомы у мышей C57Bl/6.

Ингибирование роста опухоли белком ITIh5 отражалось удлинением периода до визуального внешний вид опухоли: У мышей контрольной группы появление опухоли отмечено через 10 дней после опухоли трансплантации, тогда как в экспериментальной группе опухоли были зарегистрированы только на 20-е сутки после трансплантации опухолевых клеток.Этот можно интерпретировать как 100% ингибирование роста опухоли с помощью ITIh5 в течение 10 дней. Продолжительность жизни животных с меланомой В16 в контроле группе в среднем 40,8±2,1 дня, тогда как в группе 7, в которой ITIh5 вводили, она составила 65,3±3,4 дня (P<0,05).

Обсуждение

На сегодняшний день биологические эффекты сывороточных белков и их регулирование до конца не выяснено. В настоящее время исследовании оценивали опухолеспецифическую активность белков сыворотки крови, а также их регуляция конформационными изменениями.Однако основные механизмы этого эффекта до сих пор не выяснены. В Кроме того, не удалось воспроизвести in vivo приводит к системе in vitro; это может быть связано с обмен веществ и гомеостаз в живом организме, которые не могут быть воспроизводится на клеточной модели in vitro.

Предыдущее исследование нашей группы продемонстрировало опухолеспецифическая активность фракций сыворотки крови мышей с Карцинома Эрлиха, содержащая белки с молекулярной массой 50–100 кДа (4).Эта фракция содержал 40 белков, и различия были наиболее очевидны по анализ электрофоретической подвижности в основной полосе с молекулярным масса ~65 кДа. Основные изменения в этой полосе совпали с исчезновение альфа-1-антитрипсина и появление в тот же образец катепсина L1. Ингибитор интер-α-трипсина был дополнительно идентифицируется в этой фракции. Это привело к гипотеза о том, что опухолеспецифическая активность серпина проявляется α-1-антитрипсин, хотя молекулярная масса этого белка значительно ниже и составляет 45 кДа.В настоящем исследовании белок с аналогичной молекулярной массой 65–70 кДа из сыворотки мышей с меланомой B16, идентифицированной как серпин ITIh5, также показал конкретная деятельность. Результаты предыдущих исследований нашей группы, а также данные, полученные в настоящем исследовании, свидетельствуют о том, что в двух случаях — карциноме Эрлиха и меланоме В16 — белок с опухолеспецифической активностью была идентична и что его конформация определяет его биологическую специфичность.

В предыдущих исследованиях наша группа, а также другие исследователи не выявили существенных различий в спектр белков, выделенных из сыворотки опухоленосных и мыши без опухолей (3,4).Несмотря на это, сыворотка крови было обнаружено, что белки обладают опухолеспецифической активностью. Этот факт можно объяснить различиями в пробоподготовке этих белков в предыдущих и настоящих исследованиях. В частности, в в предыдущих исследованиях использовались по крайней мере два метода, которые вызывают денатурация белков (предварительное замораживание образцов или кипячение в буфер для электрофореза). Денатурация облегчает протеолиза и идентификации белков, но предотвращает оценка особенностей их телосложения.

Таким образом, в настоящем исследовании белок конформация не исследовалась этими стандартными методами. Использовали только свежие образцы сыворотки, разделение белков методом колоночной хроматографии и изменением конформации белков оценивали методом мягкого протеолиза (с 10% ацетонитрил) продукт. Было обнаружено, что идентичные сайты один и тот же белок дал разные спектры пептидных фрагментов между мышами без опухолей и мышами с меланомой. Этот результат продемонстрировали разницу в доступности этих сайтов для ферментов и, следовательно, дифференциальная конформация белков между двумя экспериментальными группами.Это важно Отметим, что конформационные изменения исследованных белков были связано с изменением их биологической активности. Таким образом настоящее исследование впервые продемонстрировало, насколько это возможно известно, что опухолеспецифическая активность ITIh5 была основана на его дифференциальная конформация между мышами без опухолей и теми, с меланомой. Этот результат подтвердил гипотезу о том, что конформация серпина определяет его опухолеспецифический эффект.

Полученные результаты можно образно объяснить как показано на схеме на рис.4А: Белок сыворотки можно рассматривать как ключ, обладающий стабильной часть и определенный компонент. Стабильная часть, представленная в настоящее исследование общих пептидов, присутствует во всех организмах данный вид. В настоящем исследовании специфическим компонентом является состоит из уникальных пептидов у конкретного человека и определяется его состоянием, в частности, наличием опухоли. Основным условием функционирования этого белка (ключевого) является отсутствие высокого сродства к тканям организма и другим сывороткам белки.Рост опухоли приводит к повышению концентрации этих группы антигенных детерминант, расположенных на поверхности опухолевых клеток. В ответ на это повышенная концентрация группы антигенных детерминант в клетках, наличие антигенные детерминанты, способные с ними взаимодействовать, ожидается снижение в сыворотке. Это может быть достигнуто за два пути: Появление белков острой фазы среди сыворотки крови белки (5) и конформационные изменения в белках сыворотки, как показано в настоящем исследовании.Чтобы чтобы изучить эту адаптацию к росту опухоли, настоящее исследование провел протеомное исследование, которое потребовало протеаз для расщепления нативный белок. Традиционные методы протеомного анализа белки включают предварительное замораживание образцов и кипячение для электрофореза. Однако в настоящем исследовании это денатурация приводит к потере опухолеспецифической активности образцы. Поэтому условия пробоподготовки были модифицируется путем исключения любых экспериментальных условий, ведущих к денатурация белков (рис.4Б).

В заключение, результаты настоящего исследования подтвердили гипотезу о том, что конформация белков сыворотки связано с их биологической активностью и с ростом опухоли в тело. Введение ITIh5 из сыворотки мышей с меланомой было продемонстрировано ингибирование роста опухоли на мышиной модели меланому при условии, что ее конформация сохранен.

Ссылки

1	Доненко Ф.В., Зиганшин Р.К., Ситдикова С.М., Аманджолов Б.С., Киселевский М.В. и Эфферт Т.: Индукция резистентность к развитию мышиной опухоли связана с изменения гликозилирования белков сыворотки крови.Мол Мед Отчет 2: 487–495. 2009. PubMed/NCBI .
2	Доненко Ф.В., Кабиева А.О. и Эфферт Т.: Опухолеспецифические факторы сыворотки крови как детерминанты опухолевого роста. Клин Лаб Диагн. 50–52:13–15. 2013. На английском, русском языках.
3	Кормош Н.Г., Зиганшин Р.Х., Шендер В.О., Воюшин К.Е. и Доненко Ф.В. Изменения белка сыворотки крови композиции у мышей с трансплантированной карциномой Эрлиха.Опыт быка Биол Мед. 158: 489–492. 2015. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI .
4	Доненко Ф.В., Зиганшин Р.Х., Анисимова Н.Ю., Воюшин К.Е., Ситдикова С.М., Аманджолов Б.С., Киселевский М.В., Efferth T: Идентификация серпина (альфа-1-антитрипсина) в виде сыворотки Ингибирующий рост фактор карциномы Эрлиха у мышей с помощью протеомики. Протеомика геномики рака. 7: 147–156. 2010. PubMed/NCBI .
5	Фишер Б., Гундуз Н., Койл Дж., Рудок С. и Saffer E: наличие ростостимулирующего фактора в сыворотке крови после удаления первичной опухоли у мышей.Рак Рез. 49:1996–2001. 1989. PubMed/NCBI .
6	Ситдикова С.М., Аманджолов Б.С., Киселевский М.В. и Доненко Ф.В.: Специфика рецидивов и метастазов экспериментальная трансплантированная карцинома Эрлиха и меланома В16. Бык Экспер Биол Мед. 143:80–82. 2007. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI .
7	Кондо Т: Неудобная правда: Рак разработка биомаркеров с использованием протеомики.Биохим Биофиз Акта. 1844: 861–865. 2014. Просмотр статьи : Google Scholar
8	Ситдикова С.М., Аманджолов Б.С., Киселевский М.В. и Доненко Ф.В.: Связывание лектина с лимфоцитами крови мыши во время рост опухоли. Бык Экспер Биол Мед. 140:445–448. 2005. Просмотр статьи : Google Scholar
9	Доненко Ф.В., Кабиева А.О., Волков ЮТ и Мороз Л.В.: Ингибирование цитотоксичности козьих антител мышиной сывороткой против тимоцитов мыши.Биул Эксп Биол Мед. 113: 642–644. 1992.В Русский. ПабМед/NCBI
10	Доненко Ф.В., Ситдикова С.М., Сырцев А.В., Градюшко А.Т., Киселевский М.В., Серебрякова М.В., Эфферт Т.: Белки, ассоциированные с гемоглобином, выделены из сыворотки крови Эрлиха. мышей с карциномой. Int J Oncol. 32:885–893. 2008. PubMed/NCBI .
11	Сержант К., Пинейро С., Хаусман Дж. Ф., Рикардо С.П. и Рено Дж.: Использование неспецифического трипсина расщепления для идентификации запасных белков семян в хлопья.J Протеом Res. 8:3182–3190. 2009. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI .
12	Алвес Г. и Ю.К.: Улучшающий пептид чувствительность идентификации в протеомике дробовика путем стратификации поискового пространства. J Протеом Res. 12:2571–2581. 2013. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI .
13	Лоу Р. Х., Чжан К., Макгоуэн С., Пряжка А. М., Сильверман Г.А., Вонг В., Росадо С.Дж., Лангендорф К.Г., Пайк Р.Н., Птица П.И. и Whisstock JC: Обзор надсемейства серпинов.Геном биол. 7:2162006. Просмотр статьи : Академия Google : PubMed/NCBI
14	Голдин А., Клайн И. и Софина З.П.: Экспериментальная оценка противоопухолевых препаратов в США и СССР и Клинические корреляции. (Монография Национального института рака 55. NIH Публикация №. 1933). Министерство здравоохранения и защиты прав человека США Услуги. Национальные институты здоровья, NCI; Бетесда, Мэриленд: 1980
15	Laemmli UK: расщепление структурных белков при сборке головки бактериофага Т4.Природа. 227:680–685. 1970. Посмотреть Статья : Google Scholar : PubMed/NCBI
16	Гурачевский А, Шиманович Е, Гурачевская Т. и Муравский В.: Внутриальбуминовая миграция связанного жирная кислота исследована с помощью спиновой метки ESR. Biochem Biophys Res Commun. 360:852–856. 2007. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI .
17	Дикнейт Г., Хервальд Х., Корте В., Алланор Y, Denton CP и Matucci Cerinic M: Фактор свертывания крови XIII: A многофункциональная трансглутаминаза с клиническим потенциалом в диапазоне условий.Тромб Хемост. 113: 686–697. 2015. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI .

Ce закрученный obiceiurile? Стиль письма по электронной почте. Obiceiul de a alege ceva

Șosetele sunt împrăștiate în cele mai de neimaginat locuri ale apartment, vasele nu sunt spălate, iar copilul, parcă și-ar fi stabilit un obiectiv care să vă aducă la sughițuri nervoase, în mod regulat de tubul de îti. Dacă «плюс сау минус» aceasta este o вообразите гам viața та, atunci este timpul să te gândești că dragostea și înçelegerea reciprocă au dispărut din ea.

Да, это точный ceea ce cred psihologii și persistă că, în cazuri destul de red, obiceiurile proaste ale membrilor gospodăriei sunt doar obiceiuri. «De obicei au un mesaj în spate. O persoană vrea s s spună ceva, de exemplu, este confuză n sentimente, bănuieşte că sa sentndrăegostit, nu este mulţumită de ceva n relaţie, dar îi este frică s s nu nnţeleasă greşit, revisă, este jenată s s o spună cu infractorul, nu ştie диплом «Апои передачи ацесте информации «интр-мод манипулятор»», спина Татьяна Зайчикова, психотерапевт, кандидат психологических наук.

„Tot ce facem, nu facem în zadar, ci cu nişte oameni anumiți”, продолжает Татьяна Викторовна. — Și într-un alt apartment, un «huligan» poate începe să învârte un tub de pastă fără niciun motiv. Dar „fără niciun motiv aparent” este doar la prima vedere. De fapt — acol persoana a avut otensiune în relație, împotriva cauzelor cărora a probet în acest fel.

Apelam la manipulare atunci când cele trei nevoi de bază nu sunt îndeplinite: securitate, acceptare și recunoaștere.De instanceu, о femeie ню nu primește recunoaștere pentru gătit, spălat, pentru faptul că treburile casnice sunt, de asemenea, muncă. Ea va începe să curțe podelele sfidător, astfel încât nimeni să nu poată merge timp de 1,5 ore. Dacă cineva trece și lasă о urmă, ea va țipa. Adică, obiceiul ei де лицо temele în cel mai inoportun момент, când casa este plină de oameni, este doar o provocare pentru a se asigura că «răul» este în sfârșit observat. Adică, чел puțin у.е. скандал, poate atrage atenția membrilor gospodăriei nerecunoscători asupra muncii ei.Дар ню ар фи război, я-ам lăuda пе сей dragi mai де și pentru orice lucru mărunt. Acest lucru este valabil și pentru copyii.

Dacă o persoană știe că poate să-l lovească, chiar și cu un cuvânt, dacă nu este sigur că cel care este lângă el va veni în ajutor la momentul potrivit, atunci nu va avea senzația cĮ odihne. unei astfel де persoane și ва deveni dăunător. «Плюс, experiența de comunicare negativă primită în copilărie devine un șablon prin care ne construim relațiile în viitor.- высказалась Татьяна Зайчикова. — Dacă am Fi Vrut Să Exprimeăm Resentimente Faţţ de Părinţii Noştri, Să izbucnim n Lacrimi în Genumchi şi Să Spuneme CE anumche ne îngrijorează, Dar Ne-au Ignorat, Acum ţţi Va Fi Teamă Să-ţi Exprimi Gândurile Direct DIN Cauza Fricii Subconştiente fi neînțeleși și respinși. Trebuie să fii sigur că ai grijă де Tine. Da, mi-e frică de respingere, de neînçelegere. Dar… Dar de fapt, asta înseamnă că nu mă pot accepta aşa cum sunt înainte. De instanceu, nemachiat, prost, fără succes.Trebuie să învățăm să ne asigurăm siguranță – ню lumea ар trebui să facă asta pentru mine, nu este o dădacă care este obligată să-mi anticipez dorinцелe și să ghicească де ce am nevoie. Dar eu însumi/eu însumi nu fac aşa ceva, sau invers, fac că ajung în situații nesigure. De instanceu, eu cred că nu am dreptul să greșesc, iar când mă poticnesc și ei pufnesc la mine din prostia mea universală, mă pocăiesc sau înghit în tăcere, deși mă gândesc în sinea mea: «Ei bine, nu se înt. орицин. Ce \ ce nu este slab și nu mă place deloc, chiar dacă este „păcătos”.În loc să te accepți ca atare — să faci o greţeală, să nu pierzi sentientul de confort — la urma urmei, data viitoare nu vei face acest lucru și, dacă apare condamnarea, opreste-o spunându-i direct batjocoritorului despre asta astacoritorului. Fie că este vorba de soț/soție, părinți, prieteni, colegi.

Dacă „răul” nu este capabil să schimbe curentul ea însăși, atunci Татьяна Викторовна îl sfatuiește pe „ofensat” să acționeze: „Spune: „Mă enervează când tu …” Atunci ar trebui să cer an cer an fraze „ești un prost”, „prost”, „prost”, și mai precis: „Mă jignește că, deși am fost de acord, șosete (jucării, dacă este un copil) zac oriunde și de resentimente vreau să plâng.Vreau să-ți fie milă de mine, îmbrățișează-mă, te iubesc foarte mult. Uneori este nevoie де май multe ori pentru ca situația să se îmbunătățească. Dar dacă continuă, în ciuda solicitărilor, atunci este mai mult despre comunicații întrerupte. В целом, când pasiunea s-a potolit între soți, aceștia o creează în mod subconștient cu ajutorul … șosete împrăstiate și sunet puternic la televizor. Acest lucru dă un val de emoții, ele sunt împăcate și sentientele par să fie împrospătate.

Când ți-ai dat seama ce anume faci greșit, nu ar trebui să schimbi totul deodată.В целом, Potrivit psihologului, Эсте важно să începi cu Respectul față де Tine, față де modurile сказка де te proteja și де te comporta. «Dacă уважение, atunci ам șansa să-l уважение pe cealaltă persoană, felurile lui де comportament, экзистенци șansa де а фи де согласие. Dacă ню уважение, atunci mă voi reface brusc și mă voi trata pe celălalt точное în același мод, — crede Татьяна Викторовна. — Ну существую бине сау рау. Mănâncă numai ceea ce îți aduce plăcere și nu. Întrebarea Эсте că trebuie сă găsești regulile де viață уход са FIE acceptabile pentru toată lumea cu уход ле împărtăşești.

Și pentru a înțelege mai multe despre tine, testele simple de mai jos vă vor ajuta. Esența лор Эсте că orice emoție Эсте în primul Rând ип fenomen fizic.

UN MUSCHI INCLUS VA SPUNE CU CE AI ПРОБЛЕМА

MASCĂ . Aceasta este о dorință patologică де mulțumi cuiva. Gândiți-vă dacă реализовать область са заслуги ип asemenea подбородок? Poate ar trebui să te încrii într-un club. Conștientizarea Talelor tale te face fericit, iar oamenii vor ajunge la tine

GAT STRÂNS .Nu-Ци permiți Să spui nimic. Astmul, toate bolile pulmonare — aceasta este și o dorință reprimată de a persista asupra propriei persoane, de a-și afirma drepturile в целом. Încearcă să o faci, vei reuși.

УМЭРИ ЦИКАНД . Ай simțul datoriei. Ți-ai asumat atât de multă responsabilitate încât nu te poti descurca. E timpul Să schimbi ceva și Să descarci. Ну Fi cel mai puternic ню este chiar atât де rău.

МАЙНИ АСКУНС . Și, de asemenea, tremur, amorțeală este nemulțumire.Nu o mai conduceti în colțul îndepărtat al subconștientului. Gândește-те ла аста și începe să acționezi. Scrieți о scrisoare infractorului dacă nu puteți vorbi față în față cu el.

СТРЕСС НА ПИЦИОАРЕ . Tremuratul în genunchi și greutatea Эсте Teama де лицо următorul па, precum și teama де ню putea лицо ceva. Interzice-ti sa te infiora la gandul «sa fugi, trebuie sa salvezi». Amintiți-vă: cel care nu se grăbește nicăieri timp.

ȚI ARDE UNGHII? E ВРЕМЯ СА ВОРБИТИ!

Faptul că o soție sau o colegă își muscă unghiile indică o agresiune ascunsă.Mai mult decât atât, agresivitatea — nu în sensul de furie, ci cauzată de incapacitatea de a face ceea ce o persoană crede de fapt de cuviință. În același timp, de regulă, astfel de oameni nu se pot exprima față de mai mult de o persoană; în acest stil de subestimare, ei comunică cu toată lumea. «Oice manipulări cu gura, buzele, dinții și cu atât mai mult cu mestecatul vorbesc despre iritare», — написала психолог Татьяна Зайчикова. — Astfel, o persoană le spune celorlalți: «Nu îmi persoană le spune celorlalți: „Nu îmi persoană le spune celorlalți: „Nu îmi permit să fac ceva, să spun, să-l exprim acum, ceva nu mă mulțumește și, pentru a elibera tensiunea, mă roade.

Ce sa fac? Cel mai bun lucru este să discuti totul cu agresorul tău. Dar mai întâi, amintiți-vă situația заботится о провокационном чувстве ацета. Dacă acest lucru nu este posibil (această persoană este branche de tine sau a murit), încearcă să-i scrii o scrisoare. Sau stai singur, pune un scaun în fața ta și spune-i tot ce nu ai putut spune persoanei. Mai mult, exprimă-te cu emoții și acele pasiuni care de fapt fierb în tine. Și mai bine — atunci stai pe acest scaun și răspunde-ți singur în numele acelei persoane.Dacă plângi, strigi, vorbești, atunci asta va fi suficient pentru a pune capăt chinului. Totuși, dacă Problema Este încă Repetită Acum, atunci scaunul este doar o repetiție. Apoi Să vorbesc cu acea persoană в прямом эфире. Altfel, nimic nu se va schimba și nu vei rupe cercul.

Dacă или persoană răspunde la orice întrebare cu un strigat, aceasta indică или agresiune acumulată de mult timp. Urletul este un exces de energie. Prin urmare, o persoană caută motive în lumea exterioară pentru a le revărsa și a-și justifica cumvatensiunea.Călcat pe picior, împins sau a privit greșit — lasă-mă să răspund, te voi respinge mai întâi. O persoană fărătensiune nu va răspunde niciodată cu un strigăt, pentru ca nu are energie pentru asta. Energia resentimentelor Эсте ип кал întunecat уход те poate duce către nimeni ню știe unde. Și înainte де слияния după ea, dă-ți seama ce te deranjează pentru ню проблема лица.

ВДЫХАНИЕ-ЭВАКУАЦИЯ — ИНТЕЛЕС. Într-o stare de tensiune, este imposibil să evaluezi în mod adecvat ceea ce se întamplă.Sfat: Încearcă să respiri. Aceasta este или technica americană de la opus, când prin desprinderea fizică, o persoană își revine psihologic. Poate că lacrimile vor ieși din resentimente — планы. Dacă s-a întâmplat ceva nesemnificativ și Pur și simplu te-ai înzelat, vei simți immediat — se va lumina în capul tău. Deci, inspiră timp de 2 secunde, ține-ți respirația timp de 2 secunde, expira timp de 3 secunde. Faceți Аста де 4 Ори. Acum strângeți toți mușchii, toate părțile corpului pe rând, de la vârful capului până la vârful degetelor de la picioare și Relaxați-vă.Tensiunea va dispărea, iar gândurile vor fi fluizate. Acum ești capabil să iei decizii inteligente.

OAMENI FAMOSI DESPRE CE OBICEIURI DE CARE AI SCAPA

Тарас Чорновил, политик: «Nici unul. La sosirea acasă, continui să împrăștie lucruri, mai fumez. Pune-ți toate hârtiile și documentele oriunde, apoi caută-le un timp lung și plictisitor, rĮcisulândîs Singurul lucru Este că am renunțat la obiceiul de a începe точный финал mizeria, când nu se găsește nimic.Ultima picătură fost că a trebuit cumva să cumpăr ип încărcător și ип cablu noi. Apoi au fost doi, iar înainte de asta — din cauza faptului că nu am găsit documentele necesare, munca mea Importantă și Urgentă căzut. Și atunci am decis să refuz să-mi aduc locuința în statul Hiroshima și Nagasaki. Между прочим, ми-ам терминал нумая камера, ci și teritoriile împărțite cu gospodăria. Erau grămezi де cărți главный уход tocmai mă uitasem, hârtii – chiar și о parte din pat эра ocupată cu ele. Pentru că îmi plăcea să mă uit peste toate astea înainte де слияния ла culcare.Curăț acum, nu pot spune asta în mod regulat. Dar de îndată ce înçeleg că totul este deja acolo — nu existsă unde să merg altundeva, Įncep să-l șterg. Și înainte, trăiau ca într-o glumă, în care šeful îi strigă secretarei: «De ce mi-ai șters praful?! Am notat numărul de phone acolo! Și acum, uneori, un astfel de atac de curățenie mă atacă, încât încep să curăț chiar și gresie în locuri greu accesibile. Mai aveam un obicei: când conduceam o mașină, aruncam mucuri de țigară pe geam, ceva fleac.Și apoi m-am prins că atunci când plec în străinătate, îmi este rușine să arunc gunoiul în stradă. Nu este normal — e atât de curat acolo. Și acasă, mi-am permis asta. Și apoi m-am gândit: «Стоп, pe cine respect mai mult: străinii sau propria mea țară?» Эпоха Scrumiera nevinovat де голе, дар акум себе umple repede, яар апои мă opresc специальные ла benzinării să о golesc.

Анна Герман, политик : «Nu am avut niciodată obiceiuri proaste. Nu sunt perfect, dar am fost crescut în aşa fel încât să nu arunc lucrilile, totul este la locul lui, nu strig.În același timp, sunt complet спокойный cu privire la faptul că cineva nu a închis borcanul, aruncat papuci. Știu mereu să văd doar ceea ce imi place, doar binele: atât în ​​stăini, cât și în viața de zi cu zi. Prin urmare, îmi este ușor să trăiesc. Și uneori ajutat. În timp ce alții gemeau: e rău, și nu este, nu i-am înceles pe acesti oameni: e bine, soarele strălucește, o zi bună, totul este inainte. Principalul lucru este familia și sănătatea, iar orice altceva sunt fleacuri care nu Merită Atenție.Și uneori pot trece pe lângă unele lucruri rele până când cineva mi le arată. Și Devin nervos când îmi atrag atenția asupra ceva ce s-ar putea să nu văd în viața mea.
Владимир Гришко, cântăreț: „Aveam obiceiul de a întârzia, dar mi-am mutat ceasul inainte cu 15 минут și chiar am început să ajung mai devreme, ceea ce toată lumea este surprinsă. Până la urmă, sunt consilier al preşedintelui, trebuie să fiu organizat, iar în cazul meu a întárzia este pur și simplu неприлично.Dar s-a întâmplat că, când în urmă cu un an, șoferul meu s-a îmbolnăvit și a trebuit să plănuiesc singur timpul pentru drum, am primit acest mic păcat. De asemenea, am încetat să mănânc dulciuri pentru nu fi supraponderal. Кончить? Medicii s-au speriat de consecințele obezității. Шахта Pentru, cuvântul medicilor este legea.

Da, am și eu acest obicei. Dar am scăpat де-еа пур și simplu — слияние ла bucătărie doar dacă chiar nu am nevoie să iau prânzul sau cina. Și restul zilei și nopții — ню, ню!

Ei bine, să citim ce ne sfătuiesc autorii articolului.L-am parcurs prima și mi-am dat seama că am ceva de adăugat pe заслуга. В целом, articolul este destul de atractiv și valoros.

ştii, Astfel de Oameni Prin Fi Caleaţi Cu Pusările Plinuţe Care Nu Zboară — Găini şi Curcani, SE PLIMBă Константа Прин Curte Ciuguulind Ceea CE Găsesesc şi, Dacă Se Dovedeşte Fi Destul de Comestibil, Atumci îl Poţi înghiţi.

Aşa se plimbă omul toată ziua prin casă, ce găsește, apoi mănâncă repede, din obișnuință. Astfel, o persoană se limitează în același «zbor».Cu aceste gustări frecvente și inutile, se ingrașă килограмм в плюс, își strică silueta și, cel mai важный, îi strică sănătatea.

Ce suntem obișnuiți să mâncăm? Ficat, dulciuri, chipuri, crutoane, sandvișuri, prăjituri, prăjituri cu ceai și alte prostii gustoase după părerea noastră. Aceste prostii mărunte stau adesea în calea unui corp perfect și a unei sănătăți bune.

Mai ales acum, când toate aceste gustari instancere sunt făcute dintr-un număr mare de substanțe chimice (coloranti, conservanti, potențiatori de aromă), precum și zahăr și sirop de glucoză (al doilea, de altfel, este maitop) , uleiuri și grăsimi origine vegetală (toată lumea știe uleiul de palmier), pe care cu siguranță nu il puteți numi util.

Iată câteva sfaturi bune care te vor ajuta să scapi treptat de acest obicei de a mesteca ceva în tine și să-l ucizi complet.

в fi ocupat

Cel mai adesea, mestecăm din faptul că nu avem nimic de-a face cu noi înșine. Се са фак? — «Nu e nimic de făcut, atunci mă duc să mănânc ceva». Aşa că mestecăm toată ziua și, prin urmare, luam килограмм în plus pe care le uram mai târziu. Faceți afaceri, ce?

Intră în sport (ăsta este cel mai bun lucru de făcut), cumpără-ți o bicicletă și mergi sănătos, poți aranja o curațenie generală casei, mergi la cumpărături la un pic.В целом, т.е. poți gândi la o mulțime de lucruri pentru tine, totul depinde de interesele și dorințele tale.

Acesta este cel mai практический sfat, restul nici nu le poti citi! На cele mai multe cazuri, mestecăm cel puțin ceva de făcut! Știu toate acestea din propria experiență, motiv pentru care vorbesc cu atâta încredere.

În loc de 3 mese, mancați de 5-6 ori pe zi

Dar asta nu înseamnă că cantitatea totală de alimente va creste. Va rămâne același, doar împărțiți porția obișnuită, пример, де prânz în 2 mai mici.в 13:00 до 3 часов дня. Astfel, senzația де пены ню те ва deranja atât де таре și ню вей consuma калорий в плюс у.е. gustările сказки.

Мой собственный видеоклип на эту тему. Puteți încerca această opțiune.

Gustările trebuie să fie corerte

Dacă tot doriți să gustați, atunci gustările ar trebui să fie bune și corecte. În loc de bomboane, puteți mânca fructe (banane, măr, pere) — de asemenea, dulci și gustoase, în loc de un Tort de la magazin, coaceți singur o prăjitură, dar fără zahăr și făină (există de multi rețe acum), faceți o salată ușoară și așa mai leavet.

Acum au apărut chiar și chipsurile de legume. Ca chipsurile, gustoase, dar nu atât de dăunătoare.

Explorează emotiile care te fac să vrei să mesteci

Analizează, urmărește și studiază точно се emoții îți influențează dorința де местеца. În funcție de ce emoții, pot fi învinși și direcționați către ceva mai valoros și mai util. Dacă esti supărat, atunci cumpără-ți или peră și bate-o, например. В целом, o acțiune de înlocuire poate fi întotdeauna găsită dacă existsă o dorință.

Unii mestecă din frustrare, alții, dimpotrivă, din bucurie. Cunoaște-те mai bine și evită călătoriile ла фригидер.

Май путин саре, май путин захар

Mâncarea prea sărată, dimpotrivă, creste pofta de dulciuri. De asemenea, ню Эсте necesar са mănânci nimic уход ню Эсте делок sărat, sarea ар trebui са fie în mâncare, дар ню multă. Prea mult zahăr в диете crește dorința де манка чева гра. Zahărul poate fi eliminat complet din alimentație, nu este vital pentru noi.

Sarea duce, de asemenea, la umflare și astfel creste greutatea datorită apei, care este reținută în cesuturi. Folosiți înlocuitori în loc de zahăr.

Dieta planificată, in care micul dejun este mainul

Cel mai булочка mod de a mânca правильный este să vă întocmiți un plan de masă, în care trebuie să indicați și să pictați — ce, când și în ce cantități ar trebui să mâncați. Și dacă slăbești în mod activ, atunci în plan poți să pictezi și calorii, ceea ce te va ajuta foarte mult.Și nu poți sări peste micul dejun.

Micul dejun este masa maină, ar trebui să fie dens și foarte bogat, pentru că ne oferă un plus de energie pentru întreaga zi și, de asemenea, ajută să ne nveselim înainte de o zi plină de muncă. Un mic dejun copyos și satisfăcător îți va oferi literalmente sațietate până la ora prânzului, iar apoi la ora 11-12 nu vei mai dori să bei ceai cu ciocolată.

Depinde de persoana. Dacă mănânc corect dimineața, voi umbla somnoros toată ziua.Prefer o cină copyioasă, cu 2 ore înainte de culcare.

Respectând aceste 6 sfaturi, crezând în tine și depunând efort, poți scăpa definitiv de obiceiul de a mesteca Constant ceva, reumplendu-ți astfel bagajele de grăsime de sub piele și distrugându-ți sănătatea. Fii activ și trăieste frumos, nu pentru mâncare.

Mesteci capace încă de la școală și de fiecare data când îți Ceri scuze unei colege, «subminând» următorul ei stilou? Sau poate nu poți rezista dorinței де лицо ординировать Peste tot și aliniezi Automatic borcanele de cosmetice în rânduri egale pe masa de toaletă prietenei сказка și apoi întâlnești аспект EI возмущен?

Spune ce-ți place, dar un obicei este într-adevăr doua natură, iar a scăpa de un alt „eu” careinterază cu viața normală poate fi foarte dificil.Cu toate acestea, înainte de a scăpa de ceva, trebuie să înțelegeți motivele apariției sale, spune psihologul Оксана Альберти.

Repetăm ​​aceeași acțiune în fiecare zi, uneori fără să ne dăm seama. De multe ori dăm de dezaprobarea celorlalți, ne certam cu cei dragi, dacă obiceiurile sunt complet dăunătoare, de instanceu, fumatul sau pasiunea pentru băuturile alcoolice. Dar ceea ce este surprinzător este că, oricât ne-am strădui să scăpăm de ele, obiceiurile nu merg nicăieri. Pe lângă relațiile răsfățate cu rudele și prietenii, primim și disconfort intern care ne împiedică să traim.
«Majoritatea obiceiurilor sunt semnale din subconștientul nostru. Dacă știi Să ле citești, poți înțelege despre о persoană chiar și ceea ce nu înțelege despre sine. De asemenea, poți înțelege ce știe despre el însuși, диплом a trait și cum trăieste, cum s-a construit. Pentru a face acest lucru, aveți nevoie de dorință, atenție și puține cunoștințe », spune psihologul. De aceea ne-am asumat о sarcină foarte interesantă, dar dificilă — să aflăm ce spun anumite obiceiuri proaste despre noi.
ARSAREA UNGHIILOR
Inutil să spun că o persoană cu unghii muscate arată respingătoare? Pentru mulți bărbați, degetele female îngrijite sunt un fetiș și, prin urmare, nu ar trebui să contați pe o atenție sporită față de persoana dvs. dacă în loc de unghii aveți doar ceva care seamănă cu ele. «Obișnuința de a roade unghiile vorbește despre tensiune internă, despre anxietate inconștientă. De regulă, este associat cu stima de sine scăzută, Lipsa iubirii де sine. Кроме того, mușcându-ne mâinile și făcându-le urate, inconștient ne pedepsim pentru că nu suntem demni de iubire», комментирует экспертул.
OBIECTUL DE A roade capacul unui stilou
În primul rând, de fiecare dată când aduci un stilou la gură, aminteşte-ți că poate fi murdar și atunci vei începe sęi zilogi nu doar Probleme. Și în al doilea rând, un astfel de obicei vă va afecta cu siguranță reputația la locul de muncă. Оксана Альберти este sigură că o persoană care roade un stilou este percepută de ceilalți ca un tip dezechilibrat: «Acest obicei vorbește despre anxietatea șitensiunea internă proprietarului sau.Și încă ceva: după cum știți, orice obiect alungit alungit din inconștientul nostru este un simbol falic. Obiceiul де suge sau mesteca în мод постоянной aşa ceva este о modalitate inconștientă де obține plăcere prin gură (устно). Acest lucru Poate indica un grad ridicat de concentrare subconștientă asupra plăcerilor erotice.
Obiectul de fumat si alcool
potrivit psihologului, rolul tepenedţei fiziologice acest caze este foarte exagerat, an acest caze este este doar o modality de a-a şi ustififica Propria Nedorinţţ de a a-a a justifica propriable proste: «Fumatul alcoolul ne oferă о plăcere suplimentară, ne dau ип настроения де ип притока де энергии, агитаци сентименталь.Aceștia joacă și rolul unor «спокойная» психология. Adesea, oamenii care sunt implicati în activitate intelectuală activă fumează — au nevoie de el pentru a încetini conștiința lor activă.

OBIECTUL DE A MĂNCAT EXCESIOR
Din păcate, unii oameni nu se pot opri la timp nu numai cu alcool, ci și cu mâncare. Ei mănâncă până când nasturele blugilor себе desprind cu о crăpătură și până себе simt rău. Ca rezultat — exces de greutate, nemulțumire față de sine și o dorință incontrolabilă de a profita de durerea pe care ea și-a creat-o.
«Радэкина мажоритарная обслуга, ноастре проасте эсте доринца де плэсере суплиментара». Mâncarea este o mare plăcere. Вдобавок, в субконститул-ностру, манкареа и сексуальность сунта форте асемэнэтоаре ка сензации. Când пе Lipsește dragostea, încercăm Să о compensăm у.е. секс. Când nu este suficientă dragoste și sex, compensăm cu mâncare», объяснила Оксана Альберти. DRAGOSTE FANATICĂ PENTRU COMANDĂ
Astfel de oameni sunt numiți curățare — игра слов lucrurile în ordine Peste tot și chiar și acolo unde nu sunt întrebați despre asta.Acest lucru îi enervează uneori pe cei din jur, deoarece un astfel de comportament ia forma maniei, și nu o poftă sănătoasă de curățenie. «Acest obicei vorbește despre dorința unei persoane de un perfect și te poate împedica să te simți confortabil dacă cineva îți perturbă ordinea Ideală. Cu Cât vrei Să păstrezi ceva perfect, cu atât mai des va fi încălcat, pentru că perfectul nu existsă în lume. Și cu Cât dorința та Эсте mai puternică, cu atât mai mare va fi травма pentru тин, încălcarea acestui идеально.De instanceu, te vei certa în mod Constant cu CEI Care Rearanjează lucrurile pe desktop și vei deveni Pur și simplu insuportabil pentru colegii tăi”, комментарий экспертул.
Obiceiul de a cere din nou
Cu siguranță îi Ceri uneori interlocutorului sfârșitul frazei, deși l-ai auzit perfect. Multi се întreabă де се се întamplă аста. Оксана Альберти ответила: «Возможно, что aceasta înseamnă ecolalie — или repetare necontrolată ultimei fraze auzite. Acest fenomen la adulți poate fi un simptom al dezvoltării schizofreniei Sau a altor boli mintale.În acest caz, este mai bine să contactați un специалист.

Obiectul de a alege Ceva
Dacă Eşti Bântuit de o Rană Care Se Hindecă, Lac de Unghii, UN Coş Cook Apărut şi Cu Siguranţţ Vrei Să Le Ridici, Atunci Cel Mai Probabil Trebuie Să Lucrezi La Atingerea Armoniei. «Acest obicei este asemănător cu muscatul unghiilor — vorbește despre anxietate, nemulțumire. De asemenea, despre Idealismul subconștientului — vrei ca totul să fie cumva perfect, dar cel mai важный — nu aşa cum este acum.De instanceu, dacă atingeți oja neîntărită — aceasta este o dorință subconștientă ca aceasta să se usuce Cât mai repede și să vă facă perfect frumoasă cât mai curând posibil. La fel și cu rana — aceasta indică o goană internă Constantă », explică psihologul.
OBIECTUL DE A SCORȚI DEGETELE
Potrivit Oksana Alberti, bărbații își trosnesc degetele mai des decât femeile. «Un astfel de obicei vorbește despre îndoiala internă de sine», adaugă psihologul.
OBIECTUL DE A ĚI MUSCA DE OBAJII ȘI BUZE
Cei care muscă Constant Interiorul yyoki-ului și buzelor Sunt Familizați cu Problema rănilor neplăcute din gură, dar aceeasta psilogult nu este singura.„Gura este un loc prin care primim multe plăceri sensuale, nu doar din mâncarea delicioasă, ci și din cele erotice. Autovătămarea inconștientă în regiunea gurii este pedeapsa de sine pentru o orientare internă excesivă către aceste plăceri.
OBIECTUL DE A RUPE ETICHETE
Anterior, despre cei care smulgeau Constant etichetele de pretutindeni (де-ла пакет де ампон, borcane cu cremă și разнообразный murături) se spunea că le lipsește грудная клетка для половых органов, dar Oksana Alberti Are : «Din nou, vorbim de Idealism și perfecționism.In subconștientul nostru, o suprafață netedă și curată arată mai perfectă».

După CE Ne-Am Topate PE Noi nşine şi PE Oamenii DIN JURUL NOSTRU, Puteţi Vedea Câte Obiceuri Proaste Avem: Unii îşi Roade Sau îşi Muşcă Prange Buza Inferioară, Alţii SE SCARPINă PE CAP SAU SE ZGârie PE Faţţ Până Când Apar Răni Sângeroase. Practicând astfel de obiceiuri, dăunăm nu numai propriului nostru corp (де экземпляр, Tramatizarea pielii duce la infecții), ci și imaginii. De acord că nu toată lumea este mulțumită de vederea unei persoane care ronțăie pe stradă sau la birou.

Nu te grăbi să te condamni pe tine sau pe alții, deoarece obiceiurile proaste nu sunt întotdeuna un semn de educație necorespunzătoare. Uneori, corpul nostru indică în acest fel prezența unor probleme de sănătate. După ce ați reușit să le descifreți corect, veți scăpa pentru totdeauna de aceste «lucruri mici» neplăcute.

Muşcând Unghiile

Psihologiis Cred Că Reflexul de Suge: Familie, La Locul de Mună, Nemulţumire Faţţ de Aspect, Sentimente de Arceetate Sau Vinovţţie ş Alte Stedri Emoţionale Similare Ale Unei Persoane.

Încercați să analizați când a început și apoi să eliminați situația care provoacă disconfort Psychological. Dacă nu vă puteți ajuta singur, cereți ajutor de la un psiholog. Discuția у.е. ип булочка специалист vă va ajuta să vă înțelegeți și să depășiți dependența.

scarpina-te in cap

La fel ca și în cazul прецедент, pielea poate fi rezultatul unor experiențe emoționale: atunci când se pregătește pentru un interviu sau un exchange важный, sau re țo seru seenКроме того, ацест obicei poate semnala infecții fungice și alte boli sau poate fi o reacție alergică la amponul greșit, unele Produse alimentare sau luând medicamente. У дерматолога, у аллерголога и у невропатолога есть идентификация причинно-следственной связи.

atinge-ți fața

Mulți oameni au obiceiul de a-și ține mâinile aproape de față și, uneori, chiar să se scarpine pe piele până când apare o rană. Acest obicei poate indica uscarea excesivă pielii sau prezența unei surse inflamatorii.De asemenea, pielea poate fi un simptom al demodicozei (o boală care este însoțită de leziuni cutanate microscopice). Când începe în ген, îti doresti постоянная onoarea ochiului.

Scrâşneşte degetele

Oamenii CERORA LE PLACE Să-I SCARţEASCă DEGETELE RMARCă FATTUL Că Acest Lucru îi Ajută Să Elibereze Tensiunea, S s ​​devină Rairgide şi Să îşi Reaxeze Mâinile. Însă mediciii nu recomandă să faceți acest lucru, deoarece se destatica, ceea ce poate duce la разнообразная проблема.Un травматолог ortoped у.е. experiență ва ajuta ла determinarea cauzei senzației neplăcute де ригидности în articulații și va recomanda proceduri și poate chiar un set de exerciții. Probabil, motivul pentru tot este distribuția incorectă a ncărcăturii, prin eliminarea căreia, dependența enervantă va dispărea pentru totdeauna.

Sfaturi utile

Multe obiceiuri proaste sunt inconștiente. Nu încercați Să scăpați де эле Peste noapte. Mai întâi trebuie să acceptați măcar ideea că aceasta sau acea Problemă Există și că această проблема требуй растворения.

Cereți prietenilor și familiei să vă urmărească și să ia notițe de fiecare dată când vă ducesi mâinile la față sau vă înclinați.

Încercați să înlocuiți un obicei prost cu unul bun. În loc să vă muscati unghiile, puteți folosi mâinile pentru a broda sau tricota.

Data viitoare când ai chef să te zgârie pe cap, mergi la o oglindă. Вероятно, că nu vă va plăcea foarte mult și veți dezvăța.

Mulți oameni subestimează puterea sugestiei. Închide ochii și încearcă să-ți Imaginezi că ai Scăpat де ип obicei nefericit.

Cu toții avem anumite obiceiuri, atât bune, cât și rele. Rareori ne gândim la ele din nou — în primul rând pentru că sunt… bine… familyi. Cu toate acestea, v-ați întrebat vreodată când și cum le-ați achiziționat? De instanceu, dacă vă muscati des unghiile, de unde a venit acest obicei nervos și mai ales subconștient?

DACă NE CONSULTEAMEM CU NEUROLOGIANE şi OAMENI de ştiinţţ Comportamentali dese Care Parte A Creierului Este Repairs Pudru Obiceiurile Nostre, Este Puţin Probabil Ca Răsmsuunsul Lor S s Ne Surprindă — Obiceiurile SE Formează în Centrul Creierului, Aşa-Numitul Ganglion Bazal.Ei bine, partea logică a creierului nostru responsabilă pentru luarea deciziilor semnificative, numită cortexul prefrontal, provoacă adesea sensee de vinovăție după ce a luat parte la un conportament nedorit și ilogic. De instanceu, când tu, din impuls, scoți un card de credit in portofel, partea emoțională a creierului tău este responsabilă pentru asta, dar după aceea partea logică începe să-ti amintească că nu ți-ai putea allowe acei pantofi scum trebuie să stai jos câteva săptămâni.пе pâine și apă. Aceleași părți але creierului tău себе activează atunci când те răsfăț у.е. о Altă bucată де деликта де ciocolată și începi Să сожаления după doar câteva минуту.

Ce pot fi внимательный obiceiuri положительный? Obiceiurile положительный горшок фи внимательный doar acele obiceiuri уход au ип efect befic asupra sănătății noastre fizice și psihice. Persoanele Care dezvoltă или mulțime de obiceiuri положительный tind să manifeste un nivel ridicat de disciplină și autocontrol. Cu alte cuvinte, cortexul lor prefrontal lucrează la capacitate maximă, nepermițând emoțiilor noastre să preia controlul asupra comportamentului nostru atunci când nu ne dorim.Pe de altă parte, dacă folosim rar partea creierului nostru responsabilă de comportamentul logic, acest lucru poate duce la formarea rapidă obiceiurilor proaste. Presupun că ați văzut deja că obiceiurile noastre sunt cele care determină în cele din urmă dacă vom fi fericiți sau nu.

Ролул obiceiului в личном кабинете

Deci, с.e. leagă personalitatea noastră și obiceiurile pe care le formăm? Putem defini Bine Personalitatea ca «Улучшите внешний вид и добавите индивидуальности».Cel mai adesea, obiceiurile apar точное acolo, chiar în această «coaja exterioară». Кроме того, obiceiurile noastre reprezintă o mare parte personalității noastre. Și, prin urmare, chiar și cele mai aparent mici și nesemnificative obiceiuri ne pot allowe să privim în profunzimile propriului nostru suflet și să înçelegem ce este cu adevărat ascuns acolo. Ei bine, în acest articol, veți afla ce pot spune (și fac) unele dintre obiceiurile noastre despre noi și personalitatea noastră.

Ашадар, iată ce spun aceste cinci obiceiuri despre noi:

«Personalitatea noastră este, în cea mai mare parte, totalitatea obiceiurilor noastre» — Стивен Кови

1. Плимбар та

Пэтти Вуд, эксперт по лимбажулу тела, состоит из модуля по уходу, объединяющего несколько вариантов персонализации. Dacă mergi cu corpul înclinat înainte (де-парк s-ar arunca spre cineva sau ceva) și privesti drept inainte, atunci cel mai probabil ești o persoană ambițioasă și intenționată.În același timp, poți părea inabordabil și rece față de ceilalți oameni. Dacă ai ип мерс uşor, în mare parte călci pe degetele de la ambele picioare și te uiți în jos în timp ce mergi, acest lucru indică o mai mare introversie, timiditate și Visare cu ochii deschiși.

Oamenii cu un mers эластичный, уход se uită постоянный în jur în timp ce merg, sunt de obicei sociabili și buni, deși pot fi predispuși la vanitate. Și, în cele din urmă, oamenii al căror Mers este lejer și temeinic și în timp ce merg fac fiecare pas, le place să fie în societate, au un grad ridicat de empatie și sunt orientați spre echipă.

2. Стиль письма по электронной почте

Единый психологический кредит că стиле сообщения электронной почты (включая fi scrisorile де Hârtie) poate dezvalui multe despre caracterul și personalitatea persoanei care le-a scris. De example, absența completă a greșelilor de scriere и erorilor grammaticale indică atenția și alfabetizarea autorului, dar și posibila lui tendință spre perfecționism și Idealizare. Scrisorile lungi vorbesc despre или personalitate detaliată și energică. Вдобавок, acest lucru poate indica faptul că autorului unei astfel de scrisori îi Lipsește ceva din viața sa.Introvertiților nu le place «apa» в тексте, încercând să ajunga direct la obiect, în timp ce extroversii scriu într-un stil mai Relaxat și mai неофициальный și, de asemenea, le place să se «joace» cu cuvintele și de să devieze субъективные эли.

3. Пунктуальность

ţi s-a întâmplat vreodată a întâmplat vreodată c căntâ a trebuit seakeri pentru căa atâlnire de afaceri pentru că antâlnire de a afaceri pentru căa ai. Dacă opționalitatea și Lipsa де пунктуальность а.е. devenit obiceiul tău, oamenii din jurul tău s-ar putea să te рассмотрит о persoană nesigură sau prea Relaxată.Ei bine, dacă încercați să ajungeți mai devreme de fiecare dată, acest lucru poate indica или ușoară tendință la nevroză. Și, în sfârșit, oamenii care încearcă să vină la minut arată de obicei trăsături de caracter precum capacitatea de a gasi un limbaj comun cu alți oameni, conștiinciozitate și fiabilitate.

4. Felul în care mănânci

Джульетта Богосян, эксперт по коммуникациям в Лос-Анджелесе, а также основатель пищевой науки, или фирма по уходу за студией, отвечающая за человека, занимающегося вопросами пищевых продуктов, образована с помощью этого метода, который помог многим людям изменить свою личность.«Объем алиментарного пищевого зелья состоит из нескольких аспектов индивидуального питания каждого человека, прекумула и общего пищевого ацестея», — написал Богосян. Celor care mănâncă încet «В общем, ле место са aibă controlul și să știu să se bucure de viață». Adesea, alături de asta, sunt și oameni foarte echilibrați și ncrezători на синусе. Oamenii care înghit într-o clipită totul din farfurie „sunt adesea ambițioși, orientați spre obiective, dar și nerăbdători”.

„Viteza cu care oamenii mănâncă are foarte mult de-a face cu viteza cu care trăiești și te bucuri de viață”, adaugă Bogosian.Ei bine, cum rămâne cu oamenii care nu supporta anumite alimente? Este posibil să devină pur și simplu un obicei de respingere acestor produse, care s-au dezvoltat în copilărie. Reticenţa RidiCol de încăpţânată de ancerca alime ali (uneori denumită «Neofobie alimenea») A FOST, DE ASEMENEA, ASOCIATă CU Anumite Trăsături de Personalitor şi Caracteruciali ale Psihicului, Cum Ar Fi areetaTea, Tendinţa La Nevroză şi Frica de Experienţe Noi.

5. Скрисул двс. де мана

Grafologia este stiința care studiază caracteristicile fizice ale scrisului de mână și modul în care acestea se raportează la trasăturile de caracter.Unii psihologi cred că examinarea scrisului de mână este capabil să ofere или вообразите destul de detaliată caracteristicilor personalității și a trăsăturilor de caracter ale unei anumite persoane. Grafologii, experți în analiza scrisului de mână, sustin că scrisul de mână al unei persoane poate indica peste 5.000 de trasături de personalitate diferite. Iată doar câteva dintre ele:

• Dimensiunea literelor и cuvintelor: literele majuscule indică faptul că doriți să fiți observat și înceles.Literele mici indică capacitatea де-а-се-концентры и де-се-концентры путернический și sunt de obicei un semn al introvertiților.
• Направление: dacă ai tendința de a nclina literele spre dreapta, poate indica faptul că ești prietenos, сентиментальный и импульсивный импульс. Lipsa înclinării literelor este un semn al unei personalități cool și methodice. Panta literelor ла stânga sugerează Că Prerați Să lucrați cu lucruri mai degrabă decât cu oamenii.
• Împingerea mânerului: presiunea puternica asupra unui pix sau creion indică o puternică emotivitate și o tendință de a-și pierde cumpătul.Presiunea ușoară indică о atitudine mai uşoară față де viață și о dorință де experiențe Noi.
• Sunt scrisorile tale legate Intre ele: dacă scrisorile tale sunt strâns în cuvinte, este mai probabil să ai un character logic, methodic și să iei decizii informate. Dacă literele dintr-un cuvânt sunt îndepărtate, aceasta indică o persoană intelectuală și intuitivă.